订货电话
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
周一到周五9:00-17:00
订货邮件
order@beyotime.com
订货QQ
4001683301
微信在线咨询
订单下载
碧云天订单.xls

试剂>

核酸相关>

DNA操作>

修饰酶

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μl, 进口分装)
产品编号: D7093
产品包装: 500U
产品价格: 418.00元
产品简介
使用说明
产品图片
相关产品
相关论文
产品问答
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7093 Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μl, 进口分装) 500U 418.00元

      Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,简称TdT,中文名称为末端脱氧核糖核酸转移酶,是一种非模板依赖的DNA聚合酶,可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3'羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。
      本产品为进口分装。
      用途:寡核苷酸或DNA 3'羟基末端标记;DNA末端加尾(DNA tailing);5'-RACE;合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
      来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为小牛胸腺。
      活性定义:37℃60分钟内,催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3'羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
      酶活性检测条件:200mM potassium cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM
oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
      纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNase。
      酶储存溶液:100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
      Reaction Buffer(5X):0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassium cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM
CoCl2
      失活或抑制:70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂,较高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D7093-1 TdT(20U/μl) 500U
D7093-2 Reaction Buffer(5X) 0.4ml
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项: 
      酶使用时宜放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明:
1. DNA 3'末端标记:
a. 参考如下表格设置反应体系:

待标记DNA 10 pmol of 3'-termini
Reaction Buffer(5X) 10μl
[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol(3000Ci/mmol) 1.85 MBq(50μCi)
TdT(20U/μl) 2μl
补充无核酸酶的去离子水 至50μl

b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5μl 0.5M EDTA终止反应。
说明:标记的效率和3'羟基末端的类型有关,3'突出末端的标记效率要显著高于3'缩进末端或平末端的标记效率。
2. DNA末端加尾(DNA Tailing):
a. 参考下表格设置反应体系:

DNA片断 1 pmol of 3'-termini
Reaction Buffer(5X) 4μl
dATP or dTTP 130pmol(20μCi)
或 dGTP or dCTP(四种中通常只需加入一种)
(3000 Ci/mmol)
60pmol
TdT(20U/μl) 1.5μl
补充无核酸酶的去离子水 至20μl

b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5μl 0.5M EDTA终止反应。
说明:在上述反应条件下,每个3'羟基末端可以加上100-130个dA或dT,或20-30个dC或dG。
3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。
相关产品:

产品编号 产品名称 包装
D7092S Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (5U/μl) 500U
D7092M Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (5U/μl) 2.5KU
D7093 Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μl, 进口分装) 500U
D7095S Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μl) 500U
D7095M Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μl) 2.5KU
D7095L Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μl) 10KU


相关产品请点击如下按钮: