碧云天在线咨询


温馨提示:客服在线时间为工作日9:00-17:00。
其他时间请发送邮件,我们会尽快给您回复。

产品订购与售后服务:order@beyotime.com
技术咨询:info@beyotime.com

中文 |English
试剂
质粒抽提 |DNA纯化胶回收
基因组DNA抽提 |DNA电泳
DNA分子量标准 |菌种与培养
感受态制备 |T载体、质粒 |基因突变
DNA连接 |DNA标记和检测 |内切酶
修饰酶 |反转录 |PCR相关 |RNA相关
其他
|重组蛋白 |生化酶 |蛋白定量
裂解及蛋白抽提 |蛋白纯化
抗体制备 |蛋白电泳
蛋白分子量标准 |一抗 |二抗
Western |免疫沉淀 |免疫染色 |ELISA
细胞凋亡坏死 |细胞增殖 |自噬
细胞培养 |细胞组织染色 |细胞转染
细胞组分分离
EMSA相关 |报告基因相关
一氧化氮相关 |活性氧相关
炎症相关 |代谢相关
抑制剂激活剂等 |荧光探针
其他试剂盒
常用试剂
仪器
脱色摇床 |细菌培养摇床
漩涡振荡器 |混匀仪 |搅拌器
超声破碎仪 |匀浆机
其它混合破碎仪器 |移液器类
培养箱 |水浴锅 |干燥箱、烘箱
干式恒温器 |其它温控设备 |制冰机
定时器 |离心机 |氮吹仪 |旋转蒸发仪
真空泵及其它泵 |蠕动泵 |灭菌设备
洗板机 |超声波清洗器 |紫外分析仪
酶标仪 |天平 |pH计 |电导仪
氧化还原电位仪 |溶氧仪
超净工作台 |生物安全柜
耗材
离心管 |PCR耗材 |冻存管 |枪头
移液管 |巴氏吸管
离心管盒、冻存盒 |冰盒 |离心管架
枪头盒 |培养皿 |培养板 |磁性分离
封板膜 |手套等防护用品 |载玻片
盖玻片 |存储盒 |染色缸染色架
其他染色耗材 |印迹膜与洗膜盒
胶片与暗盒 |滤纸、滤膜、滤器
空柱管 |蓝盖瓶 |其他实验耗材
订货电话:
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
周一至周五9:00-17:00
订货邮件:
order@beyotime.com
订货QQ:
4001683301
订单下载
碧云天订单.xls
产品目录下载
碧云天产品目录.pdf
订货须知
碧云天网站 微信公众号

 pGL6-miR (报告基因质粒)

  产品编号D2106
  产品包装: 1μg
  产品价格: 862.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2106 pGL6-miR (报告基因质粒) 1μg 862.00元

      pGL6-miR (报告基因质粒)是碧云天自行研发的一种用于microRNA(miRNA)等研究的萤光素酶报告基因质粒。该质粒可用于把目的基因的3'非翻译区(3'-untranslated region, 3'-UTR)或其它适当序列插入到其多克隆位点,然后在哺乳动物细胞中高灵敏度地检测特定microRNA(miRNA)或其它非编码RNA等对该基因3'-UTR或其它靶序列调控活性的报告基因质粒。
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pGL6-miR以碧云天的pGL6质粒为模板,具有氨苄青霉素抗性,并在萤火虫萤光素酶基因之后添加了多克隆位点,便于插入目的基因的3'-UTR或其它适当的靶序列。
      pGL6-miR的主要工作原理是,把目的基因的3'非翻译区(3'-untranslated region, 3'-UTR)或其它适当序列插入到萤光素酶基因(luc2)的下游,转染细胞并检测萤光素酶的表达。如果细胞内源或外源表达的miRNA与靶序列结合,通常会抑制萤光素酶的翻译或促进mRNA的降解,从而使萤光素酶的表达量减少。因此通过本报告基因质粒检测萤光素酶的表达水平,可以检测内源或外源表达的miRNA是否对插入的靶序列有调控作用。并且可以通过靶序列中预测的miRNA结合位点的突变,用于比较突变前后萤光素酶表达水平的变化。如果预测的miRNA位点突变后,miRNA的调控作用消失,则基本上说明突变的位点就是miRNA在靶序列中具体的结合位点。
      pGL6-miR带有中低等强度的PGK启动子,有利于检测miRNA等对于萤火虫萤光素酶表达水平的下调作用,即当miRNA的抑制作用较弱时也能检测到。并且PGK启动子可以在人、大鼠、小鼠甚至酵母细胞中都可以发挥作用。
      pGL6-miR质粒的主要信息如下:

Base pairs 6097bp
Feature Nucleotide Position
PGK promoter 20-538
luc2 reporter gene 549-2202
Multiple cloning region 2208-2261
SV40 late poly(A) sinal 2268-2512
SV40 early enhancer/promoter 2554-2972
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region 2998-3792
Synthetic poly(A) signal 3817-3865
Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region 4980-5840
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 5945-6097

      pGL6-miR质粒图谱如下:

      pGL6-miR质粒的多克隆位点的详细图谱如下(请特别注意其中的NheI不是单酶切位点):

KpnI NheI
2169 AGGCCAAGAA GGGCGGCAAG ATCGCCGTGT
AAAGATCC GG
TACCGCTAGC
TCCGGTTCTT CCCGCCGTTC TAGCGGCACA
TTTCTAGG CC
ATGGCGATCG
BamHI EcoRV XhoI SacI MluI BglII HindIII
2220 GGATCCGATA TCCTCGAGGA GCTCACGCGT AGATCTAAGC
TT CGATCTCG
CCTAGGCTAT AGGAGCTCCT CGAGTGCGCA TCTAGATTCG
AA GCTAGAGC

      pGL6-miR中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pGL6-miR)包括:

Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I
BssH II Eco72 I EcoR I Nde I Nru I PflM I Pme I
Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II Sam I SnaB I Spl I
Srf I Tth111 I Vsp I Xcm I

      pGL6-miR中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pGL6-miR once)包括:

Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 Sal I G`TCGA,C 3881
BspM II T`CCGG,A 445 EcoN I CCTNN`N,NNAGG 3472
BsaB I GATNN|NNATC 997 Xba I T`CTAG,A 3796
BsrG I T`GTAC,A 1040 BsiC I TT`CG,AA 3867
Dra III CAC,NNN`GTG 1696 BstB I TT`CG,AA 3867
Acc65 I G`GTAC,C 2209 ApaL I G`TGCA,C 4445
Asp718 G`GTAC,C 2209 Ple I GAGTC 9/10 4510
Kpn I G,GTAC`C 2213 HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/13 4710
BamH I G`GATC,C 2221 Not I GC`GGCC,GC 4951
EcoR V GAT|ATC 2229 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 4975
PaeR7 I C`TCGA,G 2233 Pst I C,TGCA`G 4975
Xho I C`TCGA,G 2233 BstE II G`GTNAC,C 4978
Sac I G,AGCT`C 243 Ahd I GACNN,N`NNGTC 5053
Mlu I A`CGCG,T 2245 Bsu36 I CC`TNA,GG 5409
Bgl II A`GATC,T 2251 Pvu I CG,AT`CG 5423
HinD III A`AGCT,T 2257 Sac II CC,GC`GG 5447
Apo I R`AATT,Y 2361 Bst1107 I GTA|TAC 5563
Mun I C`AATT,G 2425 Xca I GTA|TAC 5563

      pGL6-miR质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      Forward primer (2135-2154): 5′GTTGGACGCCCGCAAGATCC 3′
      Reverse primer (2303-2322): 5′GGTTTGTCCAAACTCATCAA 3′
      pGL6-miR的全序列信息:D2106 pGL6-miR-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2106 pGL6-miR (报告基因质粒) 1μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽
提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 插入靶序列:在pGL6-miR多克隆位点选取适当的酶切位点,经酶切处理后连入目的基因的3'-UTR或
其它适当的靶序列。
3. 以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤
光素酶报告基因检测试剂盒(RG016/RG017)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
相关产品:

产品编号 产品名称 包装
D2102 pGL6 (报告基因质粒) 1μg
D2105 pGL6-TA (报告基因质粒) 1μg
D2106 pGL6-miR (报告基因质粒) 1μg
D2108 pAP1-luc (报告基因质粒) 1μg
D2109 pAP1-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2112 pARE-luc (报告基因质粒) 1μg
D2152 pGRE-luc (报告基因质粒) 1μg
D2179 pISRE-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2198 pMyc-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2206 pNFκB-luc (报告基因质粒) 1μg
D2207 pNFκB-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2223 pp53-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2248 pRb-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2259 pSTAT3-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2306 pAAT-promoter-luc (报告基因质粒) 1μg
D2386 pIL-6-promoter-luc (报告基因质粒) 1μg
D2480 pTNF-α-promoter-luc (报告基因质粒) 1μg
D2481 pTNF-α-promoter-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2762 pRL-SV40-N (报告基因质粒) 1μg
D2768 pRL-SV40-C (报告基因质粒) 1μg
RG005 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100次
RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 1000次
RG016 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100次
RG017 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 1000次
RG027 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100次
RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 1000次
RG0036 β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒 200次
相关产品请点击如下按钮: