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细胞相关> 细胞组织染色> 荧光染色
Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针,活细胞用)
产品编号: C1049-50µg
产品包装:50µg
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价格:¥296.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
C1049-50µg Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针,活细胞用) 50µg 296.00元
C1049-250µg Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针,活细胞用) 50µg×5 868.00元

Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针,活细胞用),也称MitoTracker Red CMXRos for Live Cell,是一种具有细胞通透性的X-rosamine衍生物(Chloromethyl-X-rosamine,简称CMXRos),能够特异性地标记细胞中具有生物活性的线粒体,检测线粒体膜电位。由于纯度等原因,本探针只适合活细胞染色,不兼容后续的细胞固定和通透,染色后再固定和通透,荧光强度会明显下降,甚至消失。
本产品是一种氧化型的红色荧光染料,只需简单地和细胞孵育,即可通过被动运输穿过细胞膜,并借助本探针含有的弱巯基反应性的氯甲基(mildly thiol-reactive chloromethyl)官能团特异性地标记有生物活性的线粒体。
Mito-Tracker Red CMXRos分子式为C32H32Cl2N2O,分子量为531.5,CAS number为167095-09-2,Mito-Tracker Red CMXRos呈红色荧光,最大激发波长为579nm,最大发射波长为599nm。Mito-Tracker Red CMXRos的激发光谱和发射光谱以及结构式参考图1。

图1. Mito-Tracker Red CMXRos的激发光谱和发射光谱(A)以及结构式(B)。

Mito-Tracker Red CMXRos可以用作线粒体特异性的荧光探针。和Rhodamine 123或JC-1相似,Mito-Tracker Red CMXRos对于线粒体的染色依赖于线粒体膜电位,因此该探针只能对活的细胞或组织进行染色,不能对固定或通透后的细胞或组织进行染色。使用Mito-Tracker Red CMXRos染色活细胞线粒体效果参考图2。

图2. Mito-Tracker Red CMXRos (活细胞用)染色肾小管上皮细胞线粒体的效果。左侧图为明场下肾小管上皮细胞形态图;蓝色荧光为Hoechst 33342染色(C1027/C1028/C1029 Hoechst 33342活细胞染色液(100X))的细胞核,红色荧光为Mito-Tracker Red CMXRos染色的线粒体,右侧为Hoechst 33342和Mito-Tracker Red CMXRos双染的肾小管上皮细胞的细胞核与线粒体。实测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
由于Mito-Tracker Red CMXRos在线粒体内的聚集依赖于线粒体的膜电位,因此本产品也可以作为线粒体膜电位的指示探针,通过检测线粒体膜电位的变化来检测细胞凋亡。
按最终工作浓度为50-200nM计算,本产品小包装C1049-50µg可以配制约500-2000ml Mito-Tracker Red CMXRos工作液;中包装C1049-250µg可以配制的体积为小包装C1049-50µg的5倍。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
C1049-50µg Mito-Tracker Red CMXRos (活细胞用) 50µg
C1049-250µg Mito-Tracker Red CMXRos (活细胞用) 50µg×5
说明书 1份

保存条件:
-20℃避光保存,一年有效。
注意事项:
Mito-Tracker Red CMXRos (活细胞用)可以用于活细胞的线粒体荧光染色,不适合用于固定后细胞或者组织的染色,也不兼容活细胞的线粒体荧光染色后的细胞固定和通透,染色后再固定和通透,荧光强度会明显下降,甚至消失。
本产品仅包含非常微量的粉末,使用前请先离心数秒钟,使微量粉末充分沉降到管底。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
使用本产品可以在常见的多孔板或培养皿中进行荧光染色,也可以在盖玻片或载玻片上进行荧光染色。
本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.Mito-Tracker Red CMXRos储存液的配制:
取一管50μg Mito-Tracker Red CMXRos粉末加入470μl的无水DMSO (anhydrous dimethylsulfoxide),充分溶解后,得到浓度为200μM的Mito-Tracker Red CMXRos储存液。也可以根据需要配制成其它浓度的储存液,如1mM。适当分装后避光保存于-20℃或更低温度。
2.Mito-Tracker Red CMXRos工作液的配制:
a.取少量200μM Mito-Tracker Red CMXRos储存液按照1:1000-1:10,000的比例加入到细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中,使最终浓度为20nM-200nM。例如取1µl 200μM的Mito-Tracker Red CMXRos储存液加入到1ml细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中,混匀后即为200nM的Mito-Tracker Red CMXRos工作液。如果染色的细胞后续需要进行固定或通透等步骤,建议工作浓度为50nM-200nM。Hanks' Balanced Salt Solution (with Ca2+ & Mg2+) (C0219)可以向碧云天订购。
b.Mito-Tracker Red CMXRos工作液使用前需37℃预温育。
注:Mito-Tracker Red CMXRos工作液的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低非特异性荧光染色和线粒体毒性,在染色效果可以接受的范围内,建议尽量使用较低浓度的Mito-Tracker Red CMXRos。
3.贴壁细胞的线粒体染色:
a.当细胞在细胞培养板或培养皿中培养至一定密度时,去除细胞培养液,加入步骤2中配制好的Mito-Tracker Red CMXRos工作液,37℃孵育15-30分钟。注:最佳孵育时间需根据细胞类型进行适当的优化。
b.去除Mito-Tracker Red CMXRos工作液,加入37℃预温育的新鲜细胞培养液。
c.用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜或荧光酶标仪进行观察或检测。此时可观察到线粒体呈明亮的强荧光染色。如果染色效果欠佳,可以提高Mito-Tracker Red CMXRos工作液浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。
注:标记的Mito-Tracker Red CMXRos易淬灭,请注意尽快进行拍照等荧光检测。也可以通过降低荧光显微镜的激发光强度(即汞灯或LED光源)或适当降低Mito-Tracker Red CMXRos工作液浓度以延缓淬灭。
4.悬浮细胞的线粒体染色:
a.1000×g离心5分钟,弃上清,用37℃预热的Mito-Tracker Red CMXRos工作液轻轻重悬细胞,37℃孵育15-30分钟。注:最佳孵育时间需根据细胞类型进行适当的优化。
b.孵育结束后,1000g离心5分钟,弃上清,加入37℃预温育的新鲜细胞培养液重悬细胞。
c.用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行观察、分析或检测。
注:如果需要在载玻片或盖玻片上固定悬浮细胞,可先用碧云天的Poly-D-lysine/多聚赖氨酸(ST508)处理载玻片或盖玻片。

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使用本产品的文献:
4. Zhang Y,Sun C,Xiao G,Gu Y
Biochem Biophys Res Commun. 2019 Apr 30;512(2):269-275.
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