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超氧化物检测试剂盒
产品编号: S0060
产品包装:100次
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价格: ¥ 578.00
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S0060 超氧化物检测试剂盒 100次 578.00元

超氧化物检测试剂盒(Superoxide Assay Kit)是一种用于超氧化物快速高灵敏度检测的试剂盒。
本试剂盒利用超氧化物可以还原WST-1产生可溶性有色物质为基础来检测超氧化物。本试剂盒的检测试剂中添加了Catalase(触酶)等,可以清除过氧化氢等过氧化物对WST-1显色的干扰,使测定结果更加准确。并且本试剂盒还提供SOD(超氧化物歧化酶),可以验证本试剂盒测定出的结果是否为超氧化物,以排除检测体系中所用的一些试剂可能产生的干扰。对于本试剂盒,加入SOD后通常可以抑制90%以上的超氧化物。
WST-1是一种类似于MTT的化合物,可以被超氧化物还原生成橙色的formazan。超氧化物产生越多越快,则颜色越深,即相应测定得到的吸光度值越大。
使用WST-1作为检测试剂比用传统的细胞色素c(cytochrome c)检测超氧化物具有多方面的优点。首先,WST-1本身的吸光度非常低(通常OD450为0.02左右,因仪器和酶标板不同而有所不同),而细胞色素c本身的吸光度非常高(通常OD550为0.5左右),因此,使用WST-1与细胞色素c相比,检测灵敏度高很多倍。其次,WST-1的还原产物是稳定的可溶性产物,且对细胞基本无毒性,使WST-1方法更加适合于高通量的筛选。另外,细胞色素c法由于灵敏度的限制,一般不适合用96孔板测定,而WST-1法可以用96孔板测定,使检测更加便捷。用WST-1法或细胞色素c法对超氧化物测定效果比较参考图1。图1中,50万/毫升嗜中性粒细胞在37℃用PMA刺激指定时间,用WST-1或细胞色素c方法分别测定。WST-1法测定OD450,而细胞色素c法测定OD550。另外,WST-1法和luminol法相比,灵敏度相近,但仅须使用普通的酶标仪,无须使用luminol法所需的luminometer,并且检测速度也比luminol法更加快捷。
超氧化物通常指超氧化物阴离子(superoxide anion)O2.-,是一种氧分子的自由基。在呼吸链中,NADPH氧化酶把电子传递给氧分子的时候,就会产生超氧化物阴离子O2.-。超氧化物阴离子O2.-是一种强氧化剂,可以由被刺激的白细胞等产生,从而抵御微生物的感染等。超氧化物阴离子O2.-也可以导致氧化损伤,和许多疾病的发生密切相关。
本试剂盒可以测定100个样品。


图1. WST-1法和细胞色素c法对于超氧化物测定效果的比较。

包装清单:

产品编号 产品名称 包装
S0060-1 超氧化物检测缓冲液 30ml
S0060-2 WST-1溶液 1ml
S0060-3 Catalase溶液 200μl
S0060-4 SOD溶液 20μl
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
WST-1溶液、Catalase溶液和SOD溶液均宜尽量避免反复冻融,可以适当分装。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明:
1. 超氧化物检测工作液的配制:
按照下表比例配制超氧化物检测工作液:


1个检测 5个检测 10个检测 20个检测 50个检测
超氧化物检测缓冲液 200微升 1毫升 2毫升 4毫升 10毫升
WST-1溶液 10微升 50微升 100微升 200微升 500微升
Catalase溶液 2微升 10微升 20微升 40微升 100微升
超氧化物检测工作液 212微升 1.06毫升 2.12毫升 4.24毫升 10.6毫升

2. 悬浮细胞产生超氧化物的检测:
a. 细胞用PBS、Hanks液或生理盐水洗涤一次。
b. 约按5-10万个细胞/毫升的比例,用超氧化物检测工作液悬浮细胞。
c. 在96孔板中,每孔加入200微升用超氧化物检测工作液悬浮的细胞,每孔约1-2万个细胞。
d. 37℃孵育3分钟。
e. 在预定的检测孔中加入预计可以诱导产生超氧化物的刺激物,如PMA等,刺激10-60分钟或其它预定的时间。须至少留一个不加刺激物的孔作为空白对照。选择1-2个加刺激物的孔中加入2微升SOD以验证整个检测体系,加SOD溶液的检测可以不做。试剂盒提供的SOD溶液足够做10个检测。具体检测时的安排参考下表:


细胞 超氧化物检测工作液 刺激物 SOD溶液
空白对照
待测样品
阴性对照

f. 在450nm测定吸光度。如无450nm滤光片,可以使用420-480nm的滤光片。可以使用大于600nm的波长作为参考波长进行双波长测定。
3. 贴壁细胞产生超氧化物的检测:
a. 约按每孔5000-10000个细胞(具体的细胞接种数量须根据细胞的大小和生长速度自行确定)把细胞培养到96孔板中,使第二天或待检测时细胞为80-90%满。
b. 吸去培养液,用PBS、Hanks液或生理盐水洗涤一次。
c. 每孔加入200微升超氧化物检测工作液,37℃孵育3分钟。
d. 在预定的检测孔中加入预计可以诱导产生超氧化物的刺激物,如PMA等,刺激10-60分钟或其它预定的时间。须至少留一个不加刺激物的孔作为空白对照。选择1-2个加刺激物的孔中加入2微升SOD以验证整个检测体系,加SOD溶液的检测可以不做。试剂盒提供的SOD溶液足够做10个检测。具体检测时的安排参考下表:


细胞 超氧化物检测工作液 刺激物 SOD溶液
空白对照
待测样品
阴性对照

e. 在450nm测定吸光度。如无450nm滤光片,可以使用420-480nm的滤光片。可以使用大于600nm的波长作为参考波长进行双波长测定。

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1. Yuedong Guo, Yingying Xu, Qunqun Bao, Chao Shen, Dalong Ni, Ping Hu, Jianlin Shi
.
ACS Nano. 2021 Oct 26;15(10):16286-16297. doi: 10.1021/acsnano.1c05451. (IF 14.588)
2. Wang G, Jin W, Qasim AM, Gao A, Peng X, Li W, Feng H, Chu PK.
.
Biomaterials. 2017 Jan 30;124:25-34. (IF 10.317)
3. Wang G, Jin W, Qasim AM, Gao A, Peng X, Li W, Feng H, Chu PK.
.
Biomaterials. 2017 Apr;124:25-34. (IF 10.317)
4. Zhang L, Zhao P, Yue C, Jin Z, Liu Q, Du X, He Q
.
Biomaterials. 2019 Mar 197:393-404. (IF 10.317)
5. Chenyang Duan, Li Wang, Jie Zhang, Xinming Xiang, Yue Wu, Zisen Zhang, Qinghui Li, Kunlun Tian, Mingying Xue, Liangming Liu, Tao Li
.
Redox Biol. 2020 Oct;37:101706. doi: 10.1016/j.redox.2020.101706. (IF 9.986)
6. Jia Sun, Xiaozhong Huang, Chao Niu, Xuejiao Wang, Wanqian Li, Mengxue Liu, Ying Wang, Shuai Huang, Xixi Chen, Xiaokun Li, Yang Wang, Litai Jin, Jian Xiao, Weitao Cong
.
Redox Biol. 2021 Feb;39:101811. doi: 10.1016/j.redox.2020.101811. (IF 9.986)
7. Chen Y, Hu Y, Liu S, Zheng H, Wu X, Huang Z, Li H, Peng B, Long J, Pan B, Huang C, Dong Q.
.
J Hazard Mater. 2016 Nov 15;318:109-16. (IF 9.038)
8. Tianlei Sun, Cheryl H T Kwong, Cheng Gao, Jianwen Wei, Ludan Yue, Jianxiang Zhang, Richard Dequan Ye, Ruibing Wang
.
Theranostics. 2020 Aug 8;10(22):10106-10119. doi: 10.7150/thno.48448. (IF 8.579)
10. Imran Rashid Rajput, Summra Yaqoob, Sun Yajing, Edmond Sanganyado, Liu Wenhua
.
Environ Pollut. 2021 Feb 15;271:116131. doi: 10.1016/j.envpol.2020.116131. (IF 6.792)
11. Jing Wu, Yiping Ni, Qianlei Yang, Jiayuan Mao, Xuerui Zhu, Shasha Tao, Koichi Kato, Jie Zhang, Dapeng Wang, Kenzo Yamanaka, Yan An
.
Sci Total Environ. 2020 Sep 10;734:139425. doi: 10.1016/j.scitotenv.2020.139425. (IF 6.551)
12. Rui Zhou, Dong-Jie Cui, Qi Zhao, Kai-Kai Liu, Wen-Bo Zhao, Qian Liu, Ruo-Nan Ma, Zhen Jiao, Lin Dong, Chong-Xin Shan
.
Food Chem. 2022 Sep 15:388:132994. doi: 10.1016/j.foodchem.2022.132994. (IF 6.306)
13. Dai F, Li Q, Wang Y, Ge C, Feng C, Xie S, He H, Xu X, Wang C.
.
J Med Chem. 2017 Mar 9;60(5):2071-2083. (IF 6.205)
14. Wang D, Ma Y, Yang X, Xu X, Zhao Y, Zhu Z, Wang X, Deng H, Li C, Gao F, Tong J, Yamanaka K, An Y.
.
FREE RADICAL BIO MED. 2015 Dec;89:209-19. (IF 6.17)
15. Song Z, Wu Y, Wang H, Han H
.
MAT SCI ENG C-MATER. 2019 Jun 99:255-263. (IF 5.88)
16. Jia XJ, Li X, Wang F, Liu HQ, Zhang DJ, Chen Y.
.
CELL PHYSIOL BIOCHEM. 2017;41(6):2307-2318. (IF 5.5)
17. Liu H, Zhang Z, Xu M, Xu R, Wang Z, Di G
.
CELL PHYSIOL BIOCHEM. 2018;51(4):1908-1920. (IF 5.5)
18. Li X, Wang B, Tang L, Zhang Y, Chen L, Gu L, Zhang F, Ouyang J, Zhang X.
.
J CLIN ENDOCR METAB. 2018 Mar 1;103(3):813-823. (IF 5.399)
19. Yuzhou Liu, Liying Zhou, Binbin Du, Yuan Liu, Junhui Xing, Sen Guo, Ling Li, Hongrui Chen
.
Oxid Med Cell Longev. 2021 Aug 6;2021:9984330. doi: 10.1155/2021/9984330. (IF 5.076)
21. Qiu Q, Xiong W, Yang C, Dai X, Dan X, Yang Z, Jiao Y, Xiang Y, Liu G, Hardy P.
.
Apoptosis. 2014 Jul;19(7):1113-27. (IF 4.543)
23. Jiang T, Hoekstra J, Heng X, Kang W, Ding J, Liu J, Chen S, Zhang J.
.
Neurobiol Aging. 2015 Jul;36(7):2304-18. (IF 4.347)
24. Qiu M, Chen L, Tan G, Ke L, Zhang S, Chen H, Liu J.
.
SCI REP-UK. 2015 Oct 13;5:15104. (IF 3.998)
25. Xu P, Wang H, Li Z, Yang Z.
.
Life Sci. 2016 Jan 15;145:19-26. (IF 3.647)
26. Hong Q, Ma ZC, Huang H, Wang YG, Tan HL, Xiao CR, Liang QD, Zhang HT, Gao Y.
.
Eur J Pharmacol. 2016 Apr 15;777:1-8. (IF 3.263)
27. Li W, Cheong YK, Wang H, Ren G, Yang Z.
.
Neurochem Res. 2016 Apr;41(4):844-54. (IF 3.038)
28. Ishag HZ, Wu YZ, Liu MJ, Xiong QY, Feng ZX, Yang RS, Shao GQ.
.
Res Vet Sci. 2016 Jun;106:93-6. (IF 1.892)
29. Gu LL, Zhang XY, Xing WM, Xu JD, Lu H.
.
ENVIRON TOXICOL CHEM. 2016 Jul;45:257-64. (IF 3.152)
30. He JL, Zhao M, Xia JJ, Guan J, Liu Y, Wang LQ, Song DX, Qu MY, Zuo M, Wen X, Yu X, Huo R, Pan ZW, Ban T, Zhang Y, Zhu JX, Shou W, Qiao GF, Li BY.
.
SCI REP-UK. 2016 Jul 8;6:29582. (IF 3.998)
31. Li SJ, Sun SJ, Gao J, Sun FB.
.
Oncol Lett. 2016 Dec;12(6):5059-5067. (IF 2.311)
32. Qiu M, Chen L, Tan G, Ke L, Zhang S, Chen H, Liu J.
.
Oncol Lett. 2017 Mar;13(3):1137-1142. (IF 2.311)
33. Li S, Li P, Zhang L, Hu W, Wang M, Liu Y, Tang G, Wang D, Zhou B, Yan J.
.
PLoS One. 2017 Jun 2;12(6):e0178618. (IF 2.74)
34. Qiu M, Shi F, Dai F, Song R, Wang S, You Y, Zhao B.
.
J Ethnopharmacol. 2018 Mar 1;213:376-383. (IF 3.69)
35. Mo J, Yang R, Li F, Zhang X, He B, Zhang Y, Chen P, Shen Z
.
Phytomedicine. 2018 Mar 15;42:66-74. (IF 4.268)
36. Wang K, Hu L, Chen JK
.
Biomed Pharmacother. 2018 May;101:617-626. (IF 4.545)
37. Li S, Fu L, Tian T, Deng L, Li H, Xia W, Gong Q
.
Cell Commun Signal. 2018 Jun 11;16(1):28. (IF 4.344)
38. Gao LX, Bian C, Wu Y, Nisar MF, Chen S, Li CM, Yu L, Ji P, Huang E, Zhong JL
.
J Biol Eng. 2018 Sep 12;12:17. (IF 3.429)
39. Song Z, Wang H, Wu Y, Gu J, Li S, Han H
.
ACS Omega. 2018 Oct 31;3(10):14517-14525. (IF 2.87)
40. Liu H, Feng Y, Xu M, Yang J, Wang Z, Di G
.
Cell Commun Signal. 2018 Nov 15;16(1):81. (IF 4.344)
41. Zuo H, Yuan J, Yang L, Liang Z, Weng S, He J, Xu X
.
FISH SHELLFISH IMMUN. 2019 Jan 84:20-27. (IF 3.298)
42. Guan J, Zhao M, He C, Li X, Li Y, Sun J, Wang W, Cui YL, Zhang Q, Li BY, Qiao GF
.
Neurosci Bull. 2019 Feb 35(1):15-24. (IF 4.326)
43. Zhao Q, Li H, Chang L, Wei C, Yin Y, Bei H, Wang Z, Liang J, Wu Y
.
Biol Pharm Bull. 2019 Aug 1 42(8):1310-1321. (IF 1.863)
45. Mo Y, Zhu JL, Jiang A, Zhao J, Ye L, Han B
.
AGING-US. 2019 Dec 18 11(24):12032-12042. (IF 4.831)
46. Fang Luo, Sushan Luo, Wenjing Qian, Lin Zhang, Chen Chen, Meimei Xu, Guangling Wang, Zhongfeng Wang, Jian Wang, Wenyuan Wang
.
Stem Cell Res. 2020 Dec;49:102027. doi: 10.1016/j.scr.2020.102027. (IF 4.489)
47. Jialing He, Hui Wang, Jiaxin Shi, Mengfan Shi, Weiwei Sun
.
Am J Physiol Endocrinol Metab. 2021 Apr 1;320(4):E732-E746. doi: 10.1152/ajpendo.00531.2020.
48. Dong Liu, Shangsong Li, Ting Zhang, Hao Jiang, Yuan Lu
.
ACS Appl Mater Interfaces. 2021 Aug 4;13(30):36157-36170. doi: 10.1021/acsami.1c08130.
49. Sheng-Yu Luo, Cheng Liu, Jie Ding, Xin-Ming Gao, Jing-Qian Wang, Yi-Bo Zhang, Chen Du, Cong-Cong Hou, Jun-Quan Zhu, Bao Lou, Xiong-Fei Wu, Wei-Liang Shen
.
Zool Res. 2021 Sep 18;42(5):592-605. doi: 10.24272/j.issn.2095-8137.2021.079. (IF 2.638)
50. Shan Fu, Yuan Zhang, Gaowu Qin, Erlin Zhang
.
Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021 Sep;128:112266. doi: 10.1016/j.msec.2021.112266.
51. Weijing Zhang, Yajing Li, Zhendong Zhu
.
Animals (Basel). 2022 Jul 4;12(13):1726. doi: 10.3390/ani12131726.
52. Lei Liu, Xiuhua Yang, Yiyang Liao, Chuanhua Wang, Yuanliang Wang
.
Toxicol Res (Camb). 2022 Sep 3;11(5):831-840. doi: 10.1093/toxres/tfac051.
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