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报告基因质粒

pRL-SV40-N(报告基因质粒)
产品编号: D2762-100μg
产品包装: 100μg
产品价格: 1086.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2762-100μg pRL-SV40-N(报告基因质粒) 100μg 1086.00元

      pRL-SV40-N(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒,主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的5' -UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性,或
用作萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参。也可以使用Bgl II和Pst I等位点切除SV40 early enhancer/promoter,以降低本底性的转录,并插入感兴趣的5' -UTR等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。研究3' -UTR并希望使用海肾荧光
素酶时,推荐使用D2768 pRL-SV40-C。
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pRL-SV40-N质粒含有SV40早期增强子和启动子,可以实现海肾萤光素酶在哺乳动物细胞内的高效表达。
      pRL-SV40-N质粒携带renilla luciferase基因,编码分子量为36kD的海肾萤光素酶,翻译后无需修饰,常用于报告基因检
测。
      本质粒为氨苄抗性。
      pRL-SV40-N质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
SV40 early enhancer/promoter 7-418
Multiple cloning site 421-480
Chimeric intron 546-682
T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2) 726-744
T7 RNA polymerase transcription initiation site 743
Rluc reporter gene 754-1689
SV40 late polyadenylation signal 1731-1932
β-lactamase (Ampr) coding region 2079-2939

      pRL-SV40-N质粒(3765bp)的图谱如下:

      pRL-SV40-N的多克隆位点的详细图谱如下:

EcoRI
XhoI SacI MluI HindIII EcoRV
411 TTTTGCAAAA AGCTCCTCGA GGAGCTCACG CGTAAGCTTG AATTCGATAT
AAAACGTTTT TCGAGGAGCT CCTCGAGTGC GCATTCGAAC TTAAGCTATA
SalI SpeI ApaI
461 CGTCGACACT AGTGGGCCCC AGCTTGATTC TTCTGACACA ACAGTCTCGA
GCAGCTGTGA TCACCCGGGG TCGAACTAAG AAGACTGTGT TGTCAGAGCT

      pRL-SV40-N中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-SV40-N)包括:

AatII AgeI AscI BbeI BlpI BsgI BsiWI
BsmBI BspMII BssHII Bst1107I BstEII BstXI Bsu36I
DraIII Eco47III Eco72I EheI EspI FseI KasI
MscI NaeI NarI NdeI NgoMI NruI PflMI
PmeI PmlI PpuMI PspAI RsrII SacII SapI
SmaI SnaBI SplI SrfI Tth111I

      pRL-SV40-N中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-SV40-N once)包括:

BglII A`GATC,T 1 XcmI CCANNNN,N`NNNNTGG 1403
Acc65I G`GTAC,C 54 BsrGI T`GTAC,A 1452
Asp718 G`GTAC,C 54 BsaAI YAC|GTR 1486
KpnI G,GTAC`C 58 XbaI T`CTAG,A 1691
PvuII CAG|CTG 80 NotI GC`GGCC,GC 1698
SfiI GGCCN,NNN`NGGCC 357 EagI C`GGCC,G 1698
StuI AGG|CCT 403 XmaIII C`GGCC,G 1698
AvrII C`CTAG,G 404 HpaI GTT|AAC 1841
AvaI C`YCGR,G 426 MunI C`AATT,G 1850
PaeR7I C`TCGA,G 426 ClaI AT`CG,AT 1936
XhoI C`TCGA,G 426 BsaBI GATNN|NNATC 1942
SacI G,AGCT`C 436 BamHI G`GATC,C 1943
MluI A`CGCG,T 438 SspI AAT|ATT 2061
HinDIII A`AGCT,T 444 Bsp1286I G,DGCH`C 2283
EcoRI G`AATT,C 450 AhaII GR`CG,YC 2326
EcoRV GAT|ATC 458 BsaHI GR`CG,YC 2326
SalI G`TCGA,C 462 HinII GR`CG,YC 2326
AccI GT`MK,AC 463 PvuI CG,AT`CG 2497
SpeI A`CTAG,T 468 EcoNI CCTNN`N,NNAGG 2505
Bsp120I G`GGCC,C 474 Cfr10I R`CCGG,Y 2781
EcoO109I RG`GNC,CY 475 BpmI CTGGAG 22/20 2797
ApaI G,GGCC`C 478 AhdI GACNN,N`NNGTC 2866
PstI C,TGCA`G 522 GsuI CTGGAG 21/19` 2796
BspMI ACCTGC 10/14 536 PleI GAGTC 9/10 2875
NheI G`CTAG,C 744 HgiEII ACCNNNNNNGGT1/13 3165
BsiCI TT`CG,AA 760 AlwNI CAG,NNN`CTG 3345
BstBI TT`CG,AA 760 HaeII R,GCGC`Y 3514

      pRL-SV40-N质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      T7 Primer(726-744): TAATACGACTCACTATAGG
      pRL-SV40-N的全序列信息: D2762 pRL-SV40-N-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2762-1μg pRL-SV40-N(报告基因质粒) 1μg
D2762-100μg pRL-SV40-N(报告基因质粒) 100μg
说明书 1份

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      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为1μg/μl,共100μl。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pRL-SV40-N质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入感兴趣的5' -UTR、启动子、增强子等调控元件,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
4. pRL-SV40-N质粒或使用该质粒构建的新质粒转染细胞后,后续可以采用碧云天的海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒
(RG016/RG017)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)检测海肾荧光素酶的表达水平。

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