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报告基因质粒

pp53-TA-luc (报告基因质粒)
产品编号: D2223-1μg
产品包装: 1μg
产品价格: 888.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2223-1μg pp53-TA-luc (报告基因质粒) 1μg 888.00元

      pp53-TA-luc (报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测p53转录活性水平的报告基因质粒。pp53-TA-luc是以碧云天的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个p53结合位点,可以高灵敏度地检测p53的激活水平。
      pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
      萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
      pp53-TA-luc质粒的主要信息如下:

Base pairs 5659
p53 response element 20-73
Minimal TA promoter (pTA) 96-118
luc2 reporter gene 160-1812
SV40 late poly(A) signal 1847-2068
SV40 early enhancer/promoter 2116-2534
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region 2559-3353
Synthetic poly(A) signal 3378-3426
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region 3493-3512
ColE1-derived plasmid replication origin 3750
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region 4541-5401
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site 5506-5659
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region 5608-5627

      pp53-TA-luc质粒的图谱如下:

      pp53-TA-luc的多克隆位点及p53 response element的详细图谱如下:

BglI KpnI p53 response element
1 GGCCTAACTG
GCCGGTACC A
CGTTTGCCTT GCCTGGACTT GCCTGGCCTT
CCGGATTGAC
CGGCCATGG T
GCAAACGGAA CGGACCTGAA CGGACCGGAA
BglII HindIII
51 GCCTTGGACA TGCCCGGGCT
GTC AGATCTG
CAGAAGCTTA
GACAC TAGAG
CGGAACCTGT ACGGGCCCGA
CAG TCTAGAC
GTCTTCGAAT
CTGTG ATCTC
Minimal TA promoter
101 GGTATATAAT
GGAAGCTC GA
CTTCCAGCTT GGCAATCCGG TACTGTTGGT
CCATATATTA
CCTTCGAG CT
GAAGGTCGAA CCGTTAGGCC ATGACAACCA

      pp53-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pp53-TA-luc)包括:

Aat II Afl II Asc I Ase I Bsa I BsaA I BsiW I BspM II
BssH II Eco72 I EcoR I EcoR V Mlu I Nde I Nhe I Nru I
PaeR7 I PflM I Pme I Pml I Psp1406 I Rsr II Sac I SnaB I
Spl I Tth111 I Vsp I Xcm I Xho I Xmn I

      pp53-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pp53-TA-luc once)包括:

Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 9 EcoN I CCTNN`N,NNAGG 3034
Bgl I GCCN,NNN`NGGC 9 BsiC I TT`CG,AA 3429
Acc65 I G`GTAC,C 15 BstB I TT`CG,AA 3429
Asp718 G`GTAC,C 15 Sal I G`TCGA,C 3443
Kpn I G,GTAC`C 19 Afl III A`CRYG,T 3693
PspA I C`CCGG,G 64 ApaL I G`TGCA,C 4007
Xma I C`CCGG,G 64 HgiE II ACCNNNNNNGGT -1/13 4272
Srf I GCCC|GGGC 66 Not I GC`GGCC,GC 4513
Sma I CCC|GGG 66 BstX I CCAN,NNNN`NTGG 4537
Bgl II A`GATC,T 75 BstE II G`GTNAC,C 4540
Hind III A`AGCT,T 85 Ahd I GACNN,N`NNGTC 4615
BsrG I T`GTAC,A 651 Bsu36 I CC`TNA,GG 4971
Dra III CAC,NNN`GTG 1307 Pvu I CG,AT`CG 4985
Gsu I CTGGAG 21/19 1540 Sac II CC,GC`GG 5009
Bpm I CTGGAG 22/20 1541 Bst1107 I GTA|TAC 5125
Apo I R`AATT,Y 1923 Xca I GTA|TAC 5125
Mun I C`AATT,G 1987 Spe I A`CTAG,T 5444
BamH I G`GATC,C 2080 BsmA I GTCTC`/9 5456
Stu I AGG|CCT 2513 BsmB I CGTCTC 7/11 5457

      pp53-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
      RVprimer3 (5608-5627):
      CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
      pp53-TA-luc的全序列信息: D2223 pp53-TA-luc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2223-1μg pp53-TA-luc (报告基因质粒) 1μg
D2223-100μg pp53-TA-luc (报告基因质粒) 100μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pp53-TA-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
4. 紫外照射、离子辐射等可以导致DNA损伤的作用或试剂可以激活p53,可以用作pp53-TA-luc报告基因检测时的阳性对照。
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使用本产品的文献:
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