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核酸相关> DNA标记和检测> EMSA相关
EMSA探针-ARE (10μM)
产品编号: GS013A
产品包装:30μl
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价格:¥442.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
GS013A EMSA探针-ARE (10μM) 30μl 442.00元

EMSA探针-ARE是用于EMSA(也称gel shift)研究的ARE consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的ARE位点,可以用作EMSA研究时的探针。
ARE consensus oligo的序列如下:
5'-ACT GAG GGT GAC TCA GCA AAA TC-3'
3'-TGA CTC CCA CTG AGT CGT TTT AG-5'
ARE即Antioxidant Response Element(抗氧化响应元件),该顺式作用元件含有AP1结合位点,可以和AP1结合,但Nrf2是其更专一性结合的转录因子。例如NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase)和HO-1(Heme Oxygenase-1)都受Nrf2通过ARE元件进行转录调控。
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition),可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
GS013A EMSA探针-ARE(10μM) 30μl
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明:
1. 用于EMSA探针的标记,可以参考如下反应体系:

Consensus Oligonucleotide(1.75μM)

2μl

T4 Polynucleotide Kinase 10X Buffer

1μl

Nuclease-Free Water

5μl

[γ-32P]ATP(3,000Ci/mmol at 10mCi/ml)

1μl

T4 Polynucleotide Kinase(5-10u/μl)

1μl

total volume

10μl
2. 如果用于生物素标记,具体方法和步骤可以参考碧云天的EMSA探针生物素标记试剂盒(GS008)
3. 如果用于冷竞争,没有标记的探针的用量应该是标记探针的用量的50-100倍。
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使用本产品的文献:
1. Gong W, Chen C, Xiong F, Yang Z, Wang Y, Huang J, Liu P, Huang H.
Biochem Pharmacol . 2016 Sep 15;116:140-52. (IF 4.96)
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