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 RNase Inhibitor

  产品编号R0102-2kU
  产品包装: 2000U
  产品价格: 158.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
R0102-2kU RNase Inhibitor 2000U 158.00元

      RNase Inhibitor (Ribonuclease Inhibitor),即RNases抑制剂,是一种大肠杆菌重组表达的人胎盘核糖核酸酶抑制剂
(human placental RNase inhibitor),可以通过非竞争性方式按1:1比例和RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘核糖核酸酶(human placental RNase)结合,并抑制这些酶的活性,从而保护RNA不被这些酶降解。
      RNase Inhibitor对RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘核糖核酸酶的抑制能力极强,其Ki值低至约为4×10-14M。通常抗体和抗原的亲和常数仅为10-6-10-9M。并且RNase Inhibitor和这些RNA酶的结合是非常快速的,几乎在加入的瞬间就会和这
些RNA酶形成复合物从而抑制其酶活性。
      RNase Inhibitor不能抑制RNase I、T1、T2、H、U1、U2、CL3、RNase from Aspergillus、S1 Nuclease、Taq DNA
polymerase、M-MLV reverse transcriptase和SP6、T7、T3 RNA polymerase的的酶活性。
      RNase Inhibitor在pH 5-8范围内保持其RNA酶抑制活性,在pH 7-8时抑制活性最高。RNase Inhibitor维持其活力需要至少在溶液中含有1mM DTT。
      本产品与Thermo公司的RiboLock RNase Inhibitor以及Promega公司的RNasin Ribonuclease Inhibitor属于同类产品,都是重组表达的人胎盘核糖核酸酶抑制剂,对于RNase的抑制效果也完全相同(参考图1和图2)。

      图1. 碧云天的RNase Inhibitor和同类产品(Competitor RNase Inhibitor)对RNase A酶活性的抑制效果比较。5μg yeast RNA与0或2ng RNase A及8、4、2、1或0U RNase Inhibitor,在100μl的反应体系(50mM MOPS, 5mM MgCl2, pH6.5)中,37孵育15分钟。反应完毕后立即取20μl反应液用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。

      图2. 碧云天的RNase Inhibitor和同类产品(Competitor RNase Inhibitor)对RNase A的酶活性的抑制效果比较。2μg Hela细胞总RNA与0或0.5ng RNase A及20、10、5、2.5、1.25、0.625或0U RNase Inhibitor,在20μl的反应体系(50mM MOPS, 5mM MgCl2, pH6.5)中,37℃孵育15分钟。反应完毕后立即全部用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。

      用途:用于cDNA合成,体外转录,体外翻译,以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解;还可用于特定RNase活性的鉴定等。
      来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为human placenta中编码该酶的基因。
      分子量:约49.6 kDa(单体)。
      活性定义:将能够抑制5ng RNase A的50%活性的酶量定义为一个活性单位。
      活性检测条件:100mM Tris-HCl (pH7.5), 1.2mM EDTA, 0.1mg/ml BSA, 100ng/ml RNase A, 0.1mg/ml E.coli [3H]-
RNA, 50mg/ml yeast RNA, 8mM DTT。
      纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
      储存溶液:20mM HEPES-NaOH (pH7.5), 50 mM NaCl, 8 mM DTT, 50% (v/v) glycerol。
      失活或抑制:75℃加热10分钟可以导致完全失活。70℃加热10分钟仍会有微量活性残留。SDS和尿素等导致蛋白变性的试剂
以及对氯汞基苯甲酸盐(p-chloromercuribenzoate)、重铬酸钾等氧化剂会抑制RNase Inhibitor与RNA酶的结合。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
R0102-2KU RNase Inhibitor (40U/μl) 2000U
R0102-10KU RNase Inhibitor (40U/μl) 10000U
R0102-50KU RNase Inhibitor (40U/μl) 50000U
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
      酶储存溶液中加入DTT可保证RNase Inhibitor长期贮存的稳定性。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 对于cDNA合成、体外转录、体外翻译等常见的反应体系中,为保护其中的RNA不被RNase降解,RNase Inhibitor推荐用量为最终浓度1-2U/μl。
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使用本产品的文献:
1. Wang K, Zhang K, Lv Z, Zhu X, Zhu L, Zhou F.
Ultrasensitive detection of microRNA with isothermal amplification and a time-resolved fluorescence sensor.
Biosens Bioelectron. 2014 Jul 15;57:91-5.