问:做DNA PULL DOWN过程中,需要先用磁珠结合标记的核酸分子,再用磁珠-探针与裂解液孵育结合蛋白,最后需要将蛋白洗脱下来,此过程需要选用步骤三还是四? 小云 2023-09-22 09:03:21

碧云爱答说: 2023-09-22 09:40:17

后续做WB或者质谱的检测,使用步骤4进行蛋白的洗脱。

问:请问后续要打质谱,用SDS-PAGE Loading Buffer洗脱会将链霉亲和素单体和二聚体都洗脱下来,这会影响打质谱吗,要鉴定的是所有pull down蛋白。 小云 2023-09-11 17:00:59

碧云爱答说: 2023-09-12 11:02:24

如果是电泳后切胶,应该没有影响的。

问:您好!请问用酸性洗脱液洗脱下来的蛋白如何定量?我采用BCA方法无法测到,不知是否与酸性体系有关? 小云 2023-09-11 10:39:03

碧云爱答说: 2023-09-11 15:55:49

酸洗脱马上进行中和,可以进行SDS-PAGE电泳检测。

问:磁珠可以回收吗?如何回收? 小云 2023-08-25 14:05:22

碧云爱答说: 2023-08-25 15:29:44

不建议回收使用。

问:Hepes体系,0.1%triton,0.4%SDS体系可以使用此磁珠吗,影响和蛋白的结合吗?谢谢! 小云 2023-08-24 20:17:17

碧云爱答说: 2023-08-25 11:48:23

没有影响的。

问:请问这个能用来分离细胞吗? 小云 2023-03-31 10:46:00

碧云爱答说: 2023-04-03 10:05:04

理论上可以用于细胞分选

问:想知道说明书里写的摩尔数量,是如何计算的?比如我现在需要连接生物素化的DNA,如何计算摩尔数量? 小云 2023-03-03 00:27:12

碧云爱答说: 2023-03-03 14:39:22

如果是合成的DNA或者通过试剂盒标记的,应该可以从厂家或按试剂盒提供的方法获取

问:这款产品,200nm链霉亲和素化磁珠的分子量到底是多少? 小云 2023-03-03 00:25:01

碧云爱答说: 2023-03-03 13:46:49

磁珠没有具体分子量,由高质量的链霉亲和素 (Streptavidin, SA)与超顺磁性纳米级磁珠共价偶联而成,Streptavidin的分子量为55kD

问:请问可以用来做RNA pull-down么?步骤四是接着步骤三的么?不太清楚步骤三的目的是什么,请问能帮忙解释一下不? 小云 2023-02-22 21:39:53

碧云爱答说: 2023-02-24 13:26:59

理论上可以。步骤3、4是不同实验的,对于RNA pull-down没有详细步骤提供,请查阅资料应用

问:你好,我要用磁珠与动物体内生物素标记的RNA结合,请问前期组织裂解应该使用哪种裂解液? 小云 2023-02-20 21:24:57

碧云爱答说: 2023-02-24 13:24:59

暂无参考