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 pCMV-C-Myc

  产品编号D2672-100μg
  产品包装: 100μg
  产品价格: 1086.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2672-100μg pCMV-C-Myc 100μg 1086.00元

      pCMV-C-Myc是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
      pCMV-C-Myc质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
CMV promoter 1-602
T3 promoter and T3 primer binding site 620-639
multiple cloning site 680-740
c-Myc tag 741-770
T7 promoter and T7 primer binding site 823-844
SV40 polyA signal 856-1239
f1 origin of ss-DNA replication 1377-1681
bla promoter 1706-1830
SV40 promoter 1850-2188
neomycin/kanamycin resistance ORF 2223-3014
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal 3015-3473
pUC origin 3602-4269

      pCMV-C-Myc质粒的图谱如下:

      pCMV-C-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:

XmaIPstI
SacI Smal BamHI HindIII
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA
Myc
EcoRIEcoRVSalI BglII XhoI XbaI
E Q K L
701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA
GAGCAGAAAC
CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT
CTCGTCTTTG
tag
I S E E D L ApaI
751 TCATCTCTGA
AGAGGATCTG
TAA GGGCCCG
GTACCTTAAT TAATTAAGGT
AGTAGAGACT
TCTCCTAGAC
ATT CCCGGGC
CATGGAATTA ATTAATTCCA

      pCMV-C-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Myc)包括:

Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru I
PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca I
Spe I Spl I

      pCMV-C-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Myc once)包括:

Nde I CA`TA,TG 241 Pvu I CG,AT`CG 857
SnaB I TAC|GTA 347 Bcl I T`GATC,A 1011
Nhe I G`CTAG,C 598 Mun I C`AATT,G 1104
Sac I G,AGCT`C 656 Hpa I GTT|AAC 1117
Sac II CC,GC`GG 663 Mlu I A`CGCG,T 1240
BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664 Dra III CAC,NNN`GTG 1470
Not I GC`GGCC,GC 669 Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2127
PspA I C`CCGG,G 681 BseR I GAGGAG 16/14 2170
Xma I C`CCGG,G 681 Stu I AGG|CCT 2173
Srf I GCCC|GGGC 683 Cla I AT`CG,AT 2192
Sma I CCC|GGG 683 Kas I G`GCGC,C 2351
BamH I G`GATC,C 688 Nar I GG`CG,CC 2352
Hind III A`AGCT,T 694 Ehe I GGC|GCC 2353
Pst I C,TGCA`G 704 Bbe I G,GCGC`C 2355
EcoR I G`AATT,C 706 Msc I TGG|CCA 2434
EcoR V GAT|ATC 714 Tth111 I GACN`N,NGTC 2470
Sal I G`TCGA,C 718 BsrD I GCAATG, 8 2585
Acc I GT`MK,AC 719 Bsp1286 I G,DGCH`C 2655
Bgl II A`GATC,T 724 Rsr II CG`GWC,CG 2868
PaeR7 I C`TCGA,G 730 BsiC I TT`CG,AA 3034
Xho I C`TCGA,G 730 BstB I TT`CG,AA 3034
Xba I T`CTAG,A 736 Bsa I GGTCTC 7/11 3341
Ear I CTCTTC 7/10 755 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3681
Bsp120 I G`GGCC,C 775 ApaL I G`TGCA,C 3956
Apa I G,GGCC`C 779

      pCMV-C-Myc质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
      T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
      T7 primer(823-844): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
      pCMV-C-Myc的全序列信息: D2672 pCMV-C-Myc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2672-1μg pCMV-C-Myc 1μg
D2672-100μg pCMV-C-Myc 100μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3.pCMV-C-Myc质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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使用本产品的文献:
1. Wang PH, Yang LS, Gu ZH, Weng SP, Yu XQ, He JG.
Nucleic acid-induced antiviral immunity in shrimp.
Antiviral Res. 2013 Sep;99(3):270-80.
2. Du Y, Wu J, Zhang H, Li S, Sun H.
Reduced expression of SIRT2 in serous ovarian carcinoma promotes cell proliferation through disinhibition of CDK4 expression.
Mol Med Rep. 2017 Apr;15(4):1638-1646.
3. Song L, Chang R, Dai C, Wu Y, Guo J, Qi M, Zhou W, Zhan L.
SORBS1 suppresses tumor metastasis and improves the sensitivity of cancer to chemotherapy drug.
Oncotarget. 2017 Feb 7;8(6):9108-9122.
4. Liu Q, Xu D, Jiang S, Huang J, Zhou F, Yang Q, Jiang S, Yang L.
Toll-receptor 9 gene in the black tiger shrimp (Penaeus monodon) induced the activation of the TLR-NF-κB signaling pathway.
Gene. 2018 Jan 10;639:27-33.