中文 | English
订货电话
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
工作日9:00-17:00
订货邮件
order@beyotime.com
订货QQ
4001683301
微信在线咨询
订单下载
碧云天订单.xls
核酸相关> 菌种与质粒> 原核载体
pET-N-His-C-His
产品编号: D2902-1μg
产品包装:1μg
选择包装
价格: ¥ 888.00
产品简介
使用说明
产品文件
相关产品
相关论文
产品问答
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2902-1μg pET-N-His-C-His 1μg 888.00元
D2902-100μg pET-N-His-C-His 100μg 1169.00元

pET-N-His-C-His是一种用于表达N端或C端含有His标签(His tag)的目的蛋白的原核表达质粒,也可以用于表达N端和C端都含有His标签的目的蛋白。本质粒为卡那霉素抗性。
本质粒含有T7启动子/lac操纵子,可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面和后面,各有一个His标签的编码序列,每个His标签编码6个组氨酸(6X His)。在多克隆位点按照读码框插入目的基因并带上终止密码子,就可以表达仅N端带有His标签的目的蛋白,如果在NdeI和多克隆酶切位点之间按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因,这样就可以表达仅C端带有His标签的目的蛋白,如果在多克隆位点按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因,这样就可以表达N端和C端都带有His标签的目的蛋白。
通常可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (P2210/P2218/P2220)或His标签蛋白纯化试剂盒(P2226)等纯化本质粒表达的目的蛋白,也可以使用His-tag抗体(AH367)检测和少量地分离纯化目的蛋白。
pET-N-His-C-His质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
f1 origin 12-467
Kanamycin resistance ORF 563-1645
PBR 322 origin 2084
LacI coding sequence 3518-4597
T7 promoter 4988-5004
His tag coding sequence 5079-5096
Multiple cloning site(BamHI-XhoI) 5097-5144
His tag coding sequence 5145-5162
T7 Terminator 5230-5276

pET-N-His-C-His质粒(5301bp)的图谱如下:

pET-N-His-C-His质粒的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2902 pET-N-His-C-His.pdf

pET-N-His-C-His中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-His-C-His)包括:

AatII Acc65I AflII AgeI AhdI AleI AscI
AvrII BaeI BbvCI BfuAI BmgBI BmtI BsaI
BseRI BsiWI BspMI BsrGI Bsu36I CspCI EagI
Eco53kI FseI KpnI MfeI NcoI NheI NotI
PacI PmeI PmlI PspXI RsrII SacI SacII
SbfI SexAI SfiI SnaBI SpeI SrfI StuI
ZraI

pET-N-His-C-His中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-His-C-His once)包括:

DraIII CAC,NNN`GTG 242 PspOMI G`GGCC,C 4035
PsiI TTA|TAA 370 NmeAIII GCCGAG(N)19,NN` 4041
PvuI CG,AT`CG 943 BstEII G`GTNAC,C 4060
AsiSI GCG,AT`CGC 943 MluI A`CGCG,T 4242
TspMI C`CCGG,G 1067 BstAPI GCAN,NNN`NTGC 4563
XmaI C`CCGG,G 1067 SphI G,CATG`C 4771
SmaI CCC|GGG 1069 SgrAI CR`CCGG,YG 4923
NruI TCG|CGA 1286 SgrAI CR`CCGG,YG 4923
AcuI CTGAAG(N)14,NN` 1597 XbaI T`CTAG,A 5034
AlwNI CAG,NNN`CTG 1729 NdeI CA`TA,TG 5074
BssSI C`ACGA,G 1968 BamHI G`GATC,C 5097
BstZ17I GTA|TAC 2374 HindIII A`AGCT,T 5103
Tth111I GACN`N,NGTC 2399 PstI C,TGCA`G 5109
PflFI GACN`N,NGTC 2399 EcoRI G`AATT,C 5115
PpuMI RG`GWC,CY 3136 EcoRV GAT|ATC 5123
FspI TGC|GCA 3164 SalI G`TCGA,C 5127
BglI GCCN,NNN`NGGC 3182 BglII A`GATC,T 5133
PshAI GACNN|NNGTC 3401 XhoI C`TCGA,G 5139
HpaI GTT|AAC 3740 PaeR7I C`TCGA,G 5139
BssHII G`CGCG,C 3831 BlpI GC`TNA,GC 5218
ApaI G,GGCC`C 4035 StyI C`CWWG,G 5240

pET-N-His-C-His质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T7 primer (4988-5004): 5′-TAATACGACTCACTATA-3′
pET-R primer (5215-5234): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
pET-N-His-C-His的全序列信息:D2902 pET-N-His-C-His.txt
不同原核表达质粒的比较和选择,以及标签、蛋白酶切位点和蛋白共表达的考虑可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/prokaryotic-plasmids.htm
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2902-1μg pET-N-His-C-His 1μg
D2902-100μg pET-N-His-C-His 100μg
说明书 1份

保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pET-N-His-C-His质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。

相关产品:

产品编号 产品名称 包装
D2902-1μg pET-N-His-C-His 1μg
D2902-100μg pET-N-His-C-His 100μg
D2905-1μg pET-N-His-TEV 1μg
D2905-100μg pET-N-His-TEV 100μg
D2908-1μg pET-N-His-Thrombin-C-His 1μg
D2908-100μg pET-N-His-Thrombin-C-His 100μg
D2911-1μg pET-N-GST-Thrombin-C-His 1μg
D2911-100μg pET-N-GST-Thrombin-C-His 100μg
D2916-1μg pET-N-GST-PreScission 1μg
D2916-100μg pET-N-GST-PreScission 100μg
D2931-1μg pET-Dual-N-GST 1μg
D2931-100μg pET-Dual-N-GST 100μg
D2933-1μg pET-Dual-N-GST-PreScission 1μg
D2933-100μg pET-Dual-N-GST-PreScission 100μg
P2210 BeyoGold™ His-tag Purification Resin 10ml
P2218 BeyoGold™ His-tag Purification Resin 100ml
P2220 BeyoGold™ His-tag Purification Resin 1000ml
P2226 His标签蛋白纯化试剂盒 10ml
P2251 BeyoGold™ GST-tag Purification Resin 10ml
P2253 BeyoGold™ GST-tag Purification Resin 100ml
P2255 BeyoGold™ GST-tag Purification Resin 1000ml
P2262 GST标签蛋白纯化试剂盒 10ml
P2302 PreScission Protease 100U
P2303 PreScission Protease 500U
P2307 TEV Protease 1000U
P2308 TEV Protease 10000U
AH367 His-tag 抗体 >20次
AG768 GST抗体 >20次
AF0174 GST Mouse Monoclonal Antibody 50μl


物质安全数据单
输入右侧验证码点击下载:
更换校验码
质检证书
输入批号搜寻COA
搜索
相关产品请点击如下按钮:
使用本产品的文献:
1. Qi Li, Zhiqiang Zhang, Weiqi Fan, Yongxiong Huang, Jinzhong Niu, Guoling Luo, Xinchao Liu, Yu Huang, Jichang Jian
.
Front Immunol. 2021 May 20;12:667781. doi: 10.3389/fimmu.2021.667781. (IF 5.085)
购物车
会员
顶部