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 Enhanced Cell Counting Kit-8 (增强型CCK-8试剂盒)

  产品编号C0043
  产品包装: 2500次
  产品价格: 1576.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
C0043 Enhanced Cell Counting Kit-8 (增强型CCK-8试剂盒) 2500次 1576.00元

      Enhanced Cell Counting Kit-8,简称增强型CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、灵敏度检测的试剂盒,比普通的CCK-8试剂盒具有更好的检测灵敏度和更宽的线性范围。
      WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的
formazan(参考图1)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。


图1. WST-8检测原理图 (EC=electron coupling reagent,即电子耦合试剂)

      WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽,灵敏度更高。
      WST-8和WST-1相比,检测灵敏度更高,更易溶解,并且更加稳定。
      本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
      本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的增强型CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。
      酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
      WST-8对细胞无明显毒性。加入增强型CCK-8溶液显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到最佳测定时间。
      碧云天各种细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择,请参考http://www.beyotime.com/cell-proliferation.htm
      本试剂盒可以测定2500个样品。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
C0043 增强型CCK-8溶液 25ml
说明书 1份

保存条件:
      4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存两年有效。
注意事项:
      由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发问题。一方面,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加相同量的PBS、水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
      本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测,如果待检测体系中存在较多的还原剂,需设法去除。
      用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定)。按照实验需要,进行培养并给予0-10微升特定的药物刺激。
2. 每孔加入10微升增强型CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200微升,则需加入20微升增强型CCK-8溶液,其它情况以此类推。可以用加了相应量细胞培养液和增强型CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测,需设置加了相应量细胞培养液、药物和增强型CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。
3. 在细胞培养箱内继续孵育0.5-4小时,对于大多数情况孵育1小时就可以了。时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,初次实验时可 以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。
4. 在450nm测定吸光度。如无450nm滤光片,可以使用420-480nm的滤光片。可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。
5. 将不同数量的HeLa细胞按照每孔100微升培养液接种到96孔板中,培养至细胞贴壁充分后,每孔加入10微升的增强型CCK-8溶液孵育2小时后测定A450的检测效果图参考图2。检测效果仅供参考,实测数据会因检测仪器等的不同而存在差异。


图2. 增强型CCK-8试剂盒测定不同数量HeLa细胞的检测效果图。实测数据会因检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

常见问题:
1. 增强型CCK-8溶液对细胞的毒性大小如何?
增强型CCK-8溶液对细胞的毒性非常低,和普通的CCK-8溶液相当或者毒性更低,通常观察不到细胞毒性。细胞在CCK-8法检测后仍然可以正常生长,并以用于 其它的细胞实验。但为了避免增强型CCK-8溶液可能带来的对于后续检测的影响,除非该细胞极难获得,否则不推荐把增强型CCK-8溶液孵育过的细胞用于其它 实验。
2. 如果吸光度值太低,可以采取什么办法?
a. 适当增加细胞数量。
b. 延长加入增强型CCK-8溶液后的孵育时间。
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使用本产品的文献:
1.Lei Li, Beibei Lu, Qikui Fan, Lulu Wei, Jianning Wu,Jun Hou, Xuhong Guo and Zhiyong Liu. 
Synthesis and pH-responsive self-assembly behavior of a fluorescent amphiphilic triblock copolymer mPEG-b-PCL-b-PDMAEMA-g-PC for the controlled intracellular delivery of doxorubicin . 
RSC Adv.2016 Mar;32:27102-27112.
2.Pourjavadi A, Tehrani ZM, Moghanaki AA.
Folate-Conjugated pH-Responsive Nanocarrier Designed for Active Tumor Targeting and Controlled Release of Gemcitabine.
Pharm Res. 2016 Feb;33(2):417-32.
3.Dang L, Teng M, Li HZ, Ma SM, Lu QX, Hao HF, Zhao D, Zhou EM, Zhang GP, Luo J.
Marek's disease virus type 1 encoded analog of miR-155 promotes proliferation of chickenembryo fibroblast and DF-1 cells by targeting hnRNPAB.
Vet Microbiol. 2017 Aug;207:210-218.
4.Chen K, Wang JL, Huang SY, Yang WB, Zhu WN, Zhu XQ.
Immune responses and protection after DNA vaccination against Toxoplasma gondii calcium-dependent protein kinase 2 (TgCDPK2).
Parasite. 2017;24:41.
5.Li H, Al-Japairai K, Tao Y, Xiang Z.
RPN2 promotes colorectal cancer cell proliferation through modulating the glycosylation status of EGFR.
Oncotarget. 2017 Aug 7;8(42):72633-72651.
6.Zhu WN, Wang JL, Chen K, Yue DM, Zhang XX, Huang SY, Zhu XQ.
Evaluation of protective immunity induced by DNA vaccination with genes encoding Toxoplasmagondii GRA17 and GRA23 against acute toxoplasmosis in mice.
Exp Parasitol. 2017 Aug;179:20-27.
7.Wang XY, Yang H, Wang MG, Yang DB, Wang ZY, Wang L.
Trehalose protects against cadmium-induced cytotoxicity in primary rat proximal tubular cellsvia inhibiting apoptosis and restoring autophagic flux.
Cell Death Dis. 2017 Oct 12;8(10):e3099.
8.Zhao M, Wan B, Li H, He J, Chen X, Wang L, Wang Y, Xie S, Qiao S, Zhang G.
Porcine 2', 5'-oligoadenylate synthetase 2 inhibits porcine reproductive and respiratorysyndrome virus replication in vitro.
Microb Pathog. 2017 Oct;111:14-21.
9.Jia X, Xu Y, Wu W, Fan Y, Wang G, Zhang T, Su W.
Aroclor1254 disrupts the blood-testis barrier by promoting endocytosis and degradation of junction proteins via p38 MAPK pathway.
Cell Death Dis. 2017 May 25;8(5):e2823.