在新药开发、药理机制的研究以及新的药物靶点的发现过程中，明确药物的靶点是基础而关键的一步。
目前，药物靶标鉴定方法主要分为两类。第一类方法基于药物与其靶标之间的亲和力，通过检测药物与其靶标的直接结合来识别相互作用；第二类方法基于表型，通过观察药物引发的生理或生化特征，间接推断药物靶点和作用通路。DARTS技术属于基于亲和力的一种实验方法，具有简便、原位、无需标记药物等优势，广泛应用于小分子药物的靶标研究。
基于DARTS技术，碧云天推出了药物亲和反应靶蛋白稳定性检测试剂盒(DARTS Assay Kit)，本产品通过检测药物结合引起的靶蛋白稳定性变化，简便评候选药物与靶蛋白的结合能力。
本试剂盒一方面可以借助Western、ELISA、酶活性检测等用于筛选能提高已知靶蛋白稳定性的候选药物，另一方面也能通过LC-MS/MS筛选特定药物能提高其稳定性的靶蛋白。
产品原理
某些小分子药物可与特定的靶标蛋白结合，从而改变靶蛋白对蛋白酶的敏感性，进而影响其稳定性。通常情况下，这种结合可降低靶蛋白被蛋白酶识别和降解的可能性，从而提升蛋白的稳定性。
在DARTS实验体系中，合适浓度的蛋白酶是实验成败的关键因素之一，本试剂盒提供的蛋白酶在中性pH条件下有良好的活性，确保DARTS体系中蛋白酶消化过程的高效性和准确性。
具体流程为：将小分子药物与蛋白样品共孵育一定时间后，加入蛋白酶进行消化，若药物成功结合靶蛋白，通常会使该蛋白对蛋白酶的敏感性下降，从而在消化后仍能检测到相对较多的靶蛋白。研究人员可通过SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色、Western检测可以鉴定靶标蛋白的含量，也可以通过蛋白二维电泳(2D-PAGE)、LC-MS和亲和色谱等技术鉴定未知的药物靶标蛋白。工作原理如图1，检测流程如图2。
图1. 碧云天药物亲和反应靶蛋白稳定性检测试剂盒(DARTS Assay Kit)(S3206)的工作原理图。
图2.碧云天药物亲和反应靶蛋白稳定性检测试剂盒(DARTS Assay Kit) (S3206)检测流程图。
产品特点
- 药物无须标记即可检测，可重复性佳：无需对药物进行任何化学修饰或标记，避免了化学修饰可能导致的药物活性丧失或靶标特异性变化，同时检测结果能更真实地反映药物在生理条件下的作用效果，确保实验结果的可靠性和可重复性；
- 使用简单，操作便捷：不依赖于复杂设备和高成本试剂，本试剂盒无需任何标记与修饰，无需洗涤，大大简化了实验操作步骤，节省了时间和成本，提供了一个经过验证的完整方案；
- 检测灵敏度高：可高灵敏地识别低丰度和低亲和力的小分子药物靶标，即使在复杂蛋白质背景下，本试剂盒仍能准确检测到靶标蛋白的存在，有效帮助研究人员发现和确认潜在药物靶标，推进药物研发进程；
- 适用范围广：适用于多种细胞类型，包括哺乳动物细胞、组织提取物和其它复杂的蛋白质样本，展现出极高的实验适用性；
- 兼容性好：使用本试剂盒制备的蛋白样品兼容后续的多种分析方法，可以用于SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色、Western检测、酶活性检测，也适用于蛋白二维电泳(2D-PAGE)、LC-MS等。
产品效果
图3.碧云天药物亲和反应靶蛋白稳定性检测试剂盒(DARTS Assay Kit)(S3206)用于检测野黄芩苷(Scutellarin,SG)对于PDK2蛋白稳定性的效果图。
图4.碧云天药物亲和反应靶蛋白稳定性检测试剂盒(DARTS Assay Kit) (S3206)用于不同Protease与总蛋白比例筛选的检测效果图。
产品信息
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
| S3206S | 药物亲和反应靶蛋白稳定性检测试剂盒(DARTS Assay Kit) | 100次 | |
| S3206M | 药物亲和反应靶蛋白稳定性检测试剂盒(DARTS Assay Kit) | 500次 |
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