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LBA4404根瘤农杆菌甘油菌(转基因植物构建用)
产品编号: D0393
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价格: ¥ 118.00
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D0393 LBA4404根瘤农杆菌甘油菌(转基因植物构建用) 200μl 118.00元

碧云天生产的LBA4404根瘤农杆菌甘油菌(转基因植物构建用),LBA4404 agrobacterium tumefaciens glycerol stock for construction of transgenic plant,是收集生长在对数期的LBA4404根瘤农杆菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。本甘油菌可以直接划平板或小量、大量培养,常用于转基因植物用菌株的构建。本菌株适用于番茄(tomato)、烟草(tobacco)等植物的转基因操作。

LBA4404根瘤农杆菌菌株的染色体背景为Ach5,核基因中含有利福平抗性基因RIF,可作为该菌株的筛选标记。为了便于转化操作,此菌株携带无自身转运功能的章鱼碱(Octopine)型Ti质粒pAL4404,此质粒含有VIR基因(VIR基因是T-DNA转移入植物基因组必需的元件,pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pAL4404型Ti 质粒含有筛选标签Strep,使LBA4404根瘤农杆菌株具有链霉素抗性。

LBA4404根瘤农杆菌菌株基因型:Ach5 (rifR) Ti pAL4404 (strepR) Octopine。

本菌株可以使用常规的LB培养基或YEB培养基进行培养。

关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择,可参考我们的相关网页:http://www.beyotime.com/support/strain.htm

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D0393 LBA4404根瘤农杆菌甘油菌 200μl
说明书 1份
保存条件:

-80℃保存,至少2年有效。须注意避免反复冻融。

注意事项:

使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下,菌体会逐渐沉淀至管底,请务必注意适当混匀后使用。

为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.划平板接种:
取出甘油菌置于冰上,并置于超净台内,后续操作都在超净台内操作。
a.用镊子和塑料枪头操作:镊子的顶端在70%酒精中蘸一下,并且在酒精灯上略略烧一下,使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的200µl塑料枪头,蘸取少量甘油菌,然后把蘸有菌液的塑料枪头,以尽量和LB平板接近平行的角度,在含34μg/ml利福平和50μg/ml链霉素的LB或YEB平板上连续作S形或Z形划动,再用一无菌的200µl塑料枪头,在原先的划线上以90º或120º角,再在LB或YEB平板上连续作S形或Z形划动。通常换枪头重复操作2-3次即可。28-30℃,倒置培养2-3天。
b.用接种环操作:将接种环在酒精灯上略略烧一下,使接种环处于无菌状态。微冷后,蘸取少量甘油菌,在含34μg/ml利福平和50μg/ml链霉素的LB或YEB平板上连续作S形或Z形划动。把接种环再烧一下,微冷后,在原先的划线上以90º或120º角,再在LB或YEB平板上连续作S形或Z形划动。通常用接种环重复操作2-3次即可。28-30℃,倒置培养2-3天。
2.直接培养
取出甘油菌置于冰上,并置于超净台内,后续操作都在超净台内操作。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下,并且在酒精灯上略略烧一下,使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签,蘸取甘油菌,然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到装有3毫升LB(含34μg/ml利福平和50μg/ml链霉素)的细菌培养试管内或装有100毫升或更大体积LB(含34μg/ml 利福平和50μg/ml 链霉素)的细菌培养瓶内。28-30℃,200rpm培养至少24h。
3.感受态细菌的制备
可以使用碧云天的农杆菌感受态制备试剂盒(D0303)进行感受态细胞的制备。
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产品编号 产品名称 包装
D0301 一步法感受态细菌制备试剂盒 200次
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