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报告基因质粒

pIL-6-promoter-luc (报告基因质粒)
产品编号: D2386-1μg
产品包装: 1μg
产品价格: 888.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2386-1μg pIL-6-promoter-luc (报告基因质粒) 1μg 888.00元

      pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测IL-6 promoter转录活性水平的报告基因质粒。
      pIL-6-promoter-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了human IL-6的启动子序列(-637bp~+53bp),可以高灵敏度地检测IL-6 promoter的激活水平。
      IL-6(Interleukin-6),中文名为白细胞介素-6,简称白介素6,是一种非常重要的炎性细胞因子,在炎性疾病的发生发展过程中起重要作用,常作为炎症反应的重要指标。
      pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比
Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pIL-6-promoter-luc质粒的主要信息如下:

Base pairs 6252
IL-6 promoter 20-707
luc2 reporter gene 753-2405
SV40 late poly(A) signal 2440-2661
SV40 early enhancer/promoter 2709-3127
Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor) coding region 3152-3946
Synthetic poly(A) signal 3971-4019
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 4086-4105
ColE1-derived plasmid replication origin 4343
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 5134-5994
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 6099-6252
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 6201-6220

      pIL-6-promoter-luc质粒的图谱如下:

      pIL-6-promoter-luc的多克隆位点及IL-6 promoter的详细图谱如下:

BglI KpnI IL-6 promoter
1 GGCCTAACTG
GCCGGTACC T
GGAGACGCCT TGAAGTAACT GCACGAAATT
CCGGATTGAC
CGGCCATGG A
CCTCTGCGGA ACTTCATTGA CGTGCTTTAA
51 TGAGGGTGGC CAGGCAGTTC TACAACAGCC GCTCACAGGG AGAGCCAGAA
ACTCCCACCG GTCCGTCAAG ATGTTGTCGG CGAGTGTCCC TCTCGGTCTT
101 CACAGAAGAA CTCAGATGAC TGGTAGTATT ACCTTCTTCA TAATCCCAGG

GTGTCTTCTT GAGTCTACTG ACCATCATAA TGGAAGAAGT ATTAGGGTCC
151 CTTGGGGGGC TGCGATGGAG TCAGAGGAAA CTCAGTTCAG AACATCTTTG

GAACCCCCCG  ACGCTACCTC AGTCTCCTTT GAGTCAAGTC TTGTAGAAAC
201 GTTTTTACAA ATACAAATTA  ACTGGAACGC TAAATTCTAG  CCTGTTAATC
CAAAAATGTT TATGTTTAAT 
TGACCTTGCG  ATTTAAGATC  GGACAATTAG
251 TGGTCACTGA 
AAAAAAAAAT  TTTTTTTTTT  CAAAAACCAT  AGCTTTAGCT

ACCAGTGACT  TTTTTTTTTA  AAAAAAAAAA  GTTTTTGGTA  TCGAAATCGA
301 TATTTTTTTT CTCTTTGTAA   AACTTCGTGC  ATGACTTCAG CTTTACTCTT

ATAAAAAAAA GAGAAACATT TTGAAGCACG TACTGAAGTC  GAAATGAGAA
351 TGTCAAGACA
TGCCAAAGTG   CTGAGTCACT AATAAAAGAA AAAAAGAAAG
ACAGTTCTGT  ACGGTTTCAC  GACTCAGTGA  TTATTTTCTT  TTTTTCTTTC
NheI
401 TAAAGGAAGA 
GTGGTTCTGC TTCTTAGCGC  TAGCCTCAAT GACGACCTAA
ATTTCCTTCT  CACCAAGACG  AAGAATCGCG  ATCGGAGTTA  CTGCTGGATT
451 GCTGCACTTT 
TCCCCCTAGT  TGTGTCTTGC  GATGCTAAAG  GACGTCACAT
CGACGTGAAA  AGGGGGATCA  ACACAGAACG  CTACGATTTC  CTGCAGTGTA
501 TGCACAATCT
TAATAAGGTT TCCAATCAGC CCCACCCGCT  CTGGCCCCAC
ACGTGTTAGA  ATTATTCCAA  AGGTTAGTCG  GGGTGGGCGA  GACCGGGGTG
551 CCTCACCCTC 
CAACAAAGAT  TTATCAAATG  TGGGATTTTC  CCATGAGTCT
GGAGTGGGAG  GTTGTTTCTA AATAGTTTAC ACCCTAAAAG GGTACTCAGA
TATA box
601 CAATATTAGA 
GTCTCAACCC 
CCAATAAA TA
TA GGACTGGA
GATGTCTGAG
GTTATAATCT   CAGAGTTGGG GGTTATTTAT  ATCCTGACCT  CTACAGACTC
+1
651
GCTC A TTCTG
CCCTCGAGCC  CACCGGGAAC  GAAAGAGAAG  CTCTATCTCC
CGAGTAAGAC  GGGAGCTCGG GTGGCCCTTG CTTTCTCTTC  GAGATAGAGG
BglII HindIII
701
CCTCCAG AGA
TCTGCAGAAG  CTTGGCAATC  CGGTACTGTT  GGTAAAGCCA
GGAGGTC TCT
AGACGTCTTC  GAACCGTTAG  GCCATGACAA  CCATTTCGGT 

      pIL-6-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pIL-6-promoter-luc)包括:

Afl II Asc I Ase I
Bsa I BsaA I BsiW I BspM II BssH II
Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I
Nru I PflM I Pme I
Pml I
Psp1406 I PspA I Rsr II Sac I
Sma I SnaB I Spl I
Srf I Tth111 I Vsp I Xcm I Xma I Xmn I

      pIL-6-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pIL-6-promoter-luc once)包括:

Sfi I  GGCCN,NNN`NGGCC 9 BsiC I TT`CG,AA 
4022
Bgl I GCCN,NNN`NGGC        9 BstB I TT`CG,AA
4022
Acc65 I  G`GTAC,C 15 Sal I G`TCGA,C 4036
Asp718  G`GTAC,C     15
Afl III  A`CRYG,T
4286
Kpn I G,GTAC`C 19 ApaL I   G`TGCA,C 4600
Nhe I G`CTAG,C 430
HgiE II  ACCNNNNNNGGT
-1/134865
Aat II G,ACGT`C 496
Not I   ACCNNNNNNGGT
5106
PaeR7 I C`TCGA,G 664
BstX I  CCAN,NNNN`NTGG 5130
Xho I
C`TCGA,G  664
BstE II G`GTNAC,C  
5133
Bgl II  A`GATC,T 709
Ahd I GACNN,N`NNGTC  5208
Hind III A`AGCT,T  719
Bsu36 I CC`TNA,GG 5564
BsrG I
T`GTAC,A  1244
Pvu I CG,AT`CG 5578
Dra III CAC,NNN`GTG 1900
Sac II CC,GC`GG  5602
Mun I C`AATT,G 2580
Bst1107 I  GTA|TAC 5718
BamH I G`GATC,C  2673
Xca I GTA|TAC  5718
Stu I  AGG|CCT 3106
Spe I  A`CTAG,T  6037
EcoN I CCTNN`N,NNAGG
3627
 

      pIL-6-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      RVprimer3(6201-6220):
      CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
      pIL-6-promoter-luc的全序列信息: D2386 pIL-6-promoter-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2386-1μg pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒) 1μg
D2386-100μg pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒) 100μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pIL-6-promoter-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
4. LPS等常见的可以激活IL-6 promoter的试剂,可以用作pIL-6-promoter-luc报告基因检测时的阳性对照。
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