碧云天的微丝绿色荧光染色试剂盒(Actin-Tracker Green-488)，即Microfilament Green Fluorescence Staining Kit with Actin-Tracker Green-488，是基于微丝绿色荧光探针Actin-Tracker Green-488，主要用于培养细胞或组织切片的Actin特异性荧光染色的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等荧光检测设备。

Actin-Tracker Green-488为荧光染料AF488标记的鬼笔环肽(phalloidin, 又称鬼笔毒素或毒蕈肽)，即phalloidin-AF488，最大激发波长为495nm，最大发射波长为518nm。AF488也被称为Alexa Fluor 488。Actin-Tracker Green-488的荧光光谱和FITC比较接近，可以用FITC的检测条件进行检测。

鬼笔环肽是从担子类真菌死亡帽蘑菇(death cap mushroom)鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)中分离出来的一种多肽，可特异性与真核生物的丝状的肌动蛋白(filamentous actin, F-actin)结合，从而阻止肌动蛋白解聚。微丝(microfilaments)是由肌动蛋白分子螺旋状聚合成的纤丝，所以鬼笔环肽最终可以破坏细胞内微丝的聚合-解聚动态平衡，而对细胞产生毒性。利用鬼笔环肽具有使微丝保持稳定这一生物学特点，使用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的显示细胞内微丝的形态和分布，从而使微丝荧光探针广泛应用于生物、医学研究[1-2]。

本试剂盒中的Actin-Tracker Green-488有以下特点。用量少：Actin-Tracker Green-488可在纳摩尔水平染色F-actin；不区分种属：不同于抗体，鬼笔环肽与F-actin的结合力在不同物种间没有显著变化，非特异性染色基本可以忽略，染色和未染色区域具有明显的辨识度；对F-actin与其它蛋白结合的影响小：Actin-Tracker Green-488直径大约为1.2~1.5nm，分子量小于2000Da，与F-actin结合后不影响与多种肌动蛋白结合蛋白结合，包括肌球蛋白、原肌球蛋白和后肌钙蛋白等；基本不影响F-actin的功能：Actin-Tracker Green-488标记后的肌动蛋白丝仍旧保持功能，标记的肌纤维能够收缩，标记的肌球蛋白可以继续移动；亲和力一致：在各种植物细胞或动物细胞中，Actin-Tracker Green-488对大、小微丝具有相似的亲和力，每个肌动蛋白可以结合一个鬼笔环肽分子，因此Actin-Tracker Green-488也可用于对细胞中F-actin进行定量研究。

本试剂盒可以用于细胞或组织内的微丝的荧光检测。使用本试剂盒染色细胞内微丝的效果参考图1。

图1.碧云天微丝绿色荧光染色试剂盒(Actin-Tracker Green-488) (C2221)染色NRK-52E (大鼠肾小管上皮细胞)的效果图。经Actin-Tracker Green-488染色的NRK-52E细胞可见绿色细丝状形态微丝(图B)，Hoechst 33342染色的NRK-52E细胞的细胞核呈蓝色荧光(图C)，微丝绿色荧光和细胞核蓝色荧光的叠加(Merge)效果见图D。本图仅作参考，不同的样品不同的检测条件，实际获得的结果可能有所差别。

对于96孔板中的样品，按照每孔使用100μl染色液计算，本试剂盒小包装可以进行200次检测；如果用于流式细胞仪检测，按照每个样品的检测体系体积为0.5ml时，本试剂盒小包装可以进行40次检测；对于6孔板中的贴壁培养细胞样品，按照每孔使用1ml染色液计算，本试剂盒小包装可以进行20次检测。

-20ºC保存，一年有效。其中Actin-Tracker Green-488 (100X)和Hoechst 33342 (1000X)须避光保存。

Actin-Tracker Green-488 (100X)反复冻融可能会影响其检测效果，首次使用解冻后请适当分装。

对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

Phalloidin有一定毒性(LD50为2mg/kg体重)，1ml Actin-Tracker Green中的phalloidin少于0.2mg，使用时请注意适当防护。

需自备盖玻片和载玻片(可以向碧云天订购)。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。