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 pARE-luc (报告基因质粒)

  产品编号D2112
  产品包装: 1μg
  产品价格: 862.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2112 pARE-luc (报告基因质粒) 1μg 862.00元

      pARE-luc (报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测基于顺式作用元件antioxidant response element(ARE,抗氧化响应元件)的转录活性水平的报告基因质粒。pARE-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了2个ARE结合位点,可以高灵敏度地检测顺式作用元件ARE的激活水平,可以用于检测细胞的抗氧化水平或氧化应激状态。
      pGL6质粒模板是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pARE-luc质粒的主要信息如下:

Base pairs 5622
ARE response element(ARE RE) 32-77
luc2 reporter gene 123-1775
SV40 late poly(A)signal 1810-2031
SV40 early enhancer/promoter 2079-2497
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor)coding region 2522-3316
Synthetic poly(A)signal 3341-3389
Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region 3456-3475
ColE1-derived plasmid replication origin 3713
Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region 4504-5364
Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site 5469-5622
Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region 5571-5590

      pARE-luc质粒的图谱如下:

      pARE-luc的多克隆位点及ARE response element的详细图谱如下:

BglI KpnI NheI XhoI ARE response element
1 GGCCTAACTG GCCGGTACCG CTAGCCTCGA
G ACTGAGGGT
GACTCAGCAA
CCGGATTGAC CGGCCATGGC GATCGGAGCT
C TGACTCCCA
CTGAGTCGTT
BglII HindIII
51 AATCACTGAG GGTGACTCAG
CAAAATC AGA
TCTGCAGAAG CTTGGCAATC
TTAGTGACTC CCACTGAGTC
GTTTTAG TCT
AGACGTCTTC GAACCGTTAG

      pARE-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pARE-luc)包括:

Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I
BspM II BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I
Nru I PflM I Pme I Pml I Psp1406 I PspA I Rsr II
Sac I Sma I SnaB I Spl I Srf I Tth111 I Vsp I
Xcm I Xma I

      pARE-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pARE-luc once)包括:

Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 EcoN I CCTNN`N,NNAGG 2997
Bgl I GCCN,NNN`NGGC 9 BsiC I TT`CG,AA 3392
Acc65 I G`GTAC,C 15 BstB I TT`CG,AA 3392
Asp718 G`GTAC,C 15 Sal I G`TCGA,C 3406
Kpn I G,GTAC`C 19 Afl III A`CRYG,T 3656
Nhe I G`CTAG,C 21 ApaL I G`TGCA,C 3970
PaeR7 I C`TCGA,G 27 HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/13 4235
Xho I C`TCGA,G 27 Not I GC`GGCC,GC 4476
Bgl II A`GATC,T 79 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 4500
Hind III A`AGCT,T 89 BstE II G`GTNAC,C 4503
BsrG I T`GTAC,A 614 Ahd I GACNN,N`NNGTC 4578
Dra III CAC,NNN`GTG 1270 Bsu36 I CC`TNA,GG 4934
Gsu I CTGGAG 21/19 1503 Pvu I CG,AT`CG 4948
Bpm I CTGGAG 22/20 1504 Sac II CC,GC`GG 4972
Apo I R`AATT,Y 1886 Bst1107 I GTA|TAC 5088
Mun I C`AATT,G 1950 Xca I GTA|TAC 5088
BamH I G`GATC,C 2043 Spe I A`CTAG,T 5407
Stu I AGG|CCT 2476 BsmB I CGTCTC 7/11 5420

      pARE-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      RVprimer3(5571-5590):
      CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
      pARE-luc的全序列信息:D2112 pARE-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2112 pARE-luc (报告基因质粒) 1μg
说明书 1份

保存条件:
     -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pARE-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
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使用本产品的文献:
1. Li C, Pan Z, Xu T, Zhang C, Wu Q, Niu Y.
Puerarin induces the upregulation of glutathione levels and nuclear translocation of Nrf2 through PI3K/Akt/GSK-3β signaling events in PC12 cells exposed to lead.
Neurotoxicol Teratol. 2014 Nov-Dec;46:1-9.
2. Huang K, Chen C, Hao J, Huang J, Wang S, Liu P, Huang H.
Polydatin promotes Nrf2-ARE anti-oxidative pathway through activating Sirt1 to resist AGEs-induced upregulation of fibronetin and transforming growth factor-β1 in rat glomerular messangial cells.
Mol Cell Endocrinol. 2015 Jan 5;399:178-89. 
3.Zou Y, Wang R, Guo H, Dong M.
Phytoestrogen β-Ecdysterone Protects PC12 Cells Against MPP+-Induced Neurotoxicity In Vitro: Involvement of PI3K-Nrf2-Regulated Pathway.
Toxicol Sci. 2015 Sep;147(1):28-38.
4.Shan JL, He HT, Li MX, Zhu JW, Cheng Y, Hu N, Wang G, Wang D, Yang XQ, He Y, Xiao HL, Tong WD, Yang ZZ.
APE1 promotes antioxidant capacity by regulating Nrf-2 function through a redox-dependent mechanism.
Free Radic Biol Med. 2015 Jan;78:11-22.
5.Shi Z, Niu Y, Wang Q, Shi L, Guo H, Liu Y, Zhu Y, Liu S, Liu C, Chen X, Zhang R.
Reduction of DNA damage induced by titanium dioxide nanoparticles through Nrf2 in vitro and in vivo.
J Hazard Mater. 2015 Nov 15;298:310-9.