新品上架:去磷酸化工具酶专场—活性高,使用方便

近年来随着蛋白质组技术的不断发展,蛋白质磷酸化的研究受到越来越广泛的关注。
某个蛋白位点的磷酸化是否影响其活性?
是否引起蛋白结构的变化?
是否影响蛋白间的相互作用?
实验中的你是否需要解决上述问题?碧云天全新推出Lambda Protein Phosphatase,能够去除多种氨基酸残基的磷酸化,是研究蛋白磷酸化与其活性和结构的必备武器!同时还可以验证蛋白磷酸化位点抗体的特异性哦。
碧云天生产的Lambda Protein Phosphatase (重组λ蛋白磷酸酶),即λ Protein Phosphatase,是一种锰离子(Mn2+)依赖的重组表达纯化的磷酸蛋白酶,可以对磷酸化的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和组氨酸残基进行脱磷酸化反应。本产品是大肠杆菌重组表达的带6×His标签的重组λ磷酸酶。该磷酸酶由λ噬菌体开放阅读框ORF221所编码,编码产物共包含221个氨基酸残基。Lambda Protein Phosphatase可以用于蛋白的去磷酸化,从而可以用于研究蛋白磷酸化与其活性和结构的关系,以及验证蛋白磷酸化位点抗体的特异性等。

图1. Lambda Protein Phosphatase酶活测定实验图。左图:pNP标准曲线。右图:Lambda Protein Phosphatase按照30、40、50、80、100、200、500倍稀释后,在50µl反应体系中的酶量分别为0.27µg、0.20µg、0.16µg、0.10µg、0.08µg、0.04µg、0.016µg,并与100mM pNPP在1×Lambda Protein Phosphatase Buffer和1×MnCl2中在30℃反应5min后,加入12.5µl 3M NaOH终止反应,测定产生的pNP在405nm吸光度,并根据pNP标准曲线,计算Lambda Protein Phosphatase酶活性。不同批次检测出来的酶活性会略有差别。

订购信息
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P2316S Lambda Protein Phosphatase 20kU 256.00元
P2316M Lambda Protein Phosphatase 100kU 972.00元

说完蛋白磷酸化,咱们再来看看核酸磷酸化。
做克隆转化长了满板子,PCR鉴定都不对……
经常做克隆的小伙伴们太感同身受了有木有???
看着长了不少单菌落,PCR验证全是假阳性!!!
别担心,试试看碧云天全新推出的假阳性终结者—Antarctic Phosphatase (Thermosensitive),有效避免载体自连,大大提高基因克隆阳性率!
碧云天生产的Antarctic Phosphatase (Thermosensitive),是一种源自南极微生物的、热敏感的重组表达纯化的磷酸酶,可以催化去除DNA、RNA、dNTP、rNTP 5'或3'末端磷酸基团。DNA或RNA 5'端脱去磷酸基团(简称脱磷或去磷)后就不能被连接酶(ligase)所连接,常用于避免载体的自连、提高基因克隆时的阳性率、选择性连接特定序列等。

产品特点:

快速去磷酸化: 只需37℃孵育15分钟即可;
快速失活: 75℃孵育5分钟即可完全失活;
活性高,使用方便:在各种内切酶和PCR缓冲液中保持不低于100%的活性,可以和质粒DNA的酶切等同时进行;
兼容性强:对于5'或3'突出末端、平端等各种DNA的脱磷酸化采用完全相同的操作步骤;
适用于后续的连接反应:经Antarctic Phosphatase脱磷酸基团,并75℃孵育5分钟失活后,通过柱纯化或凝胶电泳后切胶回收纯化等适当处理后,即可用于后续的连接反应。

产品用途:

1.通过去除载体或DNA片段5'末端的磷酸基团,防止载体或DNA片段自连;
2.质粒DNA同时进行内切酶消化和脱磷;
3.通过5'末端脱磷,制备用于T4PNK进行5'末端标记的DNA或RNA;
4.去除DNA、RNA、rNTP和dNTP的5'末端的磷酸基团;
5.PCR产物中去除dNTP和焦磷酸根;
6.也可用于蛋白质丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的去磷酸化。

产品效果:

图2. 碧云天生产的Antarctic Phosphatase对BamHI单酶切后的pUC18载体进行脱磷处理可以大大降低载体自连。

图3. 碧云天生产的Antarctic Phosphatase对EcoRI/BamHI双酶切后的pUC18载体进行脱磷处理可以大大提高克隆的阳性率。

订购信息:
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7028S Antarctic Phosphatase (Thermosensitive) 1000U 208.00元
D7028M Antarctic Phosphatase (Thermosensitive) 5000U 828.00元