条件性基因敲除工具Cre-重组酶质粒上新!
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条件性基因敲除(CKO,Conditional Knockout),是将某个基因的修饰限制于小鼠某些特定类型的细胞或发育的某一特定阶段,实现对小鼠基因组的时空特异性修饰,对靶基因在特定组织或细胞中的功能研究,靶基因在特定时期或阶段发挥的作用研究以及胚胎致死性基因的研究中具有重要的应用,该技术克服了重要基因完全敲除后的胚胎致死或过早死亡的缺陷,能够客观而系统地研究目的基因在不同组织器官发生、发育或疾病发生、治疗过程中的作用与机制。
其基本原理是重组酶系统介导的位点特异性重组技术。Cre-loxP系统是目前最常用的重组酶系统之一,Cre重组酶是来源于大肠杆菌噬菌体P1的一种类型I的拓朴异构酶,也是一种酪氨酸重组酶,,它可识别34bp的loxP位点(两端为两个13bp的反向重复序列(inverted repeats),中间是8bp的间隔区(图1)并催化loxP位点之间的DNA发生重组。

图1.loxP位点序列图。

重组产物根据loxP位点的位置和相对方向的不同而不同,两个含单loxP位点的DNA将发生融合:两个正向重复的loxP位点间的DNA将以环状形式被切割,而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。

图2:Cre-loxP位点特异性重组示意图

本次为大家带来的新品即是条件性基因敲除
质粒——pCMV-Cre-mCherry和pCMV-Cre-EGFP!


pCMV-Cre-mCherry

pCMV-Cre-EGFP

pCMV-Cre-mCherry和pCMV-Cre-EGFP是碧云天自行研发的含有CMV启动子的用于在哺乳动物细胞中表达带有mCherry或EGFP标签的Cre重组酶的表达质粒。来自条件性基因敲除小鼠等含有预先插入loxP位点的细胞在转染该质粒后,质粒表达的Cre重组酶可以导致两个loxP位点间的基因删除,从而实现条件性基因敲除。

产品效果:

图2:pCMV-Cre-mCherry质粒转染HeLa细胞后的表达效果图。左图为明场照片,中图为荧光照片,右图为叠加照片。

图3:pCMV-Cre-EGFP质粒转染HeLa细胞后的表达效果图。左图为明场照片,中图为荧光照片,右图为叠加照片。

产品信息:

产品编号 产品名称 包装 产品价格
D2607-1μg pCMV-Cre-mCherry 1µg
D2607-100μg pCMV-Cre-mCherry 100µg
D2608-1μg pCMV-Cre-EGFP 1µg
D2608-100μg pCMV-Cre-EGFP 100µg