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 GC-rich PCR Buffer (4种套装)

  产品编号D7226
  产品包装: 共2ml
  产品价格: 116.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7226 GC-rich PCR Buffer (4种套装) 共2ml 116.00元

      GC-rich PCR Buffer (4管套装)提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer,为扩增高GC含量的DNA片段提供了多种不同的选择,大大提高了高GC含量DNA片段的扩增成功率。
      各种GC-rich PCR Buffer可以单独使用,也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。
      提供了推荐的几种经过优化的GC-rich PCR Buffer的组合方式,便于用户直接选用。
      根据相关文献报道,单一的GC-rich PCR Buffer对于某一个高GC含量的DNA片段的扩增效果很好,但对于另外一个高GC含量的DNA片段则很可能会扩增效果不太理想。正因为很难采用一种通用的GC-rich PCR Buffer 完成对于不同的高GC含量DNA片段的扩增,因此对于高GC含量DNA片段的扩增一直是分子生物学操作过程中的一个难点。针对这一实际情况,碧云天推出了可以给予用户多种条件进行优化组合的4管套装GC-rich PCR Buffer。
      本GC-rich PCR Buffer (4种套装)可以适用于各种常见的耐热DNA 聚合酶例如Taq DNA polymerase、Pfu DNA
polymerase等。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D7226-1 5X GC-rich PCR Buffer A 0.5ml
D7226-2 5X GC-rich PCR Buffer B 0.5ml
D7226-3 5X GC-rich PCR Buffer C 0.5ml
D7226-4 5X GC-rich PCR Buffer D 0.5ml
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      在使用本试剂盒提供的GC-rich PCR Buffer的同时,必须同时使用和DNA聚合酶配套的最终浓度为1X的含镁离子PCR Buffer。
      由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在操作时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
  1. 1.PCR反应参数的设置也可以参考特定的耐热DNA聚合酶的说明进行。通常对于扩增高GC含量DNA片段的情况,延伸时间可以比常规的延伸时间适当延长一些。
  2. 2.PCR反应体系的设置可以参考特定的耐热DNA聚合酶进行,仅仅添加适量本试剂盒所提供的GC-rich PCR buffer即可。可以参考如下反应体系设置PCR反应:
    试剂 最终浓度 体积 体积
    双蒸水或Milli-Q水 - (26.75-x)μl (10.7-y)μl
    10X PCR Buffer (with Mg2+) 1X 5μl 2μl
    5X GC-rich Buffer 1X 10μl 4μl
    dNTP (2.5mM each) 0.2mM each 4μl 1.6μl
    模板DNA 10pg-1μg* xμl yμl
    引物混合物(10μM each) 0.8μM 4μl 1.6μl
    Taq DNA Polymerase (5U/μl) 1.25U/50μl 0.25μl 0.1μl
    总体积 - 50μl 20μl
  3. 3.也可以尝试采用0.5X GC-rich Buffer:
    试剂 最终浓度 体积 体积
    双蒸水或Milli-Q水 - (31.75-x)μl (12.7-y)μl
    10X PCR Buffer (with Mg2+) 1X 5μl 2μl
    5X GC-rich Buffer 0.5X 5μl 2μl
    dNTP (2.5mM each) 0.2mM each 4μl 1.6μl
    模板DNA 10pg-1μg* xμl yμl
    引物混合物(10μM each) 0.8μM 4μl 1.6μl
    Taq DNA Polymerase (5U/μl) 1.25U/50μl 0.25μl 0.1μl
    总体积 - 50μl 20μl
  4. 4.还可以尝试在PCR反应体系中同时含有2-4种不同的1X GC-rich Buffer或0.5X GC-rich Buffer。以形成不同的组合用于优化PCR反应条件。优先推荐的GC-rich Buffer 及其组合(最终浓度)包括:
    a. 1X GC-rich Buffer A
    b. 1X GC-rich Buffer B
    c. 0.5X GC-rich Buffer B
    d. 1X GC-rich Buffer C
    e. 2X GC-rich Buffer C
    f. 1X GC-rich Buffer C + 1X GC-rich Buffer D
    g. 2X GC-rich Buffer C + 1X GC-rich Buffer D
    h. 1X GC-rich Buffer C + 0.2X GC-rich Buffer B
    i. 2X GC-rich Buffer C + 0.2X GC-rich Buffer B
  5. 5.可以根据初步的PCR扩增效果,再对效果较好的GC-rich Buffer再进行优化组合,进一步优化GC-rich Buffer的组合。最后根据PCR反应的扩增效果,选择最佳的GC-rich PCR buffer或其组合。
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