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哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
产品编号: D0061
产品包装: 50次
产品价格: 167.00元
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D0061 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒 50次 167.00元

      碧云天生产的哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒(Mammalian genomic DNA extraction kit),采用了经典的蛋白酶K处理法,可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。
      用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
      通常使用本试剂盒,从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA,从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。
      本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D0061-1 样品裂解液 30ml
D0061-2 蛋白酶K 130μl
D0061-3 10M 醋酸铵 6ml
D0061-4 Nuclease Free Water 6ml
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存,一年有效。10M醋酸铵和Nuclease Free Water也可以室温保存。
注意事项:
      需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。
      如果打算抽提到大片段的基因组DNA,则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品,可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
      不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 样品收集
a. 对于组织样品:
切下组织,并剪切成小块,置液氮中冻结,研碎或捣碎。
b. 对于贴壁细胞:
胰酶消化后,PBS或生理盐水洗一次,1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。
c. 对于悬浮细胞:
1000-2000g离心1-2分钟,弃上清,收集细胞。
2. 基因组DNA抽提
a. 样品处理完毕后,每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K,混匀。
b. 对于上述处理好的样品,每20毫克组织或106-107个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液,颠倒混匀数次,充分裂解组织或细胞。
c. 50℃水浴消化过夜。
d. 加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。
e. 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提一次。
f. 吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体),剩余的水相用等体积氯仿再抽提一次。
g. 吸出约300微升上清液,加入60微升10M醋酸铵和600微升无水乙醇,颠倒数次混匀,此时可见DNA沉淀产生。
h. 10,000g 离心1分钟,弃上清。加入70%乙醇洗涤DNA沉淀两次。
i. 尽量吸除残余的乙醇,待看不到明显的液体时,立即加入50-100微升Nuclease Free Water溶解DNA。注意:不可过分干燥基因组DNA沉淀,否则会极难溶解。如果发现DNA沉淀难以溶解,可以在4℃用摇床缓慢摇动过夜,以溶解DNA沉淀。
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使用本产品的文献:
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