神经氨酸酶检测试剂盒/Neuraminidase Assay Kit/禽流感

产品简介

产品简介：
    神经氨酸酶检测试剂盒(Neuraminidase Assay Kit)是一个用荧光法快速高灵敏度检测神经氨酸酶酶活性的试剂盒。
    本试剂盒可以检测来源于不同生物的神经氨酸酶的酶活力，包括禽流感病毒的神经氨酸酶的酶活力。
    试剂盒中提供了纯化的神经氨酸酶作为阳性对照，便于检测体系的建立。
    试剂盒中提供了可以被神经氨酸酶催化产生荧光的底物，该底物被神经氨酸酶催化后可以产生较强的荧光，从而实现了对神经氨酸酶的快速高灵敏检测。
    一个包装的本试剂盒可以检测100个样品或标准品。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
P0306-1	神经氨酸酶检测缓冲液	10ml
P0306-2	神经氨酸酶	50μl
P0306-3	神经氨酸酶荧光底物	1ml
P0306-4	Milli--Q水	1.2ml
—	说明书	1份

保存条件：
    -20℃保存，半年有效。
注意事项：
    相同体积的情况下，样品中神经氨酸酶的酶活力不宜高过试剂盒中所提供的标准品的酶活力。单位体积内酶活力过高会导致荧光底物相对不足，使测定出来的酶活力低于实际的酶活力。如果样品中酶活力过高，可以适当稀释后再进行测定。
    神经氨酸酶和神经氨酸酶荧光底物尽量避免反复冻融。
    试剂盒中所用溶液溶解后4℃保存，两天有效。如果两天内不能全部用完，建议尽早把留作以后使用的神经氨酸酶和神经氨酸酶荧光底物适当分装后-70℃保存，-20℃冻存也可，但有效期会较短。其余试剂直接-20℃或-70℃保存即可。
    需使用荧光酶标仪，并需自备专门用于荧光酶标仪荧光检测的96孔荧光酶标板。或使用可以检测小体积样品的荧光分光光度计。使用荧光分光光度计时参考荧光酶标板的操作方法。
    由于荧光检测非常灵敏，测定出来的荧光强度有时容易产生波动。一方面要避免灰尘等掉入检测孔中产生荧光干扰，另一方面所有检测最好在同一块检测板上做双份平行检测甚至三份平行检测。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明：
1. 阳性和阴性对照检测的准备(参考表1)：
    a. 在96孔荧光酶标板内每孔加入70微升神经氨酸酶检测缓冲液。
    b. 每孔再分别加入10或0微升神经氨酸酶。
    c. 每孔再加入10微升溶解神经氨酸酶的溶液。例如神经氨酸酶在RIPA溶液中，则加10微升RIPA溶
       液。
    d. 每孔再加入0或10微升Milli-Q水使每孔总体积为90微升。
2. 样品检测的准备(参考表1)：
    a. 在96孔荧光酶标板内每孔加入70微升神经氨酸酶检测缓冲液。
    b. 每孔再加入10微升神经氨酸酶样品。
    c. 每孔再加入10微升Milli-Q水使每孔总体积为90微升。
3. 检测(参考表1)：
    a. 振动混匀约1分钟。
    b. 每孔加入10微升神经氨酸酶荧光底物。
    c. 再振动混匀约1分钟。
    d. 37℃孵育20分钟后进行荧光测定。激发波长为360nm，发射波长为440nm。
       如果所用的荧光酶标仪的灵敏度较高，37℃孵育10分钟后即可进行荧光测定。如果所用的荧光酶标
       仪的灵敏度较低，可以在孵育30分钟或60分钟后进行荧光测定。由于反应是连续进行的，可以在不
       同时间点进行测定，以确定适合您的检测体系的最佳孵育时间。
       表1

	阳性对照	阴性对照	样品
神经氨酸酶检测缓冲液	70 μl	70 μl	70μl
神经氨酸酶(阳性对照)	10 μl	－	－
溶解神经氨酸酶样品的溶液	10 μl	10 μl	－
神经氨酸酶样品	－	－	10 μl
Milli-Q水	－	10 μl	10 μl
神经氨酸酶荧光底物	10 μl	10 μl	10 μl
总体积	100 μl	100 μl	100 μl

4. 计算：
根据检测出来的荧光强度可以计算出样品间神经氨酸酶的相对活力。

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