使用说明:
请根据抗体的实际用途选择相应的使用方法。
1.Western检测:
a.按照推荐的稀释比例用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
b.把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖
蛋白膜。
c.回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
d.按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2.免疫染色:
可以使用碧云天生产的
免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3.其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
4. 代表性图片。
Fig. 1. Blocking buffer: QuickBlock™ Blocking Buffer (P0231); Detection: BeyoECL Star (P0018A)
一抗稀释度:1:2000
一抗孵育条件:室温2小时
二抗:HRP-labeled Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) (A0208) at 1:1000 dilution
裂 解 液:1: HeLa, 2: MCF-7, 3: MOLT-4, 4: Rat brian, 5: Mouse brain
蛋白上样量:20 μg
曝光时间:30 s
理论分子量:94 kDa
实际分子量:100 kDa
Fig. 2. 组 织:人结肠癌
切片类型:甲醛固定&石蜡包埋
修复方式:高温高压
修 复 液:Tris/EDTA (PH 9.0)
一抗稀释度:1:1000
一抗孵育条件:室温1小时
二抗:Anti-Rabbit and Mouse Polymer HRP (即用型)
胞核复染:苏木素(蓝色)
结果描述:棕色染色为Grp94 Rabbit Monoclonal Antibody的阳性信号
Fig. 3. 组 织:人肺鳞癌
切片类型:甲醛固定&石蜡包埋
修复方式:高温高压
修 复 液:Tris/EDTA (PH 9.0)
一抗稀释度:1:50
一抗孵育条件:室温1小时
二抗:Anti-Rabbit and Mouse Polymer HRP (即用型)
胞核复染:苏木素(蓝色)
结果描述:棕色染色为Grp94 Rabbit Monoclonal Antibody的阳性信号
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