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 pCMV-C-Myc

  产品编号D2672
  产品包装: 1μg
  产品价格: 862.00元
产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2672 pCMV-C-Myc 1μg 862.00元

      pCMV-C-Myc是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
      pCMV-C-Myc质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
CMV promoter 1-602
T3 promoter and T3 primer binding site 620-639
multiple cloning site 680-740
c-Myc tag 741-770
T7 promoter and T7 primer binding site 823-844
SV40 polyA signal 856-1239
f1 origin of ss-DNA replication 1377-1681
bla promoter 1706-1830
SV40 promoter 1850-2188
neomycin/kanamycin resistance ORF 2223-3014
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal 3015-3473
pUC origin 3602-4269

      pCMV-C-Myc质粒的图谱如下:

      pCMV-C-Myc的多克隆位点的详细图谱如下:

XmaIPstI
SacI Smal BamHI HindIII
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA
Myc
EcoRIEcoRVSalI BglII XhoI XbaI
E Q K L
701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA
GAGCAGAAAC
CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT
CTCGTCTTTG
tag
I S E E D L ApaI
751 TCATCTCTGA
AGAGGATCTG
TAA GGGCCCG
GTACCTTAAT TAATTAAGGT
AGTAGAGACT
TCTCCTAGAC
ATT CCCGGGC
CATGGAATTA ATTAATTCCA

      pCMV-C-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Myc)包括:

Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I Nru I
PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I Sca I
Spe I Spl I

      pCMV-C-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Myc once)包括:

Nde I CA`TA,TG 241 Pvu I CG,AT`CG 857
SnaB I TAC|GTA 347 Bcl I T`GATC,A 1011
Nhe I G`CTAG,C 598 Mun I C`AATT,G 1104
Sac I G,AGCT`C 656 Hpa I GTT|AAC 1117
Sac II CC,GC`GG 663 Mlu I A`CGCG,T 1240
BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664 Dra III CAC,NNN`GTG 1470
Not I GC`GGCC,GC 669 Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2127
PspA I C`CCGG,G 681 BseR I GAGGAG 16/14 2170
Xma I C`CCGG,G 681 Stu I AGG|CCT 2173
Srf I GCCC|GGGC 683 Cla I AT`CG,AT 2192
Sma I CCC|GGG 683 Kas I G`GCGC,C 2351
BamH I G`GATC,C 688 Nar I GG`CG,CC 2352
Hind III A`AGCT,T 694 Ehe I GGC|GCC 2353
Pst I C,TGCA`G 704 Bbe I G,GCGC`C 2355
EcoR I G`AATT,C 706 Msc I TGG|CCA 2434
EcoR V GAT|ATC 714 Tth111 I GACN`N,NGTC 2470
Sal I G`TCGA,C 718 BsrD I GCAATG, 8 2585
Acc I GT`MK,AC 719 Bsp1286 I G,DGCH`C 2655
Bgl II A`GATC,T 724 Rsr II CG`GWC,CG 2868
PaeR7 I C`TCGA,G 730 BsiC I TT`CG,AA 3034
Xho I C`TCGA,G 730 BstB I TT`CG,AA 3034
Xba I T`CTAG,A 736 Bsa I GGTCTC 7/11 3341
Ear I CTCTTC 7/10 755 HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3681
Bsp120 I G`GGCC,C 775 ApaL I G`TGCA,C 3956
Apa I G,GGCC`C 779

      pCMV-C-Myc质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
      T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
      T7 primer(823-844): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
      pCMV-C-Myc的全序列信息: D2672 pCMV-C-Myc-seq.txt
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D2672 pCMV-C-Myc 1μg
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项:
      本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.pCMV-C-Myc质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
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使用本产品的文献:
1. Wang PH, Yang LS, Gu ZH, Weng SP, Yu XQ, He JG.
Nucleic acid-induced antiviral immunity in shrimp.
Antiviral Res. 2013 Sep;99(3):270-80.