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报告基因质粒

pRL-SV40-C (报告基因质粒)
产品编号: D2768-100μg
产品包装: 100μg
产品价格: 1086.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2768-100μg pRL-SV40-C (报告基因质粒) 100μg 1086.00元

      pRL-SV40-C(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒,主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的3' -UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性,或用作萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参。也可以使用Bgl II和Pst I等位点切除SV40 early enhancer/promoter,以降低本底性的转录,并插入感兴趣的3' -UTR等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。研究5' -UTR并希望使用海肾萤光素酶时,推荐使用D2762 pRL-SV40-N
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pRL-SV40-C质粒含有SV40早期增强子和启动子,可以实现海肾萤光素酶在哺乳动物细胞内高效表达。
      pRL-SV40-C质粒携带renilla luciferase基因,编码分子量为36kD的海肾萤光素酶,翻译后无需修饰,常用于报告基因检
测。
      本质粒为氨苄抗性。
      pRL-SV40-C质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
SV40 early enhancer/promoter 7-418
Chimeric intron 490-626
T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2) 670-688
T7 RNA polymerase transcription initiation site 687
Rluc reporter gene 698-1633
Multiple cloning site 1635-1701
SV40 late polyadenylation signal 1781-1942
β-lactamase (Ampr) coding region 2079-2494

      pRL-SV40-C质粒(3775bp)的图谱如下:

      pRL-SV40-C的多克隆位点的详细图谱如下:

EcoRI
XhoI SacI MluI HindIII EcoRV SalI
1631 TAATTCTAGG CTCGAGGAGC TCACGCGTAA GCTTGAATTC GATATCGTCG
ATTAAGATCC GAGCTCCTCG AGTGCGCATT CGAACTTAAG CTATAGCAGC
SpeI ApaI XbaI
1681 ACACTAGTGG GCCCTCTAGA GCTAGAGCGG
TGTGATCACC CGGGAGATCT CGATCTCGCC

      pRL-SV40-C中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-SV40-C)包括:

AgeI AlwNI ApaI ApaLI AscI BbeI BlpI
BpmI BsaI BsgCI Bsp120I BssHI Bst1107I Bsu36I
EagI Eco47III EcoNI EheI EspI FseI GsuI
KasI MmeI MscI MslI NarI NdeI NotI
NruI NsiI PstI RsrI SacII SapI SfiI
SphI SrfI StuI TfiI Tth111I

      pRL-SV40-C中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-SV40-C once)包括:

BglII A`GATC,T 1 EcoO109I RG`GNC,CY 1690
Acc65I G`GTAC,C 54 ApaI G,GGCC`C 1693
Asp718 G`GTAC,C 54 XbaI T`CTAG,A 1695
KpnI G,GTAC`C 58 NotI GC`GGCC,GC 1708
PvuII CAG|CTG 80 EagI C`GGCC,G 1708
SfiI GGCCN,NNN`NGGCC 357 XmaIII C`GGCC,G 1708
StuI AGG|CCT 403 HpaI GTT|AAC 1851
AvrII C`CTAG,G 404 MunI C`AATT,G 1860
PstI C,TGCA`G 466 ClaI AT`CG,AT 1946
BspMI ACCTGC 10/14 480 BsaBI GATNN|NNATC 1952
BsiCI TT`CG,AA 704 BamHI G`GATC,C 1953
BstBI TT`CG,AA 704 SspI AAT|ATT 2071
XcmI CCANNNN,N`NNNNTGG 1347 Bsp1286I G,DGCH`C 2293
BsrGI A`CGCG,T 1396 AhaII GR`CG,YC 2336
BsaAI YAC|GTR 1430 BsaHI GR`CG,YC 2336
AvaI C`YCGR,G 1641 HinII GR`CG,YC 2336
PaeR7I C`TCGA,G 1641 PvuI CG,AT`CG 2507
XhoI C`TCGA,G 1641 EcoNI CCTNN`N,NNAGG 2515
SacI G,AGCT`C 1651 Cfr10I R`CCGG,Y 2791
MluI A`CGCG,T 1653 GsuI CTGGAG 21/19 2806
HinDIII A`AGCT,T 1659 BpmI CTGGAG 22/20 2807
EcoRI G`AATT,C 1665 AhdI GACNN,N`NNGTC 2876
EcoRV GAT|ATC 1673 PleI GAGTC 9/10 2885
SalI G`TCGA,C 1677 HgiEII ACCNNNNNNGGT-1/13 3175
AccI GT`MK,AC 1678 AlwNI CAG,NNN`CTG 3355
SpeI A`CTAG,T 1683 HaeII R,GCGC`Y 3524
Bsp120I G`GGCC,C 1689

      pRL-SV40-C质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      T7 Primer(670-688):TAATACGACTCACTATAGG
      pRL-SV40-C的全序列信息:D2768 pRL-SV40-C-seq.txt
包装清单

产品编号 产品名称 包装
D2768-1μg pRL-SV40-C(报告基因质粒) 1μg
D2768-100μg pRL-SV40-C(报告基因质粒) 100μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pRL-SV40-C质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入感兴趣的5’-UTR、启动子、增强子等调控元件,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
4. pRL-SV40-C质粒或使用该质粒构建的新质粒转染细胞后,后续可以采用碧云天的海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG016/RG017)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)检测海肾荧光素酶的表达水平。
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