问:大肠杆菌过表达蛋白过程中可以使用吗?后续要用纯化的蛋白处理细胞,所以不能含有DTT及EDTA等。 佚名 (游客) 2020-08-13 16:07:42

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碧云爱答(管理员)说: 2020-08-14 16:45:51

推荐使用碧云天的P1025/P1026蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用),或P1005/P1006蛋白酶抑制剂混合物(通用型)。EDTA为单独包装,不需要可以不添加。

问:本试剂用于细菌蛋白质抽提时蛋白酶抑制剂:磷酸酶抑制剂:EDTA=1:1:1混合吗?磷酸酶和EDTA可以选择性加入吗?需要现配现用吗? 佚名 (游客) 2019-08-16 14:54:18

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碧云爱答(管理员)说: 2019-08-16 15:27:33

本蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物为50X的储存液,使用时按照1:50的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入20μl蛋白酶抑制剂混合物以及20μl磷酸酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。含有蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。根据需要,0.05M的EDTA也按照1:50的比例加入到裂解液中。待所需的抑制剂添加完毕并混匀后,就可以开始进行细菌的裂解和蛋白提取。 EDTA是抑制金属蛋白酶的,可以根据需要选择性加入。

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