碧云天生产的增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺),即Enhanced 293 Serum-free Culture Medium (with L-Glutamine),简称Enhanced 293 SFM,是一种化学成分确定的、无血清、无蛋白质或生长因子、不含任何动物源性物质(Animal origin-free, AOF)的,专门用于各种亚型或衍生HEK293细胞的高密度悬浮培养和高效率瞬时转染表达的即用型液体培养液。本增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺)可用于培养的293细胞包括293S、293F等悬浮细胞,以及被驯化过的293H、293E、293T等[1-3],特别适用于在普通293无血清培养液效果不佳或瞬转导致细胞大量死亡等情况下的替换。

293无血清培养液也被称为CD (Chemical-defined) 293培养液、CD 293 Medium、CD 293 Cell Culture Medium、CD 293细胞培养液、293 SFM (Serum-free Medium)、293 Expression Medium、293表达培养液等。培养液、细胞培养液、基础培养液、无血清培养液也分别称为培养基、细胞培养基、基础培养基、无血清培养基。HEK293即Human Embryonic Kidney 293,简称293,来源于人胚肾细胞[4]。

本产品经过过滤除菌处理,可以直接用于293等细胞的无血清培养,含L-谷氨酰胺(L-Glutamine),浓度约为4mM,一般无需额外添加L-谷氨酰胺,也无须添加血清、抗生素、非离子表面活性剂物质(如F-68)以及抗结团试剂等。

成分说明:本增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺)的化学成分确定,含D-葡萄糖、L-谷氨酰胺、碳酸氢钠、酚红等组分;不含动物源性物质、血清、蛋白质、水解物和生长因子。超纯水配制,黄红色透明液体,pH为7.0-7.4,渗透压为255-300 mOsm/kg,内毒素低于1EU/ml。

产品特征:293细胞常用含血清的培养液进行贴壁培养。与悬浮培养相比,贴壁培养较为费力且成本更高,且蛋白质和血清的存在不仅会成为实验和数据分析中的混杂因素,影响重复性,还可能干扰下游纯化、影响产物质量。增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺)支持各种亚型和衍生的293细胞的悬浮培养,细胞通常无需任何适应,即可进行高密度培养,有助于提升细胞的活性,以最大限度地生产重组病毒或重组蛋白[1-3]。此外,本产品化学成分明确,不含未知组分,不含蛋白质,也无需额外添加血清,尽可能地减少了外源性物质的引入,批次间稳定性好,有效简化了目标产物的下游纯化,提高了实验或生产的重复性。

瞬转后的细胞活率高,瞬转效率佳:阳离子聚合物等转染试剂具有微量的细胞毒性,通常会不同程度影响转染效果。使用本产品可维持细胞处于更好的状态和更高的活率,转染后,活细胞密度和活率受到更小的影响,目标产物的产量可达最佳。

用途:增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺)可以支持各种293悬浮细胞如293S、293F等的高密度培养和高效率瞬时转染表达,广泛应用于糖基化重组蛋白和抗体的高产量制备生产、外泌体膜上蛋白的融合表达、病毒高效包装等。增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺)也可以用于被驯化过的其它293细胞、亚型或衍生的细胞系,如驯化过的293H、293E、293T等293细胞。使用本产品培养HEK293细胞的活细胞密度和活率效果参考图1。

图1. 碧云天增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺) (C0905)培养HEK293细胞的活细胞密度和活率图。如图所示,接种同样密度的HEK293细胞,相较于普通的293无血清培养液(含L-谷氨酰胺) (C0901) (293 SFM),使用增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺) (Enhanced 293 SFM)培养7天的HEK293细胞活细胞密度和存活率更高。VCD, Viable cell density。实际检测效果会因检测仪器、实验条件的不同而存在差异,本图仅供参考。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
C0905-500ml 增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺) 500ml
C0905-1L 增强型293无血清培养液(含L-谷氨酰胺) 1L
说明书 1份
保存条件:

4ºC避光保存,一年有效。

注意事项:

本产品4ºC保存时应避免靠近冰箱壁,以免局部温度过低导致沉淀析出。如果有沉淀析出,室温摇晃片刻,再放置在4ºC冰箱过夜或更长时间,待沉淀消失后再使用。

本产品一般适用于293细胞悬浮培养,不推荐用于没有经驯化过的贴壁293细胞的培养。

使用本产品应注意无菌操作,避免污染。一般不建议补充抗生素,以免影响细胞的正常生长速度,但如果不能在高洁净度细胞培养室内操作,仍需加入适量的抗生素。

若使用过程中发现培养液浑浊、沉淀等异常现象,则不能继续使用。

本产品中已添加的L-谷氨酰胺(约4mM)是细胞培养所必需的营养成分,一般无需额外再添加,否则可能产生细胞毒性。但L-谷氨酰胺在溶液中不太稳定、易分解,若本培养液长期放置后再使用,发现细胞生长变慢,可在使用前加入适量的L-Glutamine (100X) (C0212)或可以稳定保存的L-Ala-Gln (100X) (C0211),以维持细胞的正常生长代谢。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。