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细胞相关> 细胞组织培养> 培养液相关
产品编号: C5527-10ml
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
C5527-10ml BeyoOrganoid™ N-2无血清添加剂(100X) 10ml 899.00元

碧云天的BeyoOrganoid™ N-2无血清添加剂(100X),也称N-2 Supplement (100X)、N2添加剂(100X),是一种基于Bottenstein经典N-1配方优化的化学成分确定(Chemically defined)的细胞培养添加剂,具有促进细胞生长和存活的作用,常用于神经元、神经干细胞、神经瘤细胞等类器官和原代细胞的培养,以及多能干细胞的培养和定向分化[1-4]。本产品为碧云天BeyoOrganoid™类器官培养液系列产品的配套试剂。碧云天同时提供常规的N-2 Supplement (100X) (C0335)。

类器官(Organoid)通常指在体外显示出与体内器官或组织相似结构和功能的复杂三维(Three-dimensional, 3D)结构[1],更严格的定义是指由干细胞或器官祖细胞发育而来的,作为体外平台模拟其对应器官的结构和功能等多个方面的3D细胞培养物[2]。类器官在形成过程中,细胞自我组建(Self-organize)并分化为功能型的微小细胞团,模拟真实器官发育,以与体内相似的方式由细胞分序(Cell sorting out)与空间特异性的谱系分化(Spatially restricted lineage commitment)调控,需激活由细胞内在成分和外在环境(细胞外基质、培养液等)介导的各种信号通路[3]。

本产品为淡棕色澄清液体,组分基于经典的Bottenstein's N-1 formulation优化而来,含有饱和转铁蛋白(Human holo transferrin)、重组胰岛素(Insulin recombinant full chain)、孕酮(Progesterone)、腐胺(Putrescine)、亚硒酸钠(Selenite)等。本产品不含血清,可有效避免外源成分干扰,确保了实验的可重复性。

胰岛素(Insulin)在哺乳动物细胞的合成代谢方面起重要作用,可以促进细胞对葡萄糖和氨基酸的吸收、脂肪的生成、一价阳离子和磷酸盐的转运、蛋白和核酸的合成,并促进细胞增殖;转铁蛋白(Transferrin)是铁离子的重要载体,可以减少自由铁离子、氧自由基和过氧化氢的毒性;亚硒酸钠中的硒(Selenium),是谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase)及其它一些重要酶的辅助因子,同时在培养基中起抗氧化的作用;孕酮对细胞有生长刺激作用;腐胺作为一种非蛋白质含氮碱,是多胺、亚精胺和精胺的前体,可能是细胞分裂过程中所必须的一类生长因子[4, 5]。

本产品为类器官培养级别,配制于超纯水中,经过0.22μm过滤除菌,可以直接用于类器官、细胞培养等用途。使用前不必再进行过滤等除菌处理,可有效支持源自外周神经系统和中枢神经系统的原代神经母细胞瘤及有丝分裂后神经元的生长和表达,并促进外周(Peripheral nervous system, PNS)及中枢神经系统(Central nervous system, CNS)来源的有丝分裂后神经元的成熟。

本产品无支原体,多种传染病指标如HIV 1&2、Hepatitis B、HCV等均为阴性。

每10ml本产品,可以用于配制成1000ml含BeyoOrganoid™ N-2无血清添加剂(1X)的培养液。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
C5527-10ml BeyoOrganoid™ N-2无血清添加剂(100X) 10ml
说明书 1份
保存条件:

-20ºC避光保存,两年有效。4ºC避光保存,1-2周内有效。须避免反复冻融。

注意事项:

本产品经过严格除菌过滤,为无菌产品,必须在超净台或生物安全柜内使用,以避免微生物污染。

本产品须尽量避免光照。本产品充分融解并混匀后,如有必要,可以适当分装后-20ºC避光保存。短期内如果频繁使用,可以4ºC避光保存,并建议在1-2周内用完。

本产品长时间存放可能会出现少量沉淀,可上下颠倒混匀,完全溶解后即可正常使用。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.将本产品按1:100的比例加入到基础培养液(如Neurobasal或DMEM/F12等)中,同时根据需要考虑加入L-Ala-Gln (100X) (C0211)、L-Glutamine (100X) (C0212)、青霉素-链霉素溶液(100X) (C0222)等其它成分,即可用于神经元等的培养。不同细胞、不同接种密度所需浓度请参考相应的文献或根据细胞类型和培养液进行适当的调整。
2.如果用于培养小鼠胚胎神经元细胞,建议用Poly-D-lysine/多聚赖氨酸(ST508)进行包被。为达到最佳包被效果,建议使用新鲜配制的Poly-D-lysine,且包被浓度为0.1mg/ml,37ºC孵育2-3小时。已经包被好的培养皿可用Parafilm封闭后置于4ºC保存,建议在1-3天内使用。
常见问题:
1.本产品含有抗生素吗?
本产品不含任何抗生素成分。用户可根据实验需要,在配制培养基时添加适当的抗生素进行细胞培养。
2.培养神经相关细胞,如何选择添加剂?
在细胞接种密度较低时,推荐使用本产品和B-27联合作为添加剂培养神经干细胞、海马或其它中枢神经系统神经元[4];而细胞接种密度较高时的神经元或胶质瘤干细胞,推荐使用本产品作为添加剂。具体请参考相相关文献。
参考文献:
1.Rossi G, Manfrin A, Lutolf MP. Nat Rev Genet. 2018. 19(11):671-687.
2.Gu Y, Zhang W, Wu X, Zhang Y, Xu K, et al. Clin Transl Med. 2023. 13(12):e1499.
3.Corrò C, Novellasdemunt L, Li VSW. Am J Physiol Cell Physiol. 2020. 319(1):C151-C165.
4.Bottenstein JE, Sato GH. Proc Natl Acad Sci U S A. 1979. 76(1):514-7.
5.Pohjanpelto P. J Cell Biol. 1976. 68(3):512-20.
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