碧云天在线咨询


温馨提示:客服在线时间为工作日9:00-17:00。
其他时间请发送邮件,我们会尽快给您回复。

产品订购与售后服务:order@beyotime.com
技术咨询:info@beyotime.com

中文 |English
试剂
质粒抽提 |DNA纯化胶回收
基因组DNA抽提 |DNA电泳
DNA分子量标准 |菌种与培养
感受态制备 |T载体、质粒 |基因突变
DNA连接 |DNA标记和检测 |内切酶
修饰酶 |反转录 |PCR相关 |RNA相关
其他
|重组蛋白 |生化酶 |蛋白定量
裂解及蛋白抽提 |蛋白纯化
抗体制备 |蛋白电泳
蛋白分子量标准 |一抗 |二抗
Western |免疫沉淀 |免疫染色 |ELISA
细胞凋亡坏死 |细胞增殖 |自噬
细胞培养 |细胞组织染色 |细胞转染
细胞组分分离
EMSA相关 |报告基因相关
一氧化氮相关 |活性氧相关
炎症相关 |代谢相关
抑制剂激活剂等 |荧光探针
其他试剂盒
常用试剂
仪器
脱色摇床 |细菌培养摇床
漩涡振荡器 |混匀仪 |搅拌器
超声破碎仪 |匀浆机
其它混合破碎仪器 |移液器类
培养箱 |水浴锅 |干燥箱、烘箱
干式恒温器 |其它温控设备 |制冰机
定时器 |离心机 |氮吹仪 |旋转蒸发仪
真空泵及其它泵 |蠕动泵 |灭菌设备
洗板机 |超声波清洗器 |紫外分析仪
酶标仪 |天平 |pH计 |电导仪
氧化还原电位仪 |溶氧仪
超净工作台 |生物安全柜
耗材
离心管 |PCR耗材 |冻存管 |枪头
移液管 |巴氏吸管
离心管盒、冻存盒 |冰盒 |离心管架
枪头盒 |培养皿 |培养板 |磁性分离
封板膜 |手套等防护用品 |载玻片
盖玻片 |存储盒 |染色缸染色架
其他染色耗材 |印迹膜与洗膜盒
胶片与暗盒 |滤纸、滤膜、滤器
空柱管 |蓝盖瓶 |其他实验耗材
订货电话:
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
周一至周五9:00-17:00
订货邮件:
order@beyotime.com
订货QQ:
4001683301
订单下载
碧云天订单.xls
产品目录下载
碧云天产品目录.pdf
订货须知
碧云天网站 微信公众号

 RNase H

  产品编号D7089
  产品包装: 100U
  产品价格: 162.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7089 RNase H 100U 162.00元

      RNase H,即Ribonuclease H,中文名为核糖核酸酶H,是一种核糖核酸内切酶,可以特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA。RNase H不能水解单链或双链DNA或RNA中的磷酸二酯键,即不能消化单链或双链DNA或RNA。
      特点:特异性消化DNA-RNA杂合链中的RNA,常用于cDNA第二链的合成。
      用途:DNA-RNA杂合链中去除RNA,例如cDNA第二条链合成前去除mRNA;通过互补的DNA序列实现对RNA的定点剪切;除去杂交到poly(dT)上的mRNA中的poly(A);体外多腺苷酸化反应(polyadenylation reaction)产物研究。
      来源:E.coli MRE-600细胞。
      分子量:约18.4kDa(单体)。
      活性定义:37℃20分钟内,能够催化1nmol杂合双链中的RNA形成酸可溶性核糖核苷酸形式所需的酶量定义为1个活性单位。
      活性检测条件:20mM Tris-HCl(pH7.8),40mM KCl,8mM MgCl2,1mM DTT,24μM[3H]-poly(A).poly(dT),
0.03mg/ml BSA ,4%(v/v)glycerol。
      纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含其它核糖核酸酶。
      酶储存溶液:25mM HEPES-KOH(pH8.0),50mM KCl,1mM DTT,1mM EDTA,0.1mg/ml BSA,50%(v/v)glycerol。
      Reaction Buffer(10X):200mM Tris-HCl(pH7.8),400mM KCl,80mM MgCl2,10mM DTT。
      失活或抑制:65℃加热10分钟可使RNase H失活。金属离子螯合剂和巯基封闭剂均能抑制RNase H活性。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D7089-1 RNase H(5U/μl) 100U
D7089-2 Reaction Buffer(10X) 0.2ml
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项: 
      酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明:
1. DNA-RNA杂合链中去除RNA:
a. 用反转录酶,例如BeyoRT M-MuLV反转录酶或BeyoRT M-MuLV反转录酶(RNase H-)合成cDNA第一条链,70℃孵育10分钟终止反应。
b. 在冰浴上向已经合成第一条链的20μl反应体系中依次加入如下试剂:

Reaction Buffer(10X) 2μl
无核酸酶去离子水 17.8μl
RNase H(5U/μl) 0.2μl

c. 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
d. 37℃孵育1小时。
e. 加入2.5μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀,以终止反应。
f. 后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化合成的双链cDNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(D0033)可以向碧云天订购。
说明:其他情况DNA-RNA杂合链中去除RNA的条件可以参考上述条件进行。RNase H反应的pH范围约在7.5-8.3均可。
2. 杂合链中RNA的去除和cDNA第二链的合成:
a. 用反转录酶,例如BeyoRT M-MuLV反转录酶(D7153)BeyoRT M-MuLV反转录酶(RNase H-)(D7159)BeyoRT cDNA第一链合成试剂盒(RNase H-)(D7166)合成cDNA第一条链,70℃孵育10分钟终止反应。
b. 在冰浴上向已经合成第一条链的20μl反应体系中依次加入如下试剂:

Reaction Buffer(10X)for DNA Polymerase I 8μl
无核酸酶去离子水 68.8μl
RNase H(5U/μl) 0.2μl
DNA Polymerase I, E.coli 3μl(30U)

c. 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
d. 15℃孵育2小时。(注意:反应温度不能超过15℃)
e. 加入5μl 0.5M EDTA(pH 8.0)混匀,以终止反应。
f. 后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化合成的双链cDNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(D0033)可以向碧云天订购。
注:Reaction Buffer(10X)for DNA Polymerase I:500mM Tris-HCl(pH 7.5 at 25℃),100mM MgCl2,10mM DTT。
3. 其他用途请参考上述用途或相关文献资料进行。

相关产品请点击如下按钮: