哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒/Mammalian genomic DNA extraction kit

产品简介

产品简介：
    碧云天生产的哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒(Mammalian genomic DNA extraction kit)，采用了经典的蛋白酶K处理法，可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。
    用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
    通常使用本试剂盒，从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA，从10⁶-10⁷Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。
    本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
D0061-1	样品裂解液	30ml
D0061-2	蛋白酶K	130μl
D0061-3	10M 醋酸铵	6ml
D0061-4	Nuclease Free Water	6ml
—	说明书	1份

保存条件：
    -20℃保存，一年有效。10M醋酸铵和Nuclease Free Water也可以室温保存。
注意事项：
    需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。Tris平衡苯酚(ST792)可以向碧云天订购。
    如果打算抽提到大片断的基因组DNA，则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品，可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
    不可过分干燥基因组DNA沉淀，否则会极难溶解。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明：
1. 样品收集
   a) 对于组织样品：
      切下组织，并剪切成小块，置液氮中冻结，研碎或捣碎。
   b) 对于贴壁细胞：
      胰酶消化后，PBS或生理盐水洗一次，1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
   c) 对于悬浮细胞：
      1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
2. 基因组DNA抽提
   a) 样品处理完毕后，每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K，混匀。
   b) 对于上述处理好的样品，每20毫克组织或10⁶-10⁷个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解
      液，颠倒混匀数次，充分裂解组织或细胞。
   c) 50℃水浴消化过夜。
   d) 加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。
   e) 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽
      提一次。
   f) 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积氯仿再抽提一
      次。
   g) 吸出约300微升上清液，加入60微升10M醋酸铵和600微升无水乙醇，颠倒数次混匀，此时可见DNA
      沉淀产生。
   h) 10,000g 离心1分钟，弃上清。加入70%乙醇洗涤DNA沉淀两次。
   i) 尽量吸除残余的乙醇，待看不到明显的液体时，立即加入50-100微升Nuclease Free Water溶解
      DNA。注意：不可过分干燥基因组DNA沉淀，否则会极难溶解。如果发现DNA沉淀难以溶解，可以
      在4℃用摇床缓慢摇动过夜，以溶解DNA沉淀。

产品简介

使用说明

产品图片

相关产品

相关论文