问:只带GST标签,没有His标签对吧? 小云 2023-07-19 17:28:58

碧云爱答说: 2023-07-21 13:14:48

是的。

问:请问切除后有残留的融合蛋白和gst标签怎么去除完全? 小云 2022-07-15 02:20:36

碧云爱答说: 2022-07-22 13:30:55

将酶切后的蛋白样品加入预先用PreScission Protease酶切缓冲液平衡好的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin,室温结合20-30分钟。500g离心5分钟,收集上清,其中含有切除了标签的目的蛋白,PreScission Protease则结合在凝胶沉淀中。如果目的蛋白是GST标签蛋白,那么残留的没有被酶切的GST标签蛋白、PreScission Protease和酶切下来的GST标签则结合在凝胶沉淀中,切除了标签的目的蛋白在溶液中。

问:使用说明第4步中用酶切缓冲液透析,要稀释成1×的吗 小云 2022-07-14 09:19:50

碧云爱答说: 2022-07-22 13:22:15

按此配方使用,PreScission Protease的酶切缓冲液的组分为50mM Tris-HCl,150mM NaCl,1mM EDTA,1mM DTT,pH7.5

问:请问这款酶的咪唑耐受度是多少?可以直接在咪唑浓度250mM的缓冲液中进行酶切么? 小云 2021-11-27 21:15:55

碧云爱答说: 2021-11-29 14:38:24

建议透析去除咪唑后再进行酶切。

问:这个酶可以切割thrombin的酶切位点吗? 小云 2019-06-27 16:30:34

碧云爱答说: 2019-06-27 16:40:08

不适用的。

问:请问这款酶耐受盐浓度最高是多少?可以直接将盐浓度500mM的产物进行酶切吗? 另外耐受β-ME吗?谢谢 小云 2018-12-03 20:09:54

碧云爱答说: 2018-12-04 11:11:47

PreScission Protease的酶切体系中可以兼容1% Triton X-100、Tween-20或NP-40,10mM EDTA和500mM NaCl。可以兼容1mM的DTT或者巯基乙醇。

问:请问利用3C酶切割时可以加PMSF等蛋白酶抑制剂吗 小云 2018-11-02 10:47:48

碧云爱答说: 2018-11-02 13:50:55

可以不需要加PMSF。