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细胞相关> 细胞组织培养> 原代细胞培养
产品编号: C0314-100mg
产品包装:100mg
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价格: ¥ 1274.40
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
C0314-20mg I型胶原蛋白(来源于大鼠鼠尾) 20mg 405.00元
C0314-100mg I型胶原蛋白(来源于大鼠鼠尾) 100mg 1080.00元

碧云天的I型胶原蛋白(来源于大鼠鼠尾),即Collagen I from Rat Tail,也称Type I Collagen、Collagen, Type I,主要用于制备透明凝胶,提供三维的基质环境,或直接涂覆在组织培养板上,作为培养原代细胞(如角质形成细胞和肝细胞)的基质。

胶原蛋白是动物结缔组织细胞外基质的主要成分。迄今为止,在脊椎动物和高等无脊椎动物中已鉴定出28种不同类型的胶原蛋白。在这些胶原蛋白类型中,I型在脊椎动物中最为丰富。它以不同的比例与其它分子结合,形成各种组织支架,如基膜、韧带、肌腱、皮肤和血管,并赋予它们承重机械性能[1]。

本产品可用于肿瘤细胞侵袭和迁移,单核细胞、巨噬细胞的培养或分化研究,粒细胞和巨噬细胞的放射自显影研究,还可维持肝细胞功能、分化状态,促进肝细胞基因转录水平的升高等。

本产品具体参数请参考下表。

Physical Appearance Colorless transparent solution
Source Rat tail
Purity >90% by SDS-PAGE
Formulation 2.5-5.0mg/ml Collagen I from Rat Tail in 20mM Acetic acid
Mycoplasma Test Negative
Sterile 0.22μm sterile filtration
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
C0314-20mg I型胶原蛋白(来源于大鼠鼠尾) 20mg
C0314-100mg I型胶原蛋白(来源于大鼠鼠尾) 100mg
说明书 1份
保存条件:

4ºC保存,两年有效,不可冻存

注意事项:

本产品的使用应在冰上进行,室温下I型胶原蛋白可迅速成胶。

需注意无菌操作,避免污染。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.薄层包被(Thin Coating)。
注:不同的细胞培养应用时可能需要对包被的胶原蛋白浓度进行特定的优化,建议包被的起始浓度为5μg/cm2。
a.根据实验确定所需I型胶原蛋白的体积。
b.使用20mM乙酸溶液将I型胶原蛋白稀释至50μg/ml。
c.将50μg/ml I型胶原蛋白加入培养皿或培养板中,以5μg/cm2的浓度涂覆。例如,35mm培养皿培养面积约为9cm2,涂覆时需约45μg I型胶原蛋白,即0.9ml的50μg/ml I型胶原蛋白。其它规格孔板的使用量可参考下表。
Specifications 12-well Plate 6-well Plate 35mm Dish 60mm Dish 100mm Dish 150mm Dish
Recommended Cat No. FCP126 FCP060 FCD035 FCD060 FCD100 FCD150
Surface Area (cm2) 3.4 per well 9.6 per well 9 26 56 150
Volume of 50μg/ml Collagen I (ml) 0.34 per well 0.96 per well 0.9 2.6 5.6 15
d.室温孵育1小时。
e.小心将溶液吸出培养皿或培养板。
f.用等量的PBS (C0221A)或培养液洗涤培养皿或培养板3次,以去除残留的乙酸溶液。
g.可立即使用或晾干后存放于4ºC备用。
2.凝胶程序(Gelling)。
注:具体的最佳工作浓度请自行参考相关文献,或者根据实验目的以及特定细胞和动物,通过预实验进行摸索和优化。
a.准备10X PBS (ST448/ST476)、BeyoPure™ Ultrapure Water (Sterile) (ST872/ST878)和1M NaOH (Sterile)。将上述试剂置于冰上或4ºC预冷。
b.确定实验所需I型胶原蛋白浓度和最终体积,确定所需其它试剂体积,以使I型胶原蛋白在1X PBS溶液中的终浓度达到所需浓度,同时保持正常渗透压和中性pH值。计算方法请参考下表。
Parameters Abbreviation Formula Example
Total Volume of Gel VTotal - 5ml
Initial Concentration of Collagen I C1 - 3mg/ml
Final Concentration of Collagen I C2 - 2mg/ml
Volume of Collagen I VCollagen I C2×VTotal/C1 5ml×2mg/ml/3mg/ml=3.3ml
Volume of 10X PBS V10X PBS VTotal/10 5ml/10=0.5ml
Volume of 1M NaOH V1M NaOH VCollagen I×0.025 3.3ml×0.025=0.083ml
Volume of Ultrapure Water VUltrapure Water VUltrapure Water=VTotal-VCollagen I-V10X PBS-V1M NaOH 5ml-3.3ml-0.5ml-0.083ml=1.12ml
c.按照计算所得的各溶液体积按Ultrapure Water、1M NaOH和10X PBS的顺序依次加入无菌离心管中。最后缓慢地将I型胶原蛋白加入管中,并轻轻上下吹吸以充分混匀。
注:最终混合物的pH值应在6.5-7.5之间(最佳pH为7.0)。
d.立即将配制好的凝胶分装到所需的培养皿或培养板中。
e.在37ºC培养箱中孵育30-40分钟以形成凝胶,并将其存放在冰上,避免凝胶迅速凝结。
f.使用前用适量PBS或培养液洗涤凝胶。
参考文献:
1.Varma S, Orgel JP, Schieber JD. Biophys J. 2016. 111(1):50-6.
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