产品简介:
碧云天生产的荧光素酶报告基因检测试剂盒(Luciferase Reporter Gene Assay Kit),是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。
通过荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在luciferase的上游或其他适当的地方,构建成报告基因质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。
萤火虫荧光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm(centered around 560nm)。
本试剂盒可以测定100个样品。
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
RG005-1 |
报告基因细胞裂解液 |
60ml |
RG005-2 |
荧光素酶检测试剂 |
10ml |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
报告基因细胞裂解液4℃保存3个月有效,-20℃保存一年有效;荧光素酶检测试剂-20℃避光保存6个月有效,-70℃避光保存一年有效。
注意事项:
为取得最佳测定效果,在用单管的荧光测定仪测定时,样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内,例如30秒内。
由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
为保证荧光素酶检测试剂的稳定性,可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于室温。一般来说,如果不分装使用三次(期间冻融三次),对测定结果无明显影响。
样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品最好使用相同的测定时间。
为避免由于质粒转细胞时效率的差异而带来的误差,可以同时转入Renilla荧光素酶的报告基因质粒作为内参,采用碧云天的双荧光素酶报告基因检测试剂盒(RG008/RG009)进行检测;也可以同时转入β-半乳糖甘酶报告基因质粒作为内参,然后采用碧云天生产的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)进行检测。采用碧云天的荧光素酶报告基因检测试剂盒中的报告基因细胞裂解液裂解获得的样品可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)中的测定。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。