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报告基因质粒

pAAT-promoter-luc (报告基因质粒)
产品编号: D2306-1μg
产品包装: 1μg
产品价格: 888.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2306-1μg pAAT-promoter-luc (报告基因质粒) 1μg 888.00元

      pAAT-promoter-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测AAT promoter转录活性水平的报告基因质粒。
      pAAT-promoter-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human AAT的启动子序列,可以高灵敏度地检测AAT promoter的激活水平。
      AAT(alpha 1-Antitrypsin或alpha-1 antiproteinase,也简称为A1AT),又称serine peptidase inhibitor,clade A,member 1或serine proteinase inhibitor,clade A,member 1(简称SERPINA1),是一种可以被分泌到细胞外的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可以抑制elastase、plasmin、thrombin、trypsin和chymotrypsin等。AAT基因缺陷时会导致肺气肿(emphysema)或肝脏疾病等。
      pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pAAT-promoter-luc质粒的主要信息如下:

Base pairs 6445
AAT promoter 20-900
luc2 reporter gene 946-2598
SV40 late poly(A) signal 2633-2854
SV40 early enhancer/promoter 2902-3320
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region 3345-4139
Synthetic poly(A) signal 4164-4212
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 4279-4298
ColE1-derived plasmid replication origin 4536
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 5327-6187
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 6292-6445
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 6394-6413

      pAAT-promoter-luc质粒的图谱如下:

      pAAT-promoter-luc的多克隆位点及AAT-promoter的详细图谱如下:

BglI KpnI AAT promoter BamHI
1 GGCCTAACTG
GCCGGTACC T
TCCCTGGTCT GAATGTGTGT
GCTGGAGGAT
CCGGATTGAC
CGGCCATGG A
AGGGACCAGA CTTACACACA
CGACCTCCTA
51 CCTGTGGGTC ACTCGCCTGG TAGAGCCCCA AGGTGGAGGC
ATAAATGGGA
GGACACCCAG TGAGCGGACC ATCTCGGGGT TCCACCTCCG
TATTTACCCT
101 CTGGTGAATG ACAGAAGGGG CAAAAATGCA CTCATCCATT
CACTCTGCAA
GACCACTTAC TGTCTTCCCC GTTTTTACGT GAGTAGGTAA
GTGAGACGTT
151 GTATCTACGG CACGTACGCC AGCTCCCAAG CAGGTTTGCG
GGTTGCACAG
CATAGATGCC GTGCATGCGG TCGAGGGTTC GTCCAAACGC
CCAACGTGTC
ApaI
201 CGGGCGATGC AATCTGATTT AGGCTTTTAA AGGGATTGCA
ATCAAGTGGG
GCCCGCTACG TTAGACTAAA TCCGAAAATT TCCCTAACGT
TAGTTCACCC
251 GCCCCACTAG CCTCAACCCT GTACCTCCCC TCCCCTCCAC
CCCCAGCAGT
CGGGGTGATC GGAGTTGGGA CATGGAGGGG AGGGGAGGTG
GGGGTCGTCA
StuI
301 CTCCAAAGGC CTCCAACAAC CCCAGAGTGG GGGCCATGTA
TCCAAAGAAA
GAGGTTTCCG GAGGTTGTTG GGGTCTCACC CCCGGTACAT
AGGTTTCTTT
351 CTCCAAGCTG TATATGGATC ACACTGGTTT TCCAGGAGCA
AAAACAGAAA
GAGGTTCGAC ATATACCTAG TGTGACCAAA AGGTCCTCGT
TTTTGTCTTT
401 CAGGCCTGAG GCTGGTCAAA ATTGAACCTC CTCCTGCTCT
GAGCAGCCTG
GTCCGGACTC CGACCAGTTT TAACTTGGAG GAGGACGAGA
CTCGTCGGAC
451 GGGGGCAGAC TAAGCAGAGG GCTGTGCAGA CCCACATAAA
GAGCCTACTG
CCCCCGTCTG ATTCGTCTCC CGACACGTCT GGGTGTATTT
CTCGGATGAC
501 TGTGCCAGGC ACTTCACCCG AGGCACTTCA CAAGCATGCT
TGGGAATGAA
ACACGGTCCG TGAAGTGGGC TCCGTGAAGT GTTCGTACGA
ACCCTTACTT
551 ACTTCCAACT CTTTGGGATG CAGGTGAAAC AGTTCCTGGT
TCAGAGAGGT
TGAAGGTTGA GAAACCCTAC GTCCACTTTG TCAAGGACCA
AGTCTCTCCA
601 GAAGCGGCCT GCCTGAGGCA GCACAGCTCT TCTTTACAGA
TGTGCTTCCC
CTTCGCCGGA CGGACTCCGT CGTGTCGAGA AGAAATGTCT
ACACGAAGGG
651 CACCTCTACC CTGTCTCACG GCCCCCCATG CCAGCCTGAC
GGTTGTGTCT
GTGGAGATGG GACAGAGTGC CGGGGGGTAC GGTCGGACTG
CCAACACAGA
701 GCCTCAGTCA TGCTCCATTT TTCCATCGGG ACCATCAAGA
GGGTGTTTGT
CGGAGTCAGT ACGAGGTAAA AAGGTAGCCC TGGTAGTTCT
CCCACAAACA
751 GTCTAAGGCT GACTGGGTAA CTTTGGATGA GCGGTCTCTC
CGCTCTGAGC
CAGATTCCGA CTGACCCATT GAAACCTACT CGCCAGAGAG
GCGAGACTCG
801 CTGTTTCCTC ATCTGTCAAA TGGGCTCTAA CCCACTCTGA
TCTCCCAGGG
GACAAAGGAG TAGACAGTTT ACCCGAGATT GGGTGAGACT
AGAGGGTCCC
851 CGGCAGTAAG TCTTCAGCAT CAGGCATTTT GGGGTGACTC
AGTAAATGGT
GCCGTCATTC AGAAGTCGTA GTCCGTAAAA CCCCACTGAG
TCATTTACCA
BglII HindIII
901 AGATCTGCAG AAGCTTGGCA ATCCGGTACT GTTGGTAAAG CCACCATGGA
TCTAGACGTC TTCGAACCGT TAGGCCATGA CAACCATTTC GGTGGTACCT

      pAAT-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pAAT-promoter-luc)包括:

Aat II Afl II Asc I Ase I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I
Nde I Nhe I Nru I PaeR7 I PflM I
Pme I Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II
Sac I Sma I SnaB I Srf I Tth111 I

      pAAT-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pAAT-promoter-luc once)包括:

Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 Mun I C`AATT,G 2773
Acc65 I G`GTAC,C 15 BsiC I TT`CG,AA 4215
Asp718 G`GTAC,C 15 BstB I TT`CG,AA 4215
Kpn I G,GTAC`C 19 Sal I G`TCGA,C 4229
BsaA I YAC|GTR 164 Afl III A`CRYG,T 4479
BsiW I C`GTAC,G 164 ApaL I G`TGCA,C 4793
Spl I C`GTAC,G 164 Not I GC`GGCC,GC 5299
Xcm I CCANNNN,N`NNNNTGG 361 BstE II G`GTNAC,C 5326
Xmn I GAANN|NNTTC 581 Ahd I GACNN,N`NNGTC 5401
Bsa I GGTCTC 7/11 790 Pvu I CG,AT`CG 5771
Bgl II A`GATC,T 902 Sac II CC,GC`GG 5795
Hind III A`AGCT,T 912 Bst1107 I GTA|TAC 5911
BsrG I T`GTAC,A 1437 Xca I GTA|TAC 5911
Dra III CAC,NNN`GTG 2093 Spe I A`CTAG,T 6230
Apo I R`AATT,Y 2709 BsmB I CGTCTC 7/11 6243

      pAAT-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      RVprimer3 (6394-6413):
      CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
      pAAT-promoter-luc的全序列信息: D2306 pAAT-promoter-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2306-1μg pAAT-promoter-luc(报告基因质粒) 1μg
D2306-100μg pAAT-promoter-luc(报告基因质粒) 100μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pAAT-promoter-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
4. 可以激活AAT promoter的试剂,可以用作pAAT-promoter-luc报告基因检测时的阳性对照。
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