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 pCMV-N-Myc

  产品编号D2756
  产品包装: 1μg
  产品价格: 862.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2756 pCMV-N-Myc 1μg 862.00元

      pCMV-N-Myc是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和Myc tag (Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
      pCMV-N-Myc质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
CMV promoter 1–602
T3 promoter and T3 primer binding site 620–639
Myc tag 679–708
multiple cloning site 711–784
T7 promoter and T7 primer binding site 827–848
SV40 polyA signal 860–1243
f1 origin of ss-DNA replication 1381–1687
bla promoter 1712–1836
SV40 promoter 1856–2194
neomycin/kanamycin resistance ORF 2229–3020
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3021–3479
pUC origin 3608–4275

      pCMV-N-Myc质粒的图谱如下:

      pCMV-N-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:

Myc tag
SacI M E Q K L I S E E
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG
CCGCC
ATG GA
GCAGAAACTC
ATCTCTGAAG
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC
GGCGG
TAC CT
CGTCTTTGAG
TAGAGACTTC
XmaI PstI
D  L SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI
701
AGGATCTG AG
CCCGGGCGGA TCCAAGCTTC TGCAGGAATT CGATATCGTC
TCCTAGAC TC
GGGCCCGCCT AGGTTCGAAG ACGTCCTTAA GCTATAGCAG
BglII XhoI XbaI SpeI ApaI KpnI
751 GACAGATCTC TCGAGTCTAG AACTAGTGGG CCCGGTACCT TAATTAATTA
CTGTCTAGAG AGCTCAGATC TTGATCACCC GGGCCATGGA ATTAATTAAT

      pCMV-N-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Myc)包括:

Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru I
PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca I
Spl I Xca I

      pCMV-N-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Myc once)包括:

Nde I CA`TA,TG 241 Apa I G,GGCC`C 783
SnaB I TAC|GTA 347 Pvu I CG,AT`CG 861
Nhe I G`CTAG,C 598 Bcl I T`GATC,A 1015
Sac I G,AGCT`C 656 Mun I C`AATT,G 1108
Sac II CC,GC`GG 663 Hpa I GTT|AAC 1121
BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664 Mlu I A`CGCG,T 1244
Not I GC`GGCC,GC 669 Dra III CAC,NNN`GTG 1474
Ear I CTCTTC 7/10 693 Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2133
PspA I C`CCGG,G 712 BseR I GAGGAG 16/14 2176
Xma I C`CCGG,G 712 Stu I AGG|CCT 2179
Srf I GCCC|GGGC 714 Cla I AT`CG,AT 2198
Sma I CCC|GGG 714 Kas I G`GCGC,C 2357
BamH I G`GATC,C 719 Nar I GG`CG,CC 2358
Hind III A`AGCT,T 725 Ehe I GGC|GCC 2359
Pst I C,TGCA`G 735 Bbe I G,GCGC`C 2361
EcoR I G`AATT,C 737 Msc I TGG|CCA 2440
EcoR V GAT|ATC 745 Tth111 I GACN`N,NGTC 2476
Sal I G`TCGA,C 749 BsrD I GCAATG, 8 2591
Acc I GT`MK,AC 750 Bsp1286 I G,DGCH`C 2661
Bgl II A`GATC,T 755 Rsr II CG`GWC,CG 2874
PaeR7 I C`TCGA,G 761 BsiC I TT`CG,AA 3040
Xho I C`TCGA,G 761 BstB I TT`CG,AA 3040
Xba I T`CTAG,A 767 Bsa I GGTCTC 7/11 3347
Spe I A`CTAG,T 773 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3687
Bsp120 I G`GGCC,C 779 ApaL I G`TGCA,C 3962

      pCMV-N-Myc质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
      T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
      T7 primer(827-848): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
       pCMV-N-Myc的全序列信息:D2756 pCMV-N-Myc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2756 pCMV-N-Myc 1μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.pCMV-N-Myc质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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使用本产品的文献:
1. Xia M, Gonzalez P, Li C, Meng G, Jiang A, Wang H, Gao Q, Debatin KM, Beltinger C, Wei J.
Mitophagy enhances oncolytic measles virus replication by mitigating DDX58/RIG-I-like receptor signaling.
J Virol. 2014 May;88(9):5152-64.
2. Li Y, Zhang L, Qu T, Li L, Zhang G.
Characterization of Oyster Voltage-Dependent Anion Channel 2 (VDAC2) Suggests Its Involvement inApoptosis and Host Defense.
PLoS One. 2016 Jan 4;11(1):e0146049.