端粒是染色体的“保护帽”,会随着细胞分裂而磨损缩短。端粒酶能修复并加长端粒,为细胞“续命”。这种酶在胚胎和癌细胞中很活跃,却在正常成体细胞中几乎无活性,这使其成为研究抗癌与抗衰老的关键靶点。
人端粒酶主要由三部分组成,包括端粒酶逆转录酶(hTERT)、人端粒酶RNA (hTER or hTR)以及端粒酶相关蛋白(hTAP) 。其中hTERT被认为是端粒酶活性的关键组分,编码hTERT的mRNA水平与端粒酶整体活性基本一致,因此可以用hTERT的mRNA水平来衡量端粒酶活性。想要精准检测,碧云天可提供两套基于实时荧光定量PCR法的“拿捏”方案!
高性价比选择:人端粒酶活性检测试剂盒(TERT mRNA染料法)(D8018);
高特异性选择:人端粒酶活性检测试剂盒(TERT mRNA探针法)(D8021);
为什么选择实时荧光定量PCR法?
实时定量PCR法是目前检测端粒酶活性最为准确、快速的方法之一,只需抽提mRNA、反转录成cDNA、荧光定量PCR这三个步骤即可完成。
产品效果
染料法:左图是阳性样品HeLa细胞cDNA的检测效果图,TERT的Ct值在25左右,表现出一定的端粒酶活性;右图是阴性样品MRC-5细胞cDNA的检测效果图,TERT的Ct值>35,即基本无端粒酶活性。
探针法:左图是阳性样品HeLa细胞cDNA的检测效果图,TERT的Ct值可以被检测到(约26~27),表现出一定的端粒酶活性;右图是阴性样品Mrc-5细胞cDNA的检测效果图,几乎检测不出TERT的Ct值,即无端粒酶活性。
产品特点
- 操作简便快捷:相比传统的直接检测法,本方法流程大大简化,仅需RNA提取、反转录、qPCR三个标准步骤,省时省力。
- 高灵敏度与准确性:利用qPCR技术的高灵敏度,能够精确检测细胞内低水平的hTERT mRNA表达。
- 结果可靠度高:提供阳性对照,用于验证每次实验体系的有效性;内置GAPDH内参,用于监控上样量和反应效率;引入的UDG系统极大地降低了假阳性风险,保证了数据真实性。
产品信息
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精准检测端粒酶活性,只是我们“看见”生命分子的其中一步。从一段特定的mRNA,到完整的核酸研究解决方案——碧云天核酸产品线,为您构建从提取、检测到分析的全链路支持。