问：您好，我的质粒是10kb的，实验时根据说明书dNTP应该用10ul， 但是产品清单dNTP只有50ul，也就是最多只能用5次，买的10次的试剂盒只能用5次，应该怎么解决？
小云
2023-02-08 10:24:08
碧云爱答说：
2023-02-08 10:39:02
如果超出试剂盒提供的用量，需要自备一些dNTP
问：你好，我想请问，DPN1处理后的质粒，可不可以直接转入表达感受态，如bl21 de3？
小云
2022-09-30 16:50:10
碧云爱答说：
2022-10-08 13:43:39
DpnI消化完毕后可以直接用于转化的。
问：请问该试剂盒为什么没有环化步骤？
小云
2021-11-11 09:54:09
碧云爱答说：
2021-11-11 14:02:07
把DpnI处理过的产物转化感受态细菌后，突变质粒中的两个nick位点可以被大肠杆菌修复，得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。
问：您好！关于本产品的一些原理问题想向贵公司咨询一下。在反向PCR后，不对产物进行磷酸化和连接酶处理，直接转化感受态细胞，是利用细胞自身的修复机制进行质粒环化吗？这样的话效率是不是会很低？还是说贵公司试剂盒DNA酶兼有磷酸化和连接功能呢？
小云
2020-08-25 22:44:22
碧云爱答说：
2020-08-27 16:59:39
含有预期突变位点的双链质粒中有两个nick位点。待突变的质粒通常来源于DH5α等dam+大肠杆菌，在这些dam+细菌中质粒会被甲基化修饰。