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报告基因质粒

pSTAT3-TA-luc (报告基因质粒)
产品编号: D2259-1μg
产品包装: 1μg
产品价格: 888.00元
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D2259-1μg pSTAT3-TA-luc (报告基因质粒) 1μg 888.00元

      pSTAT3-TA-luc (报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测STAT3(Signal transducer and activator of transcription 3)转录活性水平的报告基因质粒。pSTAT3-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个STAT3结合位点,可以高灵敏度地检测STAT3的激活水平。
      pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pSTAT3-TA-luc质粒的主要信息如下:

Base pairs 5672
STAT3 response element 32-86
Minimal TA promoter (pTA) 109-131
luc2 reporter gene 173-1825
SV40 late poly(A) signal 1860-2081
SV40 early enhancer/promoter 2129-2547
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region 2572-3366
Synthetic poly(A) signal 3391-3439
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 3506-3525
ColE1-derived plasmid replication origin 3763
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 4554-5414
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 5519-5672
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 5621-5640

      pSTAT3-TA-luc质粒的图谱如下:

 

      pSTAT3-TA-luc的多克隆位点及STAT3 response element的详细图谱如下:

BglI KpnI NheI XhoI STAT3 response element
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCCTCGA
G TGCTTCCCG
AACGTTGCTT
CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGGAGCT
C ACGAAGGGC
TTGCAACGAA
BglII HindIII
51 CCCGAACGTT GCTTCCCGAA CGTTGCTTCC
GAACGT AGAT
CTGCAGAAGC
GGGCTTGCAA CGAAGGGCTT GCAACGAAGG
CTTGCA TCTA
GACGTCTTCG
Minimal TA promoter
101
TTAGACAC TA
GAGGGTATA
AATCTGTG AT
CTCCCATAT

      pSTAT3-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pSTAT3-TA-luc)包括:

Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I Nru I PflM I
Pme I Pml I PspA I Rsr II Sac I Sma I SnaB I Spl I
Srf I Tth111 I Vsp I Xcm I Xma I Xmn I

      pSTAT3-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pSTAT3-TA-luc once)包括:

Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 BsiC I TT`CG,AA 3442
Bgl I GCCN,NNN`NGGC 9 BstB I TT`CG,AA 3442
Acc65 I G`GTAC,C 15 Sal I G`TCGA,C 3456
Asp718 G`GTAC,C 15 Afl III A`CRYG,T 3706
Kpn I G,GTAC`C 19 ApaL I G`TGCA,C 4020
Nhe I G`CTAG,C 21 HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/13 4285
PaeR7 I C`TCGA,G 27 Not I GC`GGCC,GC 4526
Xho I C`TCGA,G 27 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 4550
Bgl II A`GATC,T 88 BstE II G`GTNAC,C 4553
Hind III A`AGCT,T 98 Ahd I GACNN,N`NNGTC 4628
BsrG I T`GTAC,A 664 Bsu36 I CC`TNA,GG 4984
Dra III CAC,NNN`GTG 1320 Pvu I CG,AT`CG 4998
Gsu I CTGGAG 21/19 1553 Sac II CC,GC`GG 5022
Bpm I CTGGAG 22/20 1554 Bst1107 I GTA|TAC 5138
Apo I R`AATT,Y 1936 Xca I GTA|TAC 5138
Mun I C`AATT,G 2000 Spe I A`CTAG,T 5457
BamH I G`GATC,C 2093 BsmA I GTCTC`/9 5469
Stu I AGG|CCT 2526 BsmB I CGTCTC 7/11 5470
EcoN I CCTNN`N,NNAGG 3047

      pSTAT3-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      RVprimer3 (5621-5640):
      CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
      pSTAT3-TA-luc的全序列信息: D2259 pSTAT3-TA-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2259-1μg pSTAT3-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2259-100μg pSTAT3-TA-luc (报告基因质粒) 100μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pSTAT3-TA-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/
RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
4. 可以激活STAT3的试剂,可以用作pSTAT3-TA-luc报告基因检测时的阳性对照。
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使用本产品的文献:
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TSC1/TSC2 inactivation inhibits AKT through mTORC1-dependent up-regulation ofmSTAT3-PTENcascade.
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3. Han L, Yue X, Zhou X, Lan FM, You G, Zhang W, Zhang KL, Zhang CZ, Cheng JQ, Yu SZ, Pu PY, Jiang T, Kang CS.
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