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RNase Inhibitor
产品编号: R0102-50kU
产品包装: 50000U
产品价格: 2468.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
R0102-50kU RNase Inhibitor 50000U 2468.00元

      RNase Inhibitor (Ribonuclease Inhibitor),即RNases抑制剂,是一种大肠杆菌重组表达的人胎盘核糖核酸酶抑制剂
(human placental RNase inhibitor),可以通过非竞争性方式按1:1比例和RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘核糖核酸酶(human placental RNase)结合,并抑制这些酶的活性,从而保护RNA不被这些酶降解。
      RNase Inhibitor对RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘核糖核酸酶的抑制能力极强,其Ki值低至约为4×10-14M。通常抗体和抗原的亲和常数仅为10-6-10-9M。并且RNase Inhibitor和这些RNA酶的结合是非常快速的,几乎在加入的瞬间就会和这
些RNA酶形成复合物从而抑制其酶活性。
      RNase Inhibitor不能抑制RNase I、T1、T2、H、U1、U2、CL3、RNase from Aspergillus、S1 Nuclease、Taq DNA
polymerase、M-MLV reverse transcriptase和SP6、T7、T3 RNA polymerase的的酶活性。
      RNase Inhibitor在pH 5-8范围内保持其RNA酶抑制活性,在pH 7-8时抑制活性最高。RNase Inhibitor维持其活力需要至少在溶液中含有1mM DTT。
      本产品与Thermo公司的RiboLock RNase Inhibitor以及Promega公司的RNasin Ribonuclease Inhibitor属于同类产品,都是重组表达的人胎盘核糖核酸酶抑制剂,对于RNase的抑制效果也完全相同(参考图1和图2)。

      图1. 碧云天的RNase Inhibitor和同类产品(Competitor RNase Inhibitor)对RNase A酶活性的抑制效果比较。5μg yeast RNA与0或2ng RNase A及8、4、2、1或0U RNase Inhibitor,在100μl的反应体系(50mM MOPS, 5mM MgCl2, pH6.5)中,37孵育15分钟。反应完毕后立即取20μl反应液用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。

      图2. 碧云天的RNase Inhibitor和同类产品(Competitor RNase Inhibitor)对RNase A的酶活性的抑制效果比较。2μg Hela细胞总RNA与0或0.5ng RNase A及20、10、5、2.5、1.25、0.625或0U RNase Inhibitor,在20μl的反应体系(50mM MOPS, 5mM MgCl2, pH6.5)中,37℃孵育15分钟。反应完毕后立即全部用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。

      用途:用于cDNA合成,体外转录,体外翻译,以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解;还可用于特定RNase活性的鉴定等。
      来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为human placenta中编码该酶的基因。
      分子量:约49.6 kDa(单体)。
      活性定义:将能够抑制5ng RNase A的50%活性的酶量定义为一个活性单位。
      活性检测条件:100mM Tris-HCl (pH7.5), 1.2mM EDTA, 0.1mg/ml BSA, 100ng/ml RNase A, 0.1mg/ml E.coli [3H]-
RNA, 50mg/ml yeast RNA, 8mM DTT。
      纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
      储存溶液:20mM HEPES-NaOH (pH7.5), 50 mM NaCl, 8 mM DTT, 50% (v/v) glycerol。
      失活或抑制:75℃加热10分钟可以导致完全失活。70℃加热10分钟仍会有微量活性残留。SDS和尿素等导致蛋白变性的试剂
以及对氯汞基苯甲酸盐(p-chloromercuribenzoate)、重铬酸钾等氧化剂会抑制RNase Inhibitor与RNA酶的结合。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
R0102-2KU RNase Inhibitor (40U/μl) 2000U
R0102-10KU RNase Inhibitor (40U/μl) 10000U
R0102-50KU RNase Inhibitor (40U/μl) 50000U
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
      酶储存溶液中加入DTT可保证RNase Inhibitor长期贮存的稳定性。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 对于cDNA合成、体外转录、体外翻译等常见的反应体系中,为保护其中的RNA不被RNase降解,RNase Inhibitor推荐用量为最终浓度1-2U/μl。
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使用本产品的文献:
1. Wang K, Zhang K, Lv Z, Zhu X, Zhu L, Zhou F.
Ultrasensitive detection of microRNA with isothermal amplification and a time-resolved fluorescence sensor.
Biosens Bioelectron. 2014 Jul 15;57:91-5. 
2.Wu Y, Dong X, Kadowaki T.
Characterization ofthe Copy Number and Variants of Deformed Wing Virus (DWV)inthe Pairs of Honey Bee Pupa and Infesting Varroa destructor or Tropilaelaps mercedesae.
Front Microbiol. 2017 Aug 22;8:1558.