化学信息：
| 化学名 | 4',4''-Di-2-imidazolin-2-yl-p-benzenediacrylanilide dihydrochloride |
| 简称 | GW4869 |
| 别名 | GW69A, GW554869A, GW4869 dihydrochloride, GW4869 2HCl, N-SMase Inhibitor |
| 中文名 | 4',4''-双-2-咪唑啉-2-基对苯二丙烯酰苯胺二盐酸盐 |
| 化学式 | C30H30Cl2N6O2 |
| 分子量 | 577.50 |
| CAS号 | 6823-69-4 |
| 纯度 | ≥97% |
| 溶剂/溶解度 | DMSO ≥3mg/ml, need ultrasonic; Water insoluble; 0.1M HCl insoluble Note: GW4869 is usually formulated as a suspension. |
| 溶液配制 | 5mg加入1.73ml DMSO，超声溶解，配制成5mM溶液。 |
生物信息:
| 产品描述 | 碧云天BeyoExo™外泌体抑制剂(GW4869)是一种细胞渗透性、非竞争性的中性鞘磷脂酶(Neutral sphingophospholipase, N-SMase)抑制剂，可阻断神经酰胺介导的多囊泡体(Multivesicular bodies, MVBs)的向内出芽和成熟外泌体从多囊泡体释放，即抑制外泌体的合成和释放。
外泌体(Exosome)是膜包裹的细胞外囊泡(Extracellular vesicles, EVs)，直径约为40-160nm，具有脂质双分子层结构，天然存在于血液、尿液、脑脊液，以及体外培养细胞的上清液中[1]，几乎所有类型的细胞都可以产生并释放外泌体[2]。如图1所示，细胞膜内吞(Endocytosis)依次形成初级内体(Early sorting endosome, ESE)、次级内体(Late sorting endosome, LSE)和多囊泡体，其中多囊泡体包含腔内囊泡(Intraluminal vesicles, ILVs)。多囊泡体与细胞膜融合形成外泌体，外泌体携带多种来自其母体细胞的成分(包括核酸、蛋白质、脂类、糖类和代谢物等)释放到胞外基质中[3]。外泌体可以被附近或远距离的细胞识别和融合，是细胞间进行相互调控的重要媒介，参与了癌症、神经退行性病变和炎症性疾病等多种疾病的发病过程，影响细胞多方面的功能[4-5]。外泌体的形成原理及其携带的母体细胞成分参考下图。
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| 信号通路 | Exosome biogenesis/release | ||||
| 靶点 | N-SMase | ||||
| IC50/EC50 | 1μM | ||||
| 体外研究 | GW4869 (10μM)可部分抑制TNF (Tumor necrosis factor)诱导的鞘磷脂(Sphingomyelin)的水解，GW4869 (20μM)可完全逆转TNF的作用；GW4869能够以剂量依赖的形式减少TNF诱导的线粒体细胞色素C (Cytochrome c)释放，Caspase 9的激活，从而提升细胞活率[6]。细菌感染的巨噬细胞释放的外泌体具有促炎性，GW4869预处理显著抑制了LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞中外泌体和促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的释放[7]；癌症相关成纤维细胞(Cancer-associated fibroblasts, CAF)在胰腺导管腺癌(Pancreatic ductal adenocarcinomas, PDAC)占较大比重，对Gemcitabine (PDAC的化疗标准)具有一定耐药性，经Gemcitabine处理后，CAF的外泌体释放显著增加，而GW4869和Gemcitabine共同作用于CAF可显著降低其存活率，抑制其耐药性[8]。 | ||||
| 体内研究 | 在内毒素处理或盲肠结扎/穿刺(Cecal ligation/puncture, CLP)诱导的小败血症模型中，GW4869预处理的小鼠在血清中显示出比对照组小鼠更低量的外泌体和促炎细胞因子，显著缓解了败血症引起的心脏炎症和心肌抑制，延长了小鼠生存期[7]。在高脂饮食(High-fat diet, HFD)引发的小鼠脂肪肝模型中，GW4869有效阻断了外泌体的分泌，缓解了脂肪肝病程发展[9]；在增生性瘢痕形成中，M2巨噬细胞调控成纤维细胞分化为具有活性生物功能和增殖的肌成纤维细胞，肌成纤维细胞表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。在体内瘢痕形成后期局部注射GW4869可显著抑制CD63和TSG101的表达，减少α-SMA阳性的成纤维细胞数目，减轻创伤愈合后组织的纤维化程度[10]。 | ||||
| 临床实验 | N/A | ||||
| 特征 | GW4869在体外作为N-SMase的非竞争性抑制剂发挥作用，但在高达150μM的范围内对酸性鞘磷脂酶(Acid sphingomyelinase, A-SMase)不显示抑制作用[6]。 | ||||
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
| 酶活性检测实验 | |
| 方法 | N/A |
| 细胞实验 | |
| 细胞系 | MCF7 |
| 浓度 | 10-20μM |
| 处理时间 | 6, 12, and 24 hours |
| 方法 | Sphingomyelin measurement, Measurements of mass levels of ceramide, Electrophoretic mobility shift assay of NF-κB, Immunocytochemistry of NF-κB and cytochrome c, Glutathione measurements, Caspase activity assay, MTT assay, Western blotting, Electron microscopy analysis. |
| 动物实验 | |
| 动物模型 | Endotoxin treatment or cecal ligation/puncture (CLP) surgery induced sepsis mice model (Male wild-type C57BL/6, 10-12 weeks old) |
| 配制 | dissolved in DMSO (0.005%) |
| 剂量 | injected at one dose of 2.5µg/g |
| 给药方式 | i.p. |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| S1971-0.2ml | BeyoExo™外泌体抑制剂(GW4869) | 5mM×0.2ml |
| S1971-5mg | BeyoExo™外泌体抑制剂(GW4869) | 5mg |
| S1971-25mg | BeyoExo™外泌体抑制剂(GW4869) | 25mg |
| - | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存，溶液装一年有效，粉末装三年有效。溶液装-80ºC保存，可以保存更长时间。
注意事项：粉末配制成溶液时极难溶解，需要较长时间超声处理，推荐购买已经配制好的溶液装。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。