碧云天的细胞凋亡与坏死检测试剂盒(Apoptosis and Necrosis Assay Kit)为您提供了一种经典而又快速简便的细胞凋亡与细胞坏死检测方法。
本试剂盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)双染的方法。细胞发生凋亡时,染色质会固缩。Hoechst 33342可以穿透细胞膜,染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。上述两种染料双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光+弱蓝色荧光,凋亡细胞为弱红色荧光+强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光+强蓝色荧光。参考下图,左图为诱导凋亡前的正常细胞,右图为诱导凋亡后的细胞。

图1. 碧云天细胞凋亡与坏死检测试剂盒(C1056)染色Jurkat细胞流式细胞仪检测效果图。正常Jurkat细胞(图A)及用紫外照射5分钟并继续培养4小时的Jurkat细胞(图B),用本试剂盒中的Hoechst染色液和PI染色液进行双染。从图中可以看出,对于正常细胞,细胞核呈弱红色荧光+弱蓝色荧光(图A)。经紫外照射诱导后的早期凋亡细胞,染色质固缩,其荧光强度会比正常细胞明显增大。对于晚期凋亡细胞和坏死细胞,细胞膜完整性丧失,可被PI染色,呈强红色荧光+强蓝色荧光(图B)。出现的非预期的细胞点完全在许可的误差范围内。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
Hoechst 33342的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA结合后,最大激发波长为350nm,最大发射波长为461nm。PI结合DNA形成复合物的最大激发光波长为535nm,最大发射光波长为617nm。PI通常通过488nm激光激发,也可以使用其他的激光如532和561nm激光激发。
染色快速方便,两种染料的染色仅需20-30分钟,一步染色即可完成。
使用方便,使用流式细胞仪检测时,无需稀释等配制过程,也无需再准备其它任何溶液。
本试剂盒足够检测100个样品,每个样品的细胞数量可以为10-100万。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
C1056-1 细胞染色缓冲液 100ml
C1056-2 Hoechst染色液 0.5ml
C1056-3 PI染色液 0.5ml
说明书 1份

保存条件:
4℃保存六个月有效,-20℃保存一年有效。Hoechst染色液和PI染色液需避光保存。
注意事项:
需使用流式细胞仪进行红色和蓝色双荧光检测。也可使用荧光显微镜检测。
染色后宜尽快检测。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。