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报告基因质粒

pTNF-α-promoter-TA-luc (报告基因质粒)
产品编号: D2481-1μg
产品包装: 1μg
产品价格: 888.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2481-1μg pTNF-α-promoter-TA-luc (报告基因质粒) 1μg 888.00元

      pTNF-α-promoter-TA-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测TNF-α promoter转录活性水平的报告基因质粒。
      pTNF-α-promoter-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了human TNF-α的启动子序列(-991bp~-1bp),可以高灵敏度地检测human TNF-α promoter的激活水平。
      TNF-α(Tumor Necrosis Factor α),中文名为肿瘤坏死因子α,是一种非常重要的炎性细胞因子,在炎性疾病的发生发展过程中起重要作用,常作为炎症反应的重要指标。
      pGL6-TA是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比
Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pTNF-α-promoter-TA-luc质粒的主要信息如下:

Base pairs 6596
hTNF-α promoter 20-1010
Minimal TA promoter(pTA) 1033-1055
luc2 reporter gene 1097-2749
SV40 late poly(A)signal 2784-3005
SV40 early enhancer/promoter 3053-3471
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region 3496-4290
Synthetic poly(A)signal 4315-4363
Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region 4430-4449
ColE1-derived plasmid replication origin 4687
Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region 5451-6348
Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site 6443-6596
Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region 6545-6564

      pTNF-α-promoter-TA-luc质粒的图谱如下:

      pTNF-α-promoter-TA-luc的多克隆位点及TNF-α promoter的详细图谱如下:

BglI KpnI TNF-α promoter
1 GGCCTAACTG
GCCGGTACC A
GCTCCTGGGA GATATGGCCA
CATGTAGCGG
CCGGATTGAC
CGGCCATGG T
CGAGGACCCT CTATACCGGT
GTACATCGCC
51 CTCTGAGGAA TGGGTTACAG GAGACCTCTG GGGAGATGTG
ACCACAGCAA
GAGACTCCTT ACCCAATGTC CTCTGGAGAC CCCTCTACAC
TGGTGTCGTT
101 TGGGTAGGAG AATGTCCAGG GCTATGGAAG TCGAGTATGG
GGACCCCCCC
ACCCATCCTC TTACAGGTCC CGATACCTTC AGCTCATACC
CCTGGGGGGG
151 TTAACGAAGA CAGGGCCATG TAGAGGGCCC CAGGGAGTGA
AAGAGCCTCC
AATTGCTTCT GTCCCGGTAC ATCTCCCGGG GTCCCTCACT
TTCTCGGAGG
201 AGGACCTCCA GGTATGGAAT ACAGGGGACG TTTAAGAAGA
TATGGCCACA
TCCTGGAGGT CCATACCTTA TGTCCCCTGC AAATTCTTCT
ATACCGGTGT
251 CACTGGGGCC CTGAGAAGTG AGAGCTTCAT GAAAAAAATC
AGGGACCCCA
GTGACCCCGG GACTCTTCAC TCTCGAAGTA CTTTTTTTAG
TCCCTGGGGT
301 GAGTTCCTTG GAAGCCAAGA CTGAAACCAG CATTATGAGT
CTCCGGGTCA
CTCAAGGAAC CTTCGGTTCT GACTTTGGTC GTAATACTCA
GAGGCCCAGT
EcoRI XmaI/SmaI
351 GAATGAAAGA AGAAGGCCTG CCCCAGTGGG GTCTGTGAAT
TCCCGGGGGT
CTTACTTTCT TCTTCCGGAC GGGGTCACCC CAGACACTTA
AGGGCCCCCA
XmaI/SmaI
401 GATTTCACTC CCCGGGGCTG TCCCAGGCTT GTCCCTGCTA
CCCCCACCCA
CTAAAGTGAG GGGCCCCGAC AGGGTCCGAA CAGGGACGAT
GGGGGTGGGT
451 GCCTTTCCTG AGGCCTCAAG CCTGCCACCA AGCCCCCAGC
TCCTTCTCCC
CGGAAAGGAC TCCGGAGTTC GGACGGTGGT TCGGGGGTCG
AGGAAGAGGG
501 CGCAGGGACC CAAACACAGG CCTCAGGACT CAACACAGCT
TTTCCCTCCA
GCGTCCCTGG GTTTGTGTCC GGAGTCCTGA GTTGTGTCGA
AAAGGGAGGT
551 ACCCCGTTTT CTCTCCCTCA AGGACTCAGC TTTCTGAAGC
CCCTCCCAGT
TGGGGCAAAA GAGAGGGAGT TCCTGAGTCG AAAGACTTCG
GGGAGGGTCA
601 TCTAGTTCTA TCTTTTTCCT GCATCCTGTC TGGAAGTTAG
AAGGAAACAG
AGATCAAGAT AGAAAAAGGA CGTAGGACAG ACCTTCAATC
TTCCTTTGTC
651 GCCACAGACC TGGTCCCCAA AAGAAATGGA GGCAATAGGT
TTTGAGGGGC
CGGTGTCTGG ACCAGGGGTT TTCTTTACCT CCGTTATCCA
AAACTCCCCG
701 ATGGGGACGG GGTTCAGCCT CCAGGGTCCT ACACACAAAT
CAGTCAGTGG
TACCCCTGCC CCAAGTCGGA GGTCCCAGGA TGTGTGTTTA
GTCAGTCACC
751 CCCAGAAGAC CCCCCTCGGA ATCGGAGCAG GGAGGATGGG
GAGTGTGAGG
GGGTCTTCTG GGGGGAGCCT TAGCCTCGTC CCTCCTACCC
CTCACACTCC
801 GGTATCCTTG ATGCTTGTGT GTCCCCAACT TTCCAAATCC
CCGCCCCCGC
CCATAGGAAC TACGAACACA CAGGGGTTGA AAGGTTTAGG
GGCGGGGGCG
851 GATGGAGAAG AAACCGAGAC AGAAGGTGCA GGGCCCACTA
CCGCTTCCTC
CTACCTCTTC TTTGGCTCTG TCTTCCACGT CCCGGGTGAT
GGCGAAGGAG
SacI
901 CAGATGAGCT CATGGGTTTC TCCACCAAGG AAGTTTTCCG
CTGGTTGAAT
GTCTACTCGA GTACCCAAAG AGGTGGTTCC TTCAAAAGGC
GACCAACTTA
951 GATTCTTTCC CCGCCCTCCT CTCGCCCCAG GGACATATAA
AGGCAGTTGT
CTAAGAAAGG GGCGGGAGGA GAGCGGGGTC CCTGTATATT
TCCGTCAACA
PstI
-1 BglII HindIII Minimal TA promoter
1001
TGGCACACCC
AGATCTGCAG AAGCTTAGAC
AC TAGAGGGT
ATATAATGGA
ACCGTGTGGG
TCTAGACGTC TTCGAATCTG
TG ATCTCCCA
TATATTACCT
1051
AGCTC GACTT
CCAGCTTGGC AATCCGGTAC TGTTGGTAAA GCCACCATGG
TCGAG CTGAA
GGTCGAACCG TTAGGCCATG ACAACCATTT CGGTGGTACC

      pTNF-α-promoter-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pTNF-α-promoter-TA-luc)包括:

Aat II Afl II Asc I Ase I BsaA I BsiW I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR V Mlu I Nde I Nhe I Nru I
PaeR7 I Pme I Pml I Psp1406 I Rsr II SnaB I Spl I
Srf I Vsp I Xcm I Xho I

      pTNF-α-promoter-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pTNF-α-promoter-TA-luc once)包括:

Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 EcoN I CCTNN`N,NNAGG 3971
Bgl I GCCN,NNN`NGGC 9 BsiC I TT`CG,AA 4366
Acc65 I G`GTAC,C 15 BstB I TT`CG,AA 4366
Asp718 G`GTAC,C 15 Sal I G`TCGA,C 4380
Kpn I G,GTAC`C 19 ApaL I G`TGCA,C 4944
Bsa I GGTCTC 7/11 66 HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/135209
EcoR I G`AATT,C 388 Not I GC`GGCC,GC 5450
Tth111 I GACN`N,NGTC 661 BstE II G`GTNAC,C 5477
Sac I G,AGCT`C 911 Ahd I GACNN,N`NNGTC 5552
Bgl II A`GATC,T 1012 Pvu I CG,AT`CG 5922
Hind III A`AGCT,T 1022 Sac II CC,GC`GG 5946
BsrG I T`GTAC,A 1588 Bst1107 I GTA|TAC 6062
Dra III CAC,NNN`GTG 2244 Xca I GTA|TAC 6062
Mun I C`AATT,G 2924 Spe I A`CTAG,T 6381
BamH I G`GATC,C 3017 BsmB I CGTCTC 7/11 6394

      pTNF-α-promoter-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      RVprimer3(6545-6564):
      CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
      pTNF-α-promoter-TA-luc的全序列信息: D2481 pTNF-α-promoter-TA-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2481-1μg pTNF-α-promoter-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2481-100μg pTNF-α-promoter-TA-luc (报告基因质粒) 100μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pTNF-α-promoter-TA-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
4. LPS等是常见的可以激活TNF-α转录的试剂,可以用作pTNF-α-promoter-TA-luc报告基因检测时的阳性对照。
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