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氧钒核糖核苷复合物(RNase抑制剂)
产品编号: R0108
产品包装: 10ml
产品价格: 386.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
R0108 氧钒核糖核苷复合物(RNase抑制剂) 10ml 386.00元

      氧钒核糖核苷复合物(Ribonucleoside Vanadyl Complexes, RVC)是一种常用的核糖核酸酶(ribonucleases, RNase)抑制剂,即RNA酶抑制剂,浓度为200mM,广泛用于各种RNA样品的分离纯化和检测过程中以抑制RNA降解。
      本产品通过一种优化的方法将四种rNTP的等摩尔混合物与氧化钒混合反应而成,可以和RNase以非共价键结合,形成稳定的复合物,从而抑制RNase活性。
      本产品是一种常用的RNase抑制剂,可广泛用于各种需要防止RNA降解的RNA分离、纯化和检测过程。本产品可以用于mRNA的纯化过程中,作为RNase的抑制剂;也可用于细胞裂解和蔗糖梯度法细胞组分分离过程中,以抑制RNase活性;还可以用于原位杂交中保护RNA探针,以及DNase I消化DNA时保护RNA等。
      本产品可以抑制绝大多数核糖核酸酶,但以下是例外:DNase I、S1 nuclease及Bacillus cereus ribonuclease。由于本产品不抑制DNase I,所以当用DNase I消化去除RNA样品中的DNA时,可以采用本产品来抑制RNase。
      本产品不适合用于体外翻译体系。
      有报道称0.4mM以上浓度的RVC对PCR聚合酶有一定的抑制作用,所以本试剂不推荐直接用于反转录体系中,反转录体系中可以选用碧云天的另外一种RNase抑制剂(R0102)。也可以通过后续提到的方法抽提去除RVC后再用于PCR反应。
      很多时候RNA样品中的RVC不必去除,可以直接用于后续的电泳、功能检测等。例如,使用本产品纯化获得的mRNA未经去除RVC,可以直接用于蛙卵的注射实验。
      如果需要去除RNA样品中的RVC,可以直接使用等体积苯酚进行抽提。如果苯酚中含有抗氧化剂8-羟基喹啉(8-
hydroxyquinoline),抽提含有RVC的RNA样品后会发现苯酚的颜色会变黑。当苯酚抽提样品2-4次后,苯酚的颜色不再明显变色,提示RVC已经被充分去除了。也可以在RNA沉淀前,加入RVC的摩尔数10倍量的EDTA以充分分解和失活RVC,这样可以在RNA沉淀时去除已经分解和失活的RVC。
      RVC浓度越高,对于RNase的抑制效果越强。参考图1,20mM的RVC可以完全抑制0.00025U/ml的RNase A。本产品浓度为200mM,一般细胞裂解液中推荐使用终浓度20mM,也可以根据经验或文献选择不同的浓度。每一批的本产品都经过RNase活性抑制的检测,检测结果参考图1。

                           
      图1. 不同浓度的RVC对RNase A的抑制效果图。总RNA和0.00025U/ml RNase A以及指定浓度的RVC一起孵育20分钟后进行电泳检测。本图仅作参考,不同的样品不同的检测条件,实际获得的结果可能和上图有所差别。
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
R0108 氧钒核糖核苷复合物(RNase抑制剂, 200mM) 10ml
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存,至少一年有效。
注意事项:
      第一次使用时建议分装,避免反复冻融。
      去垢剂SDS以及螯合剂EDTA可以抑制RVC的活性,请勿和RVC同时使用。 
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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