碧云爱答说： 2026-03-13 10:46:43
非常抱歉，组分给不出的。建议转化扩增后鉴定阳性克隆再进行后续实验。
碧云爱答说： 2025-10-17 10:02:29
本试剂盒利用包含了DNA 5' 外切酶(5' Exonuclease)、DNA聚合酶(DNA Polymerase)和DNA连接酶(DNA Ligase)活性的重组酶(assembly enzyme)，通过同源重组的方法可以将一个或多个DNA片段按照预定方向、快速、高效和精确 地插入到线性化载体中，并且最终构建的克隆没有任何额外的碱基序列，因此被称作“无缝克隆”。
小云说： 2025-08-18 10:13:51
我也借这贴问一下，我记得体系里的T5外切酶电进去对宿主菌毒害作用比较大，导致电转效率比化转还低。有没有方法能便捷的灭活T5又不影响电转的？
碧云爱答说： 2025-07-25 13:46:40
可以的。
碧云爱答说： 2025-06-16 14:09:11
具体实验目的是什么?
问：请问重组完成后片段和载体完成了重组，能被测序检测到，但是附近片段中间却出现了一段基因缺失是怎么回事？有没有可能跟片段太大了有关？片段3k多，载体5k多，加起来9k的大质粒，分段重组是否会好一些？ 小云 2023-07-10 10:57:57
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碧云爱答说： 2023-07-13 14:20:29
取了几个克隆测序的，都是这个情况吗，有没有重复实验再看看？目前不好确定原因，可以通过官网右上角QQ发一下详细实验情况。和片段大小未必有关，插入片段可以从20bp左右的小片段到10kb左右的大片段
问：接上一个问题，-20℃保存时刚拿出来有一点冻结粘稠状态，冰上解冻后是正常澄清透亮液体，会影响产品使用吗？是正常现象吗？ 以及14bp的同源臂是否略短？影响重组效率 小云 2023-05-16 10:04:54
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碧云爱答说： 2023-05-16 16:37:29
不影响使用。14bp稍短，不太符合要求，15-25bp
碧云爱答说： 2023-05-11 14:17:41
反应体系试剂直接影响感受态细胞，从而导致转化效率降低
碧云爱答说： 2023-05-11 11:17:18
冰上解冻后混匀，看下溶液状态
问：运用贵公司无缝克隆试用装做克隆时，阳性克隆有很多，挑选了10个单菌落测序，但是测序结果显示连接的地方总有一些碱基对的突变，缺失，这种情况是什么原因呢？望解答！ 小云 2023-02-27 04:06:52
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碧云爱答说： 2023-03-01 15:01:50
请参考常见问题分析：2阳性率过低
碧云爱答说： 2022-11-30 16:14:17
如果待插入片段是非常小的片段，例如20-70bp，可以通过单链DNA(常被称为引物)的合成和退火进行制备；如果待插入片段的长度比较长不能直接进行合成，可以通过PCR扩增的方法进行制备