使用说明:
1. 加入等体积的溶液I,混匀。
例如DNA样品体积为100微升,则加100微升溶液I。如果等体积混合后体积较大,可以把部分样品加入到纯化柱内,经离心处理后,再加入剩余的样品继续处理。矿物油对于本试剂盒没有干扰。
2. 把与溶液I等体积混匀的样品加入到DNA纯化柱内,室温放置1分钟。通常室温放置数秒待溶液浸润到纯化柱中即可。
3. 最高速(16,000g,约12,000-14,000rmp左右)离心1分钟,倒弃收集管内的液体。
注意:这一步尽量要达到16,000g,较低离心速度会导致回收效率下降。
4. 在DNA纯化柱内加入700微升溶液II,室温放置1分钟
5. 最高速离心1分钟,洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
6. 再加入500微升溶液II,最高速离心1分钟,进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
7. 最高速再离心1分钟,除去残留液体并让残留的乙醇充分挥发。
8. 将DNA纯化柱置于1.5毫升离心管上,加入50微升溶液III至管内柱面上,放置1分钟
1.5ml离心管作为收集管。溶液III需要直接加至管内柱面中央,使液体被纯化柱吸收。如果不慎将溶III沾在管壁上,一定要震动管子,使液体滑落到管底,以便被纯化柱吸收。也可以用重蒸水或Milli-Q级纯水替代溶液III,但是水的pH值应不小于6.5。如需得到较高浓度的DNA,可以只加20-30微升溶液III,但产量会略有下降。放置较长时间例如3-5分钟,会对提高产量略有帮助。
9. 最高速离心1分钟,所得液体即为高纯度DNA