碧云天在线咨询


温馨提示:客服在线时间为工作日9:00-17:00。
其他时间请发送邮件,我们会尽快给您回复。

产品订购与售后服务:order@beyotime.com
技术咨询:info@beyotime.com

中文 |English
试剂
质粒抽提 |DNA纯化胶回收
基因组DNA抽提 |DNA电泳
DNA分子量标准 |菌种与培养
感受态制备 |T载体、质粒 |基因突变
DNA连接 |DNA标记和检测 |内切酶
修饰酶 |反转录 |PCR相关 |RNA相关
其他
|重组蛋白 |生化酶 |蛋白定量
裂解及蛋白抽提 |蛋白纯化
抗体制备 |蛋白电泳
蛋白分子量标准 |一抗 |二抗
Western |免疫沉淀 |免疫染色 |ELISA
细胞凋亡坏死 |细胞增殖 |自噬
细胞培养 |细胞组织染色 |细胞转染
细胞组分分离
EMSA相关 |报告基因相关
一氧化氮相关 |活性氧相关
炎症相关 |代谢相关
抑制剂激活剂等 |荧光探针
其他试剂盒
常用试剂
仪器
脱色摇床 |细菌培养摇床
漩涡振荡器 |混匀仪 |搅拌器
超声破碎仪 |匀浆机
其它混合破碎仪器 |移液器类
培养箱 |水浴锅 |干燥箱、烘箱
干式恒温器 |其它温控设备 |制冰机
定时器 |离心机 |氮吹仪 |旋转蒸发仪
真空泵及其它泵 |蠕动泵 |灭菌设备
洗板机 |超声波清洗器 |紫外分析仪
酶标仪 |天平 |pH计 |电导仪
氧化还原电位仪 |溶氧仪
超净工作台 |生物安全柜
耗材
离心管 |PCR耗材 |冻存管 |枪头
移液管 |巴氏吸管
离心管盒、冻存盒 |冰盒 |离心管架
枪头盒 |培养皿 |培养板 |磁性分离
封板膜 |手套等防护用品 |载玻片
盖玻片 |存储盒 |染色缸染色架
其他染色耗材 |印迹膜与洗膜盒
胶片与暗盒 |滤纸、滤膜、滤器
空柱管 |蓝盖瓶 |其他实验耗材
订货电话:
400-1683301
800-8283301
电话订货时间:
周一至周五9:00-17:00
订货邮件:
order@beyotime.com
订货QQ:
4001683301
订单下载
碧云天订单.xls
产品目录下载
碧云天产品目录.pdf
订货须知
碧云天网站 微信公众号

 pCMV-N-HA

  产品编号D2733
  产品包装: 1μg
  产品价格: 862.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2733 pCMV-N-HA 1μg 862.00元

      pCMV-N-HA是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达N端和HA tag(HA标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码HA标签的序列,因此可以表达出含有HA标签的融合蛋白,可以方便地使用抗HA的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
      pCMV-N-HA质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
CMV promoter 1–602
T3 promoter and T3 primer binding site 620–639
HA tag 679–705
multiple cloning site 708–781
T7 promoter and T7 primer binding site 824–845
SV40 polyA signal 857–1240
f1 origin of ss-DNA replication 1378–1684
bla promoter 1709–1833
SV40 promoter 1853–2191
neomycin/kanamycin resistance ORF 2226–3017
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3018–3476
pUC origin 3605–4272

      pCMV-N-HA质粒的图谱如下:

      pCMV-N-HA的多克隆位点的详细图谱如下:

HA tag
SacI M Y P Y D V P D Y
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG
CCGCC
ATG TA
CCCATACGAT
GTTCCAGATT
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC
GGCGG
TAC AT
GGGTATGCTA
CAAGGTCTAA
XmaI PstI
A SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI
701
ACGCT AGCCC
GGGCGGATCC AAGCTTCTGC AGGAATTCGA TATCGTCGAC
TGCGA TCGGG
CCCGCCTAGG TTCGAAGACG TCCTTAAGCT ATAGCAGCTG
BglII XbaI SpeI ApaI
751 AGATCTCTCG AGTCTAGAAC TAGTGGGCCC GGTACCTTAA TTAATTAAGG
TCTAGAGAGC TCAGATCTTG ATCACCCGGG CCATGGAATT AATTAATTCC

      pCMV-N-HA中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-HA)包括:

Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I
Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I
Sca I Spl I

      pCMV-N-HA中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-HA once)包括:

Nde I CA`TA,TG 241 Pvu I CG,AT`CG 858
SnaB I TAC|GTA 347 Bcl I T`GATC,A 1012
Sac I G,AGCT`C 656 Mun I C`AATT,G 1105
Sac II CC,GC`GG 663 Hpa I GTT|AAC 1118
BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664 Mlu I A`CGCG,T 1241
Not I GC`GGCC,GC 669 Dra III CAC,NNN`GTG 1471
PspA I C`CCGG,G 709 Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2130
Xma I C`CCGG,G 709 BseR I GAGGAG 16/14 2173
Srf I GCCC|GGGC 711 Stu I AGG|CCT 2176
Sma I CCC|GGG 711 Cla I AT`CG,AT 2195
BamH I G`GATC,C 716 Kas I G`GCGC,C 2354
Hind III A`AGCT,T 722 Nar I GG`CG,CC 2355
Pst I C,TGCA`G 732 Ehe I GGC|GCC 2356
EcoR I G`AATT,C 734 Bbe I G,GCGC`C 2358
EcoR V GAT|ATC 742 Msc I TGG|CCA 2437
Sal I G`TCGA,C 746 Tth111 I GACN`N,NGTC 2473
Acc I GT`MK,AC 747 BsrD I GCAATG, 8 2588
Bgl II A`GATC,T 752 Bsp1286 I G,DGCH`C 2658
PaeR7 I C`TCGA,G 758 Rsr II CG`GWC,CG 2871
Xho I C`TCGA,G 758 BsiC I TT`CG,AA 3037
Xba I T`CTAG,A 764 BstB I TT`CG,AA 3037
Spe I A`CTAG,T 770 Bsa I GGTCTC 7/11 3344
Bsp120 I G`GGCC,C 776 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3684
Apa I G,GGCC`C 780 ApaL I G`TGCA,C 3959

      pCMV-N-HA质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
      T3 primer (620–639): 5′ AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
      T7 primer (824-845): 5′ GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
      pCMV-N-HA的全序列信息: D2733 pCMV-N-HA-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2733 pCMV-N-HA 1μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.pCMV-N-HA质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
相关产品请点击如下按钮:

使用本产品的文献:
1. Xing J, Wang S, Lin R, Mossman KL, Zheng C.
Herpes simplex virus 1 tegument protein US11 downmodulates the RLR signaling pathway via direct interactionwith RIG-I and MDA-5.
J Virol. 2012 Apr;86(7):3528-40.
2. Xing J, Ni L, Wang S, Wang K, Lin R, Zheng C.
HSV-1 encoded tegument protein VP16 abrogates the production of interferon β by inhibiting NF-κB activationand blocking IRF-3 to recruit its coactivator CBP.
J Virol. 2013 Sep;87(17):9788-801.
3. Cai M, Li M, Wang K, Wang S, Lu Q, Yan J, Mossman KL, Lin R, Zheng C.
The herpes simplex virus 1-encoded envelope glycoprotein B activates NF-κB through the Toll-like receptor 2 and MyD88/TRAF6-dependent signaling pathway.
PLoS One. 2013;8(1):e54586. 
4. Qiu Y, Ding Y, Zou L, Tan Z, Liu T, Fu X, Xu W.
Divergent roles of amino acid residues inside and outside the BB loop affect human Toll-like receptor (TLR)2/2,TLR2/1 and TLR2/6 responsiveness.
PLoS One. 2013 Apr 23;8(4):e61508. 
5. Zhang J, Wang S, Wang K, Zheng C.
Herpes simplex virus 1 DNA polymerase processivity factor UL42 inhibits TNF-α-induced NF-κB activation byinteracting with p65/RelA and p50/NF-κB1.
Med Microbiol Immunol. 2013 Aug;202(4):313-25.
6. Huang Y, Zhang J, Halawa MA, Yao S.
Nuclear localization signals of varicella zoster virus ORF4.
Virus Genes. 2014 Apr;48(2):243-51.
7. Zhu X, Pan Q, Huang N, Wu J, Zhen N, Sun F, Li Z, Yang Q.
RAD51 regulates CHK1 stability via autophagy to promote cell growth in esophageal squamous carcinomacells.
Tumour Biol. 2016 Oct 14. [Epub ahead of print]