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 TMB显色液(组化或膜HRP显色用)

  产品编号P0211
  产品包装: 100ml
  产品价格: 222.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P0211 TMB显色液(组化或膜HRP显色用) 100ml 222.00元

      TMB显色液(组化或膜HRP显色用)(TMB Chromogen Solution, TMB Substrate Solution or TMB Solution for Immunohistochemistry or Blotting)是一种采用了最新单一溶液TMB显色技术,通过辣根过氧化物酶(HRP)催化TMB显色,用于免疫组化、原位杂交或膜显色等的显色液。本显色液也可以用于原位检测细胞或组织内源性的过氧化物酶。
      通常的TMB显色试剂由多个组份组成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不太方便,并且也容易导致结果不太稳定。本TMB显色液采用了最新的TMB显色技术,把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中,仅由单一溶液组成,简化了操作步骤,并且使检测结果更加稳定可靠。
      TMB,即3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine,是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下,TMB会产生可溶性蓝色产物。蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。
      本试剂盒主要适用于免疫组化或原位杂交时HRP的显色检测,以及Western、Southern、Northern等HRP的膜显色检测。
      用于免疫组化检测时,如果每个样品的显色液用量为0.1ml,则可以检测1000个样品;对于膜的显色检测,如果每次使用2.5ml显色液,则可以检测40次。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
P0211 TMB显色液(组化或膜HRP显色用) 100ml
说明书 1份

保存条件:
      4℃避光保存,一年有效。
注意事项:
      TMB对人体有刺激性,请注意适当防护。
      本产品为无色至微蓝色透明溶液,如果发现TMB辣根过氧化物酶显色液出现混浊或颜色变成较深的蓝色,应该停止使用。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 对于免疫组化检测:
a. 参考免疫组化的实验步骤,在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
b. 洗涤完毕后,去除洗涤液,滴加约100微升TMB显色液。
c. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可在湿盒中显色过夜),直至显色至预期深浅。
d. 去除染色液,加入去离子水或重蒸水孵育10分钟以终止反应。
e. 拍照记录或适当封片后拍照记录。如果有必要,可以使用中性红染色液(C0123)进行复染后再进行拍照记录或适当封片后拍照记录。
2. 对于膜的HRP显色检测:
a. 参考相应的实验步骤,在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次5分钟左右。
b. 洗涤完毕后,去除洗涤液,
c. 滴加约适量TMB显色液充分覆盖膜。
d. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可长达数小时),直至显色至预期深浅。
e. 直接拍照记录。
常见问题:
1. 背景显色太深。
a. 如果背景显色太深,一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭,例如选购适当的封闭液或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面,请选购经过适当吸附的二抗,以减小二抗的非特异性吸附。
b. 可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。另外,选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间也会有所帮助。
2. 没有显色或显色太弱。
a. 适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在离心管内,检测二抗是否可以被正常显色。
b. 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如使用生物素检测体系。
c. 可以适当延长显色时间。
d. 如果上述改进不能获得预期效果,对于免疫组化或Western,可以考虑更换效果更好的一抗;对于Southern、Northern或原位杂交,则可以考虑更换探针。
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使用本产品的文献:
1. Du G, Ye L, Zhang G, Dong Q, Liu K, Tian J.
Human IL18-IL2 fusion protein as a potential antitumor reagent by enhancing NK cell cytotoxicityand IFN-γ production.
J Cancer Res Clin Oncol. 2012 Oct;138(10):1727-36.
2.He G, Hu W, Li CM.
Spontaneous interfacial reaction between metallic copper and PBS to form cupric phosphate nanoflower and its enzyme hybrid with enhanced activity.
Colloids Surf B Biointerfaces. 2015 Nov 1;135:613-8.
3.Li M, Zhang YX, Zhang Z, Zhou XY, Zuo XL, Cong Y, Li YQ.
Endomicroscopy Will Track Injected Mesenchymal Stem Cells in Rat Colitis Models.
Inflamm Bowel Dis. 2015 Sep;21(9):2068-77.