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细胞相关> 细胞组织染色> 普通染色
中性红染色液
产品编号: C0123
产品包装:100ml
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价格: ¥ 119.00
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C0123 中性红染色液 100ml 119.00元

碧云天生产的中性红染色液(Neutral Red Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液。本染色液呈酸性,适合用于固定的组织或细胞的染色,不适合用于组织或细胞的活体染色。如需用于活细胞染色,推荐选购碧云天的中性红染色液(活细胞染色用)(C0125)
本染色液常用于组织或细胞染色中细胞核的红色复染(counterstain)。
细胞对中性红的摄入取决于细胞对pH梯度的维持能力,而这种能力是通过产生ATP来维持的。在生理pH条件下,中性红染料的净电荷几乎为零,从而使其能通过非离子被动扩散的方式穿透细胞膜进入细胞。溶酶体(lysosomes)中的质子梯度使溶酶体中的pH值低于细胞质,从而可以使中性红带上电荷并在溶酶体中积累。在细胞增殖加快时,细胞数量增多,可以摄入的中性红的量就会增加。在细胞受到损伤时,中性红的摄入能力会下降。经过一定时间摄入后,细胞经清洗并用裂解液裂解即可释放中性红而用于检测。这样通过测定细胞对于中性红的摄入量,就可以确定细胞的增殖或毒性情况。
中性红同时也是一种pH指示剂,在酸性时呈红色,在pH6.8升至pH8.0时由红色逐渐转变为黄色。对于活细胞,中性红积累在溶酶体中,而溶酶体中是酸性环境,因此溶酶体被中性红染成红色。对于固定后的细胞,溶酶体中的酸性环境被破坏,此时溶酶体不会被染色,而细胞中呈酸性的DNA和RNA可以被中性红染色,通常细胞核中的大量基因组DNA等核酸被浓染而导致细胞核呈现较深的红色,而细胞浆中的DNA和RNA等酸性物质被染色成较浅的红色。本产品对经过固定处理的HeLa和L929细胞的染色效果参考图1。


图1. HeLa和L929细胞固定后,加入中性红染色液后的染色效果。左图HeLa细胞,右图L929细胞。

中性红的分子式为C15H17CIN4,分子量为288.8,CAS Number为553-24-2。
一个包装的本染色液如果用于切片或涂片的染色,至少可以染色500个样品。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
C0123 中性红染色液 100ml
说明书 1份

保存条件:
4℃避光保存,一年有效。-20℃避光保存可以存放更长时间。
注意事项:
需自备4%多聚甲醛。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备70%和90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。
样品数量较多时,可以使用碧云天生产的染色架染色缸,便于操作。
第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
中性红染色液长期存放会产生沉淀。可以直接吸取染色液的上清液使用,也可以使用针头滤器等过滤去除沉淀后继续使用,不会影响使用效果。因为染色液中的中性红本来就是过量的。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 样品处理
a) 对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡5-10分钟。
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。
无水乙醇5分钟。
90%乙醇2分钟。
70%乙醇2分钟。
蒸馏水2分钟。
b) 对于冰冻切片:
蒸馏水2分钟。
c) 对于培养细胞:
用4%多聚甲醛固定10分钟以上。
蒸馏水洗涤2分钟。
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
2. 中性红染色
对于上述处理好的样品:
中性红染色液染色2-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。
用蒸馏水或自来水充分洗涤后即可进行观察和拍照。
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