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T4 DNA Polymerase
产品编号: D7051
产品包装: 50U
产品价格: 188.00元
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D7051 T4 DNA Polymerase 50U 188.00元

      T4 DNA Polymerase,即T4 DNA聚合酶,是一种模板依赖的DNA聚合酶,可以在结合有引物的单链DNA 模板上,从
5'→3'方向催化DNA合成反应。T4 DNA Polymerase具有3'→5'外切酶活性,但不具有5'→3'外切酶活性。
      特点:T4 DNA Polymerase由于同时具有5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'DNA外切酶活性,可以用于将5'端突出末端补平或3'端突出末端削平。T4 DNA Polymerase的3'→5'DNA外切酶活性对于单链DNA要比双链DNA活性更高,即单链DNA要比双链DNA中的非配对链部分更容易被T4 DNA Polymerase所消化。T4 DNA Polymerase的3'→5'外切酶活性比Klenow Fragment要高约200倍。
      用途:T4 DNA Polymerase可用于催化以下反应:DNA 5'或3'突出末端的平滑化;通过置换反应进行标记DNA探针合成;定点突变过程中第二链的合成;不依赖于连接反应的PCR产物克隆。
      来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
      活性定义:37℃30分钟时间内,催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
      活性检测条件:67mM Tris-HCl(pH8.8),6.7mM MgCl2,1mM DTT,16.7mM(NH4)2SO4,0.2mg/ml BSA,
0.033mM of each dNTP,0.4MBq/ml[3H]-dTTP,0.2mM 热变性且经DNA酶部分消化过的小牛胸腺DNA。
      纯度:不含DNA内切酶,不含RNase。
      酶储存溶液:20mM potassium phosphate(pH7.5),200mM KCl,2mM DTT,and 50% glycerol。
      Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT,84mM
(NH4)2SO4
      缓冲液兼容性:在碧云天的内切酶反应缓冲液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性为100%,在1X B、1X G中的活性为75-100%。
      失活或抑制:70℃加热10分钟可使T4 DNA Polymerase失活。金属离子螯合剂可以抑制T4 DNA Polymerase的活性。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D7051-1 T4 DNA Polymerase(5U/μl) 50U
D7051-2 Reaction Buffer(5X) 0.3ml
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项: 
      酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明:
1. DNA 5'或3'突出末端平滑化:
a. 参考如下表格设置反应体系:

Reaction Buffer(5X) 4μl
digested DNA 1μg
dNTP Mixture(2.5mM each) 0.8μl
补充无核酸酶的去离子水 至19.8μl
T4 DNA Polymerase(5U/μl) 0.2μl

b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 11℃孵育20分钟,或室温(20-25℃)孵育5分钟。
d. 70℃孵育10分钟终止反应。
2. 其他用途请自行参考T4 DNA Polymerase的相关文献资料进行。

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