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 10X CutEZ™ Buffer

  产品编号D6018
  产品包装: 5ml
  产品价格: 58.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D6018 10X CutEZ™ Buffer 5ml 58.00元

      碧云天生产的10X CutEZ™ Buffer是一种能让超过200种限制性内切酶的活性达到100%的缓冲液。使用CutEZ™ Buffer,可以免去内切酶酶切时选择buffer的麻烦,特别是在双酶切时会变得更加简单易行。此外,许多DNA修饰酶在CutEZ™ Buffer中也保留了100%酶活性,这样在酶切后进行DNA修饰酶处理就无需进行DNA纯化了。
      各种内切酶和修饰酶在1X CutEZ™ buffer中的活性,请参考附录1和附录2。
      不同来源的限制性内切酶对于CutEZ™ Buffer的兼容性可能略有不同。
      1X CutEZ™ Buffer的组分为50 mM Potassium acetate, 20 mM Tris-acetate, 10 mM Magnesium acetate, 100 μg/ml BSA, pH 7.9 @ 25℃,与NEB公司的CutSmart™ Buffer完全一致。
      一个包装的本产品,如果用于20μl的酶切反应体系,共可以用于2500个酶切反应。

包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D6018 10X CutEZ™ Buffer 1ml×5
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      使用前,反应缓冲液应彻底融化并混匀。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.根据酶切反应体系加入总体积1/10的10X CutEZ™ Buffer,使其终浓度为1X,待所有组分都加入完毕,混匀后即可置于适当的温度中进行酶切反应。


附录1:
常用限制性内切酶在CutEZ™ Buffer中的活性和效能表如下:

Enzyme Sequence % Activity in CutEZ™ Heat Inac. Incu. Temp. Dam Dcm CpG Unit Substrate
AatII GACGT/C 100 80℃ 37℃ λ DNA
Acc65I G/GTACC 25 65℃ 37℃ scol scol pBC4 DNA
AccI GT/MKAC 100 80℃ 37℃ ol λ DNA
AciI CCGC(-3/-1) 100 65℃ 37℃ λ DNA
AclI AA/CGTT 100 No 37℃ λ DNA
AcuI CTGAAG(16/14) 100 65℃ 37℃ λ DNA
AfeI AGC/GCT 100 65℃ 37℃ pXba DNA
AflII C/TTAAG 100 65℃ 37℃ ΦX174 RF I DNA
AflIII A/CRYGT 50 80℃ 37℃ λ DNA
AgeI A/CCGGT 75 65℃ 37℃ λ DNA
AhdI GACNNN/NNGTC 100 65℃ 37℃ scol λ DNA
AleI CACNN/NNGTG 100 80℃ 37℃ scol λ DNA
AluI AG/CT 100 80℃ 37℃ λ DNA
AlwI GGATC(4/5) 100 No 37℃ λ DNA (dam-)
AlwNI CAGNNN/CTG 100 80℃ 37℃ ol λ DNA
ApaI GGGCC/C 100 65℃ 25℃ ol ol pXba DNA
ApaLI G/TGCAC 100 No 37℃ ol λ DNA/HindIII
ApeKI G/CWGC 10 No 75℃   λ DNA
ApoI R/AATTY 75 80℃ 50℃ λ DNA
AscI GG/CGCGCC 100 80℃ 37℃ λ DNA
AseI AT/TAAT 10 65℃ 37℃ λ DNA
AsiSI GCGAT/CGC 100 80℃ 37℃ pXba/XhoI
AvaI C/YCGRG 100 80℃ 37℃ λ DNA
AvaII G/GWCC 100 80℃ 37℃ ol ol λ DNA
AvrII C/CTAGG 100 No 37℃ λ DNA/HindIII
BaeI (10/15)ACNNNNGTAYC(12/7) 100 65℃ 25℃ scol pXba DNA
BamHI G/GATCC 100* No 37℃ λ DNA
BanI G/GYRCC 100 65℃ 37℃ scol scol λ DNA
BanII GRGCY/C 100 80℃ 37℃ λ DNA
BbsI GAAGAC(2/6) 75 65℃ 37℃ λ DNA
BbvCI CCTCAGC(-5/-2) 100 No 37℃ ol λ DNA
BbvI GCAGC(8/12) 100 65℃ 37℃ pBR322 (dcm+) DNA
BccI CCATC(4/5) 100 65℃ 37℃ pXba DNA
BceAI ACGGC(12/14) 100* 65℃ 37℃ pBR322 (dcm+) DNA
BcgI (10/12)CGANNNNNNTGC(12/10) 50* 65℃ 37℃ ol scol λ DNA
BciVI GTATCC(6/5) 100 80℃ 37℃ λ DNA
BclI T/GATCA 75 No 50℃ λ DNA (dam-)
BfaI C/TAG 100 80℃ 37℃ λ DNA
BfuAI ACCTGC(4/8) 10 65℃ 50℃ ol λ DNA
BglI GCCNNNN/NGGC 10 65℃ 37℃ scol λ DNA
BglII A/GATCT 10 No 37℃ λ DNA
BlpI GC/TNAGC 100 No 37℃ λ DNA
BmgBI CACGTC(-3/-3) 10 65℃ 37℃ λ DNA
BmrI ACTGGG(5/4) 100* 65℃ 37℃ λ DNA/HindIII
BmtI GCTAG/C 100 65℃ 37℃ pXba DNA
BpmI CTGGAG(16/14) 100 65℃ 37℃ λ DNA
Bpu10I CCTNAGC(-5/-2) 25 80℃ 37℃ λ DNA
BpuEI CTTGAG(16/14) 100 65℃ 37℃ λ DNA
BsaAI YAC/GTR 100 No 37℃ λ DNA
BsaBI GATNN/NNATC 100 80℃ 60℃ ol scol λ DNA (dam-)
BsaHI GR/CGYC 100 80℃ 37℃ scol λ DNA
BsaI GGTCTC(1/5) 100 65℃ 37℃ scol scol pXba DNA
BsaJI C/CNNGG 100 80℃ 60℃ λ DNA
BsaWI W/CCGGW 100 80℃ 60℃ λ DNA
BsaXI (9/12)ACNNNNNCTCC(10/7) 100 No 37℃ λ DNA
BseRI GAGGAG(10/8) 100 80℃ 37℃ λ DNA
BseYI CCCAGC(-5/-1) 50 80℃ 37℃ ol λ DNA
BsgI GTGCAG(16/14) 100 65℃ 37℃ λ DNA
BsiEI CGRY/CG 100 No 60℃ λ DNA
BsiHKAI GWGCW/C 100 No 65℃ λ DNA
BsiWI C/GTACG 25 65℃ 55℃ ΦX174 DNA
BslI CCNNNNN/NNGG 100 No 55℃ scol scol λ DNA
BsmAI GTCTC(1/5) 100 No 55℃ scol λ DNA
BsmBI CGTCTC(1/5) 25 80℃ 55℃ λ DNA
BsmFI GGGAC(10/14) 100 80℃ 65℃ ol ol pBR322 (dcm+) DNA
BsmI GAATGC(1/-1) 100 80℃ 65℃ λ DNA
BsoBI C/YCGRG 100 80℃ 37℃ λ DNA
Bsp1286I GDGCH/C 100 65℃ 37℃ λ DNA
BspCNI CTCAG(9/7) 100 80℃ 25℃ λ DNA
BspDI AT/CGAT 100 80℃ 37℃ ol λ DNA
BspEI T/CCGGA 10 80℃ 37℃ ol λ DNA (dam-)
BspHI T/CATGA 100 80℃ 37℃ ol λ DNA
BspMI ACCTGC(4/8) 10 65℃ 37℃ λ DNA
BspQI GCTCTTC(1/4) 100 80℃ 50℃ λ DNA
BsrBI CCGCTC(-3/-3) 100 80℃ 37℃ scol λ DNA
BsrDI GCAATG(2/0) 25 80℃ 65℃ λ DNA
BsrFI R/CCGGY 100 No 37℃ pBR322 (dcm+) DNA
BsrGI T/GTACA 25 80℃ 37℃ λ DNA
BsrI ACTGG(1/-1) 10 80℃ 65℃ ΦX174 RF I DNA
BssHII G/CGCGC 100 65℃ 50℃ λ DNA
BssKI /CCNGG 100 80℃ 60℃ ol ol λ DNA
BssSI CACGAG(-5/-1) 50 80℃ 37℃ λ DNA
BstAPI GCANNNN/NTGC 100 80℃ 60℃ scol λ DNA
BstBI TT/CGAA 100 No 65℃ λ DNA
BstEII G/GTNACC 75* No 60℃ λ DNA
BstNI CC/WGG 75 No 60℃ λ DNA
BstUI CG/CG 100 No 60℃ λ DNA
BstXI CCANNNNN/NTGG 25 80℃ 37℃ scol λ DNA
BstYI R/GATCY 100 No 60℃ λ DNA
BstZ17I GTA/TAC 100 No 37℃ scol λ DNA
Bsu36I CC/TNAGG 100 80℃ 37℃ λ DNA/HindIII
BtgI C/CRYGG 100 80℃ 37℃ pBR322 (dcm+) DNA
BtgZI GCGATG(10/14) 100 80℃ 60℃ λ DNA
BtsCI GGATG(2/0) 100 80℃ 50℃ λ DNA
BtsI GCAGTG(2/0) 100 80℃ 55℃ λ DNA
Cac8I GCN/NGC 100 65℃ 37℃ scol λ DNA
ClaI AT/CGAT 100 65℃ 37℃ ol λ DNA (dam-)
CspCI (11/13)CAANNNNNGTGG(12/10) 100 65℃ 37℃ λ DNA
CviAII C/ATG 100 65℃ 25℃ λ DNA
CviKI-1 RG/CY 100 No 37℃ pBR322 (dcm+) DNA
CviQI G/TAC 75* No 25℃ λ DNA
DdeI C/TNAG 100 65℃ 37℃ λ DNA
DpnI GA/TC 100 80℃ 37℃ ol pBR322 DNA
DpnII /GATC 25 65℃ 37℃ λ DNA (dam-)
DraI TTT/AAA 100 65℃ 37℃ λ DNA
DraIII CACNNN/GTG 25 65℃ 37℃ ol λ DNA
DrdI GACNNNN/NNGTC 100 65℃ 37℃ scol pUC19 DNA
EaeI Y/GGCCR 100 65℃ 37℃ ol ol λ DNA
EagI C/GGCCG 10 65℃ 37℃ pXba DNA
EarI CTCTTC(1/4) 100 65℃ 37℃ ol λ DNA
EciI GGCGGA(11/9) 100 65℃ 37℃ scol λ DNA
EcoNI CCTNN/NNNAGG 100 65℃ 37℃ λ DNA
EcoO109I RG/GNCCY 100 65℃ 37℃ ol λ DNA/HindIII
EcoP15I CAGCAG(25/27) 100 65℃ 37℃ pUC19 DNA
EcoRI G/AATTC 50* 65℃ 37℃ scol λ DNA
EcoRV GAT/ATC 10 80℃ 37℃ scol λ DNA
FatI /CATG 50 80℃ 55℃ pUC19 DNA
FauI CCCGC(4/6) 100 65℃ 55℃ λ DNA
Fnu4HI GC/NGC 100 No 37℃ ol λ DNA
FokI GGATG(9/13) 100 65℃ 37℃ ol ol λ DNA
FseI GGCCGG/CC 100 65℃ 37℃ scol Adenovirus-2 DNA
FspI TGC/GCA 100 No 37℃ λ DNA
HaeII RGCGC/Y 100 80℃ 37℃ λ DNA
HaeIII GG/CC 100 80℃ 37℃ λ DNA
HgaI GACGC(5/10) 100 65℃ 37℃ ΦX174 DNA
HhaI GCG/C 100 65℃ 37℃ λ DNA
HincII GTY/RAC 100 65℃ 37℃ scol λ DNA
HindIII A/AGCTT 50 80℃ 37℃ λ DNA
HinfI G/ANTC 100 80℃ 37℃ scol λ DNA
HinP1I G/CGC 100 65℃ 37℃ λ DNA
HpaI GTT/AAC 100 No 37℃ scol λ DNA
HpaII C/CGG 100 80℃ 37℃ λ DNA
HphI GGTGA(8/7) 100 65℃ 37℃ λ DNA
Hpy188I TCN/GA 100 65℃ 37℃ scol pBR322 (dcm+)
Hpy99I CGWCG/ 100 65℃ 37℃ λ DNA
HpyAV CCTTC(6/5) 100 65℃ 37℃ ol λ DNA
HpyCH4III ACN/GT 100 65℃ 37℃ λ DNA
HpyCH4I A/CGT 100 65℃ 37℃ pUC19 DNA
HpyCH4V TG/CA 100 65℃ 37℃ λ DNA
KasI G/GCGCC 100 65℃ 37℃ pBR322 DNA
KpnI GGTAC/C 50* No 37℃ pXba DNA
MboI /GATC 100 65℃ 37℃ ol λ DNA (dam-)
MboII GAAGA(8/7) 100 65℃ 37℃ ol λ DNA (dam-)
MfeI C/AATTG 100 No 37℃ λ DNA
MluI A/CGCGT 25 80℃ 37℃ λ DNA
MlyI GAGTC(5/5) 100 65℃ 37℃ λ DNA
MmeI TCCRAC(20/18) 100 65℃ 37℃ ol ΦX174 DNA
MnlI CCTC(7/6) 100 65℃ 37℃ λ DNA
MscI TGG/CCA 100 80℃ 37℃ ol λ DNA
MseI T/TAA 100 65℃ 37℃ λ DNA
MslI CAYNN/NNRTG 100 80℃ 37℃ λ DNA
MspA1I CMG/CKG 100 65℃ 37℃ ol λ DNA
MspI C/CGG 100 No 37℃ λ DNA
MwoI GCNNNNN/NNGC 100 No 60℃ scol λ DNA
NaeI GCC/GGC 100 No 37℃ pXba DNA
NarI GG/CGCC 100 65℃ 37℃ pXba DNA
NciI CC/SGG 100 No 37℃ ol λ DNA
NcoI C/CATGG 100 80℃ 37℃ λ DNA
NdeI CA/TATG 100 65℃ 37℃ λ DNA
NgoMIV G/CCGGC 100 No 37℃ Adenovirus-2 DNA
NheI G/CTAGC 100 65℃ 37℃ scol λ DNA/HindIII
NlaIII CATG/ 100 65℃ 37℃ ΦX174 DNA
NlaIV GGN/NCC 100 65℃ 37℃ ol ol pBR322 DNA
NmeAIII GCCGAG(21/19) 100 65℃ 37℃ ΦX174 RF I DNA
NotI GC/GGCCGC 25 65℃ 37℃ pBC4 DNA
NruI TCG/CGA 10 No 37℃ ol λ DNA
NsiI ATGCA/T 25 65℃ 37℃ λ DNA
NspI RCATG/Y 100 65℃ 37℃ λ DNA
PacI TTAAT/TAA 100 65℃ 37℃ pNEB193 DNA
PaeR7I C/TCGAG 100 No 37℃ λ DNA/HindIII
PciI A/CATGT 50* 80℃ 37℃ pXba DNA
PflFI GACN/NNGTC 100 65℃ 37℃ pBC4 DNA
PflMI CCANNNN/NTGG 50 65℃ 37℃ ol λ DNA
PhoI GG/CC 100 No 37℃ scol scol λ DNA
PleI GAGTC(4/5) 100 65℃ 37℃ scol λ DNA
PmeI GTTT/AAAC 100 65℃ 37℃ scol λ DNA
PmlI CAC/GTG 100 65℃ 37℃ λ DNA/HindIII
PpuMI RG/GWCCY 100 No 37℃ ol λ DNA/HindIII
PshAI GACNN/NNGTC 100 65℃ 37℃ scol λ DNA
PsiI TTA/TAA 100 65℃ 37℃ λ DNA
PspGI /CCWGG 100 No 75℃ T7 DNA
PspOMI G/GGCCC 100 65℃ 37℃ scol ol pXba DNA
PspXI VC/TCGAGB 100 No 37℃ λ DNA/HindIII
PstI CTGCA/G 50* 80℃ 37℃ λ DNA
PvuI CGAT/CG 10 No 37℃ pXba DNA
PvuII CAG/CTG 100* No 37℃ λ DNA
RsaI GT/AC 100 No 37℃ scol λ DNA
RsrII CG/GWCCG 100 65℃ 37℃ λ DNA
SacI GAGCT/C 100 65℃ 37℃ λ DNA/HindIII
SacII CCGC/GG 100 65℃ 37℃ pXba DNA
SalI G/TCGAC 10 65℃ 37℃ λ DNA/HindIII
SapI GCTCTTC(1/4) 100 65℃ 37℃ λ DNA
Sau3AI /GATC 100 65℃ 37℃ ol λ DNA
Sau96I G/GNCC 100 65℃ 37℃ ol ol λ DNA
SbfI CCTGCA/GG 100 80℃ 37℃ λ DNA
ScaI AGT/ACT N/R 80℃ 37℃ λ DNA
ScrFI CC/NGG 100 65℃ 37℃ ol ol λ DNA
SexAI A/CCWGGT 100 65℃ 37℃ pBC4 DNA (dcm-)
SfaNI GCATC(5/9) 25 65℃ 37℃ scol ΦX174 RF I DNA
SfcI C/TRYAG 100 65℃ 37℃ λ DNA
SfiI GGCCNNNN/NGGCC 100 No 50℃ ol scol Adenovirus-2 DNA
SfoI GGC/GCC 100 No 37℃ scol λ DNA/HindIII
SgrAI CR/CCGGYG 100 65℃ 37℃ λ DNA
SmaI CCC/GGG 100 65℃ 25℃ λ DNA
SmlI C/TYRAG 100 No 55℃ λ DNA
SnaBI TAC/GTA 100 80℃ 37℃ T7 DNA
SpeI A/CTAGT 100 80℃ 37℃ Adenovirus-2 DNA
SphI GCATG/C 100 65℃ 37℃ λ DNA
SspI AAT/ATT 50 65℃ 37℃ λ DNA
StuI AGG/CCT 100 No 37℃ ol λ DNA
StyD4I /CCNGG 100 65℃ 37℃ ol ol λ DNA
StyI C/CWWGG 10 65℃ 37℃ λ DNA
SwaI ATTT/AAAT 10 65℃ 25℃ M13mp19 RF I DNA
TaqαI T/CGA 100 80℃ 65℃ ol λ DNA
TfiI G/AWTC 100 No 65℃ scol λ DNA
TliI C/TCGAG 50 No 75℃ λ DNA/HindIII
TseI G/CWGC 100 No 65℃ scol λ DNA
Tsp45I /GTSAC 100 No 65℃ λ DNA
Tsp509I /AATT N/R No 65℃ λ DNA
TspMI C/CCGGG 100 No 75℃ pUCAdeno
TspRI NNCASTGNN/ 100 No 65℃ λ DNA
Tth111I GACN/NNGTC 100 No 65℃ pBC4 DNA
XbaI T/CTAGA 100 65℃ 37℃ ol λ DNA(dam-)/Hind III
XcmI CCANNNNN/NNNNTGG 100 65℃ 37℃ λ DNA
XhoI C/TCGAG 100 65℃ 37℃ λ DNA/HindIII
XmaI C/CCGGG 100 65℃ 37℃ Adenovirus-2 DNA
XmnI GAANN/NNTTC 100 65℃ 37℃ λ DNA
ZraI GAC/GTC 100 80℃ 37℃ λ DNA

注:*,在此buffer中可能产生星号活性。λ DNA/HindIII:λ DNA digested with HindIII.
不敏感
完全阻断
ol 重叠性阻断
scol 某些重叠组合后被阻断
部分阻断
ol 重叠性部分阻断
scol 某些重叠组合后被部分阻断

附录2:
DNA修饰酶在CutEZ™ Buffer中的活性表格如下:

Enzyme % Activity in CutEZ™ Required Supplements
Alkaline Phosphatase(CIP) 100 -
Antarctic Phosphatase 100 Zn2+
Bst DNA Polymerase 100 -
CpG Methyltransferase(M.SssI) 100 -
DNA Polymerase Ⅰ 100 -
DNA PolymeraseⅠ, Large(klenow)Fragment 100 -
DNA Polymerase Klenow Exo- 100 -
DNaseⅠ(RNase-free) 100 Ca2+
E.coli DNA Ligase 100 NAD
Endonuclease Ⅲ(Nth), recombinant 100 -
Endonuclease VIII 100 -
Exonuclease Ⅲ 100 -
GpC Methyltransferase(M.CviPI) 0-50 DTT
McrBC 100 -
Micrococcal Nuclease 100 -
Nuclease BAL-31 100 -
phi29 DNA Polymerase 100 -
RecJf 100 -
T3 DNA Ligase 100 ATP+PEG
T4 DNA Ligase 100 ATP
T4 DNA Polymerase 100 -
T4 Phage β-glucosyltransferase(T4-BGT) 100 -
T4 Polynucleotide Kinase 100 ATP
T4 PNK(3' phosphatase minus) 100 ATP
T7 DNA Ligase 100 ATP+PEG
T7 DNA Polymerase(unmodified) 100 -
T7 Exonuclease 100 -
USER Enzyme, recombinant 100 -



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